四川省教育厅自然科学科研项目(2002A068)
- 作品数：6 被引量：13H指数：2
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- 相关机构：泸州医学院无锡市妇幼保健院焦作市人民医院更多>>
- 发文基金：四川省教育厅自然科学科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 反义c-myc对MCF-7细胞端粒酶活性的影响
- 2007年
- 目的研究脂质体LipfectAMINE^TM（LR）介导的c-myc反义寡核苷酸（ASODN）对MCF-7细胞端粒酶活性的影响及其机制。方法端粒重复序列扩增聚丙烯酰胺凝胶电泳（TRAP-PAGE）及端粒重复序列扩增酶联免疫吸附测定（TRAP-ELISA）定量检测不同时间段MCF-7细胞的端粒酶活性，流式细胞仪检测c-myc蛋白表达。结果TRAP-PAGE结果显示，c-myc ASODN对MCF-7细胞的作用，随时间的递增（24h、48h、72h），端粒酶梯度条带明显地减少，端粒酶活性明显降低。TRAP-ELISA显示，2．5μmol／L的c-myc ASODN作用MCF-7细胞48h吸光度A值降为0．486±0．041，作用72hA值降为0．263±0．034，与未经任何处理的MCF-7细胞A值0．684±0．031相比，端粒酶活性明显受到抑制，分别与正义寡核苷酸组、空白对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。未经任何处理的MCF-7细胞c-myc蛋白阳性率为（99．684±2．937）％，经c-myc ASODN作用48h c-myc蛋白阳性率低至（61．295±2．825）％，c-myc ASODN作用72h c-myc蛋白阳性率低至（29．482±2．726）％。而c-mye正义寡核苷酸（SODN）无上述作用。结论c-myc ASODN能有效降低MCF-7细胞端粒酶活性和c-myc蛋白表达。
- 周进税青林庞振英张志宏
- 关键词：端粒末端转移酶寡核苷酸类反义
- 反义c-myc寡核苷酸对hTERT蛋白表达抑制作用的研究被引量：1
- 2008年
- 目的探讨脂质体LipfectAMINETM(LR)介导的反义c-myc寡核苷酸(ASODN)对乳腺癌MCF-7细胞hTERT蛋白表达的抑制作用。方法应用免疫细胞化学ABC法检测转染反义、正义及未转染细胞中hTERT蛋白的表达情况。结果免疫细胞化学显示转染反义、正义与未转染细胞的hTERT蛋白表达分别为23%、96%、99%(P<0.01),表明转染反义c-myc的MCF-7细胞hTERT蛋白表达明显降低。结论反义c-myc寡核苷酸可以抑制hTERT蛋白的表达。
- 彭春税青林赵小平张莉娟马莉
- 关键词：MCF-7细胞HTERT基因免疫细胞化学
- 脂质体介导c-myc反义寡核苷酸对乳腺癌MCF-7细胞生物学行为的影响被引量：4
- 2006年
- 目的研究c-myc反义寡核苷酸(ASODN)经脂质体LipfectAMINETM(LR)介导转染对MCF-7细胞中c-myc蛋白表达及细胞增殖、凋亡的影响。方法用四甲基偶氮唑盐法(MTT法)评价脂质体介导c-myc ASODN对细胞增殖的影响;免疫细胞化学ABC方法检测转染前后c-myc蛋白表达;流式细胞仪(FCM)定量分析细胞凋亡。结果ASODN/LR转染与正义、错义寡核苷酸相比,显著抑制MCF-7细胞增殖(P<0.01)。FCM分析结果显示,转染后可见明显细胞凋亡峰,72h相点细胞凋亡率达(28.76±2.09)%。免疫细胞化学显示c-myc蛋白水平明显降低,阳性表达率为(21.40±1.16)%。结论LR介导c-myc ASODN能明显抑制MCF-7细胞增殖、诱导细胞凋亡和下调c-myc蛋白水平。
- 张莉娟税青林彭春何国平赵小平马莉
- 关键词：脂质体
- 反义c-myc诱导MCF-7细胞凋亡作用的研究被引量：1
- 2008年
- 目的探讨脂质体LipfectAM INETM(LR)介导的c-myc反义寡核苷酸(ASODN)对MCF-7细胞凋亡作用的影响。方法MCF-7细胞经脂质体包裹c-myc反义寡核苷酸作用24、48、72、96小时后,应用Gimsa染色法及流式细胞仪检测MCF-7细胞凋亡情况;DNA琼脂糖凝胶电泳检测MCF-7细胞经反义核酸作用72小时时,MCF-7细胞DNA变化情况。结果经LR介导的ASODN可以诱导MCF-7细胞凋亡,且随着时间的延长,凋亡细胞逐渐增加,24、48、72、96小时及正义组72小时各时间点的凋亡率分别为4.3%、4.6%、13.5%、28.8%、29.1%、4.4%(P<0.01);DNA凝胶电泳显示脂质体反义核酸72小时组有凋亡特征的DNA改变,呈现典型的DNA降解"梯状"条带片断。结论c-myc反义寡核苷酸(ASODN)可以诱导MCF-7细胞凋亡。
- 彭春税青林赵小平张莉娟马莉
- 关键词：细胞凋亡
- c-myc反义核酸对乳腺癌MCF-7细胞生长及hTERT基因表达的影响被引量：5
- 2007年
- 目的探讨脂质体介导c-myc基因反义寡核苷酸(Antisense phosphorothioate oligodeoxynucle-otide,ASODN)对MCF-7细胞生长及其人体端粒酶逆转录酶(humantelomerasereversetranscriptase,hTERT)基因表达的影响。方法将c-myc正、反义寡核苷酸(ODN)分别导入各组MCF-7细胞中,MTT法、逆转录-聚合酶链法及流式细胞术分别检测各组细胞生长情况、hTERTmRNA的表达水平以及细胞凋亡率。结果c-mycASODN转染MCF-7细胞24h后,细胞生长受到抑制(P<0.05),并且hTERTmRNA表达明显降低;随着反义核酸作用时间的延长,凋亡细胞数目逐渐增多,细胞生长及hTERT表达的下降随时间延长逐渐明显。对照组、LR-SODN组、LR-ASODN24h组与LR-ASODN48h、72h组相比有明显统计学差异(P<0.05)。结论c-myc反义寡核苷酸能显著下调细胞中hTERT基因的表达活性,诱导MCF-7细胞凋亡,并抑制MCF-7细胞生长;在一定程度上,其效果与时间呈正相关。
- 马莉税青林张莉娟彭春赵小平
- 关键词：人端粒酶逆转录酶反义核酸MCF-7细胞
- 脂质体介导反义核酸对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响
- 目的:探讨脂质体LipfectAMINETM介导c-myc反义寡核苷酸（ASODN）对MCF-7细胞增殖的影响。方法:MCF-7细胞分五组处理:c-mycSODNs组、LR/c-mycSODNs组、c-mycASODNs...
- 张莉娟税青林何国平赵小平马莉彭春
- 关键词：脂质体C-MYC原癌基因反义寡核苷酸MCF-7细胞
- 文献传递
- 脂质体介导反义核酸对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响被引量：2
- 2005年
- 目的:探讨脂质体LipfectAMINETM介导c-myc反义寡核苷酸(ASODN)对MCF-7细胞增殖的影响。方法:MCF-7细胞分五组处理:c-mycSODNs组、LR/c-mycSODNs组、c-mycASODNs组、LR/c-mycASODNs组、LR组和空白对照组。以MTT法检测72h各处理组细胞增殖的情况;以免疫细胞化学ABC法检测LR/c-mycASODNs组转染前后细胞中c-myc蛋白的表达。结果:c-mycASODNs组(0.383±0.015)和LR/c-mycASODNs组(0.178±0.015)均能明显抑制细胞生长,差异具有显著性(P<0.01),且后者对细胞的生长抑制率(73.13%)明显高于前者(17.47%):LR/c-mycASODNs组免疫细胞化学显示c-myc蛋白表达明显降低。结论:LR介导的c-mycASODN能明显抑制MCF-7细胞生长和c-myc蛋白表达。
- 张莉娟税青林何国平赵小平马莉彭春
- 关键词：脂质体C-MYC原癌基因反义寡核苷酸MCF-7细胞
