上海市自然科学基金(09ZR1426400)
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 相关作者：程计林杜玲孙俊刘建生王立巍更多>>
- 相关机构：上海市公共卫生临床中心上海交通大学医学院附属瑞金医院佳木斯医学院更多>>
- 发文基金：上海市自然科学基金上海市卫生局青年科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- TIMP-1 B细胞表位的预测和鉴定被引量：4
- 2012年
- 目的:预测并鉴定金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)蛋白B细胞表位。方法:采用DNAStar和BcePred分析软件联合预测TIMP-1的B细胞表位,以此合成8分支多抗原肽结构的表位肽(MAP),并与通用型T辅助表位肽(VQGEESNDK,氨基酸163～171)联合免疫家兔,检测免疫血清效价,用Western blotting和间接酶联免疫吸附测定等方法鉴定其特异性和抗体亲和力。结果:软件预测显示,TIMP-1的第27～41位(MAP1)、第57～71位(MAP2)、第95～109位(MAP3)和第193～207位(MAP4)氨基酸序列最可能为其优势B细胞表位。抗体滴度动态检测表明,MAP2、MAP3和MAP4均能诱导产生特异性抗体,其中MAP2和MAP4诱导的抗体水平最高;免疫印迹证实MAP2、MAP3和MAP4诱导产生特异性的TIMP-1抗体;间接ELISA证实MAP4与商品化TIMP-1抗体具有最高的亲和力。结论:TIMP-1的第27～41位和第193～207位氨基酸为其优势B细胞表位,其中第193～207位氨基酸的免疫原性最强,这为TIMP-1多肽抗体和B细胞优势短肽疫苗研制提供了理论依据。
- 杜玲孙俊刘建生程计林
- 关键词：金属蛋白酶组织抑制物-1多抗原肽
- 乙型肝炎相关肝癌患者乙型肝炎病毒不同抗原肽特异性CD3＋CD8＋人白细胞抗原-A2＋细胞表达被引量：2
- 2012年
- 目的探讨乙型肝炎相关肝细胞癌（HCC）患者外周血单个核细胞（PBMc）中HBV不同抗原肽特异性CD3＋CD8＋人白细胞抗原（HLA）-A2＋细胞的表达。方法从4例HLA-A2阳性乙型肝炎相关HCC患者外周血中分离PBMC，分别与HBV抗原肽sAg（FLLTRILTI、GLSPTVWLSV、WLSLLVPFV），HBVcore（FLPSDFFPSV）和HBVpol（FLLSLGIHL）及抗一CD3一pacific blue、抗-CD8-异硫氰酸荧光素共育，流式细胞仪分析HBV／HLA—A2-CD3-CD8阳性细胞，克隆培养，筛选出克隆培养的抗HBVT淋巴细胞；再与含有HBV的肝癌细胞株HepG2（HLA-A2^＋）共育，ELISA法检测其分泌IFN-γ水平。结果4例患者体内受GLSPTVWLSV肽诱导的特异性抗HBVT淋巴细胞占所有CD8^＋细胞的1．44％±0．04％，高于FLLTRILTI肽的0．68％±0．08％、FLPSDFFPSV肽的1．06％±0．09％、FLLSLGIHL肽的0．56％±0．04％和WLSLLVPFV肽的0．46％±0．08％（t=0．001，P〈0．05）。将GLSPTVWLSV／HLAA2获得的HBV／HLA-A2 Pentamer-CD3-CD8阳性细胞克隆，获得2株抗HBVCD8T淋巴细胞，与负荷GLSPTVWLSV肽段的HepG2（HLA-A2＋）细胞共育，CD8T淋巴细胞分泌较高水平的IFN-γ。结论乙型肝炎相关HCC患者外周血中存在针对不同HBV抗原肽的特异性抗HBVCD8T淋巴细胞，其表达量与抗原肽段有关。
- 程计林王立巍邱趁丽艾迎春陆基华殷科珊黄绍萍唐荣徐烈张毅
- 关键词：单核细胞肽类
