江西省教育厅科学技术研究项目(GJJ10379)
- 作品数:3 被引量:9H指数:2
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- 相关机构:南昌大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划江西省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程生物学更多>>
- 高黏附力双歧杆菌的筛选与鉴定被引量:4
- 2012年
- 利用体外细胞培养法,从实验室现有的10株双歧杆菌中筛选具有较强粘附能力的菌株。采用革兰氏染色法和平板计数法,评价了这10株双歧杆菌对HT-29细胞的粘附性能,通过测定这10株双歧杆菌的16S rRNA基因序列(16S rDNA)进行分类学鉴定。结果显示,WBBI01,WBBI02,WBIN03,WBBI06具有极强的黏附力,其黏附指数分别达1.97×103,2.17×103,3.57×103,1.88×103。经16S rDNA测序鉴定WBBI01,WBIN03,WBBI06均与两歧双歧杆菌S17有极高的同源性,而WBBI02属于长双歧杆菌。结果表明,双歧杆菌黏附性能具有明显的种属特异性,不同种属双歧杆菌的粘附能力相差极大,以两歧双歧杆菌的黏附性能最强,婴儿长双歧杆菌为最弱。
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- 关键词:益生菌RDNA双歧杆菌
- 双歧杆菌原生质体的制备及其转化系统的建立被引量:4
- 2012年
- 考察了长双歧杆菌WBL001菌体生长状态、酶解浓度、时长、温度以及不同渗透压稳定剂等因素,获得长双歧杆菌WBL001原生质体制备及再生的优化条件:长双歧杆菌以3%接种量活化至MRS培养基,培养至对数中期(OD600∶1),5μg/mL变溶菌素,37℃孵育30 min,以原生质体稳定液SMM为反应缓冲液,原生质体生成率达到81%,其再生率达到48%;在此基础上,通过聚乙二醇PEG融合,将穿梭表达载体pBAX转入双歧杆菌原生质体,成功建立双歧杆菌转化体系。
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- 关键词:双歧杆菌原生质体
- Serpin多抗制备和产Serpin的双歧杆菌菌株的初步筛选被引量:1
- 2011年
- 从长双歧杆菌WBL001基因组中克隆了serpin基因,构建重组Serpin蛋白的原核表达体系pBX2-serpin,纯化表达产物作为抗原,免疫小鼠制备Serpin的多克隆抗体。采用偶联Serpin的磁珠纯化多克隆抗体,并探究了不同溶剂对抗体洗脱效率的影响。纯化的多抗用于斑点杂交筛选产Serpin蛋白的菌株。结果表明:磁珠纯化多克隆抗体以1 mol/L NaOH的洗脱率最高,达50%;纯化后的Serpin抗体消除了与部分乳酸菌和致病菌的非特异性反应;采用斑点杂交方法从11株双歧杆菌中筛选到婴儿双歧杆菌WBAN07具有类Serpin蛋白。
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- 关键词:SERPIN纯化抗血清斑点杂交