国家高技术研究发展计划(2002AA624010)
- 作品数：10 被引量：95H指数：5
- 相关作者：吕军仪吴金英林强高永利陈清香更多>>
- 相关机构：中山大学中国科学院广东中大亿达洲生物科技股份有限公司更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划广东省科技计划工业攻关项目广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程更多>>
- 大海马转化生长因子β1(TGF-β1)基因的克隆鉴定及功能研究被引量：4
- 2011年
- 转化生长因子β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)是一种多效应细胞因子,在免疫系统中,成熟的TGF-β1多肽是一种强有力的细胞分化调节剂和免疫调节剂。本研究通过基因克隆得到了大海马(Hippocampus kuda)TGF-β1 cDNA全长序列(GenBank登录号为HM564035),全长为1 941 bp,开放阅读框为1 161 bp,编码1种含386个氨基酸的多肽。同源性分析表明,大海马TGF-β1与斜带石斑鱼TGF-β1的亲缘关系最近。Real-time PCR结果显示,TGF-β1基因在健康大海马肾中表达量最高,其次是肝、大脑、小脑、皮肤、中脑、卵巢,在鳃和肠道中表达很少,在心脏和肌肉中检测不到表达。大海马TGF-β1重组蛋白在TNT快速偶联的转录/翻译系统中高效表达,用BS3交联后形成了大量的可溶性二聚体蛋白,Western blot检测结果显示该重组蛋白具有良好的免疫学活性。利用得到的大海马rTGF-β1刺激HeLa细胞,结果显示刺激细胞中TGF-β1下游Smad信号通路中的Smad3、Smad4基因表达量上升,Smad7基因表达量下降,表明所得到的大海马TGF-β1重组蛋白具有特定的生物活性,能够诱导人细胞中Smad信号通路的活化,延续了TGF-β1蛋白功能的保守性。
- 平海林吴金英徐胜威胡开顺段志刚
- 关键词：TGF-Β1克隆重组蛋白信号通路
- 大海马垂体糖蛋白激素α亚基的cDNA克隆和序列分析被引量：1
- 2007年
- 大海马(Hippocampus kudaBleeker)隶属鱼纲海龙目,是一种名贵的海产中药材,也是重要的海洋保护鱼类。我们通过快速扩增cDNA末端(rapid amplification of cDNA ends,RACE)的方法,首次从大海马的垂体总RNA中扩增出其垂体糖蛋白激素α亚基(pituitary glycoprotein hormoneαsubunit,PGHα)全长cDNA,其cDNA全长741bp(不包括polyA尾),5′和3′非编码区分别含有76和314bp,开放读码框为351bp,编码117aa的PGHα亚基前体(包括23aa的信号肽和94aa的成熟肽)。和其他脊椎动物一样,大海马PGHα亚基含有10个半胱氨酸残基,2个脯氨酸残基和2个N-糖基化位点。序列分析发现,大海马PGHα亚基的成熟肽与其他物种的同源性为50%—61.7%,其中与鲈形目和合鳃目的同源性最高(61.7%),而其信号肽与其他物种的同源性仅为8.7%—39.1%左右。这些结果表明大海马与已知的脊椎动物PGHα亚基同源性都比较低,是一种比较独特的鱼类。大海马PGHα亚基的全长cDNA克隆对海马垂体糖蛋白激素的结构和功能研究以及海马的养殖和保护有着重要的意义。
- 张利红张为民成佳张扬吴金英
- 关键词：CDNA克隆
- 大海马消化系统胚后发育的形态学及组织学研究被引量：17
- 2007年
- 大海马Hippocampus kuda为卵胎生海洋硬骨鱼类。利用解剖和连续组织切片技术,对孵化后2、5、9日龄、1月龄和3月龄几个特殊时期大海马消化系统的形态和组织学特征进行了报道。结果表明,大海马仔鱼孵化后1日,其消化系统已经明显分化为口咽腔、食道、小肠、直肠以及肝胰脏、胆囊等器官,但是仔鱼仍然以内源与外源混合性营养为主,至5日龄仔鱼变为完全的外源性营养;仔鱼孵化后9日左右是大海马的死亡"临界点",其消化系统的组织结构更趋于复杂;1月龄大海马的消化系统在结构和功能上进一步完善,小肠前端呈"z"型结构,管壁变厚,纵、环肌发达,肝脏组织充满大部分体腔,但在小肠周围仍然不能辨认独立的胰脏实体结构;3月龄成海马已经有了成熟的消化系统组织结构,保证了最大限度地消化和吸收动物性饵料。整个胚后发育阶段大海马没有形成胃,鱼体的形态和组织结构的变化与食性的变化紧密适应。
- 林强吕军仪张彬储霞玲高永利
- 关键词：HIPPOCAMPUS组织学胚后发育
- 有益微生物在大海马健康养殖中的应用研究被引量：28
- 2003年
- 实验用复合微生物由芽孢杆菌(Bacillusspp.)、红螺菌(Rhodospirillumspp.)、硝化细菌(Nitrobacterspp.)和硫化细菌(Thiobacillusspp.)组成,菌量比例分别为61.5%、27.3%、5.8%和5.4%。向大海马养殖池每10d使用1次,用量5mL/m3,菌液密度(2.0～2.5)×109/mL。结果表明,应用复合微生物的试验组溶解氧比对照组(不加菌)提高了32.7%,氨氮、亚硝酸盐和硫化物含量则分别降低了76.9%、97.1%和93.3%。对照池的浮游藻类优势种为蓝藻、甲藻和隐藻,分别占浮游植物总量的35.3%、22.3%和19.6%;试验池的浮游藻类优势种为绿藻和硅藻,分别占69.0%和26.8%,其藻类多样性指数比对照组增大了1.2倍。试验池的异养菌增长率为55.3%,而对照池的异养菌增长率达274.6%。试验期间,水温23～26℃,试验组的芽孢杆菌的数量从0.15×103CFU/mL急剧增至55.63×103CFU/mL,但对照组的仍保持在(0.13～0.38)×103CFU/mL的水平。而试验组弧菌数量比对照池的降低了2个数量级。
- 吕军仪孙燕燕李秉记吴金英黄克陈琳
- 关键词：有益微生物健康养殖养殖水体生物因子
- 动物性饵料对养殖水体中菌数和理化因子的影响被引量：4
- 2007年
- 向大海马（Hippocampus kuda Bleeker）养殖池中投喂动物性饵料桡足类、杂碎鱼虾等饵料后，亲海马实验组、幼海马实验组以及空白对照组水体环境因子参数差异明显，投喂杂碎鱼虾的亲海马组与投喂桡足类的幼海马组的细菌数量均高于空白对照组。3组处理后表层异养菌平均数量变动范围分别为4×10^3-1．78×10^5 CFU／mL，2．5×10^3-7．2×10^4 CFU／mL，2×10^2-5．5×10^3 CFU／mL，而底层异养菌则分别为6．53×10^3-1．59×10^5 CFU／mL，1．5×10’-7．5×10^4CFU／mL，5×10^2-1．0×10^4 CFU／mL。表层弧菌平均数量变动范围分别为55—4．08×10^3 CFU／mL，85—7．19×10^3CFU／mL，10～123 CFU／mL，而底层弧菌则分别为1．13×10^2-7．48×10^3CFU／mL，2．66×10^2-1．16×10^4CFU／mL，10—175CFU／mL。差异显著性分析结果表明，亲海马组与幼海马组细菌数量差异均不显著（P〉0．05）。而亲海马组与空白组除表层弧菌数量差异不显著外，其余，底层弧菌、表底层异养细菌数量呈显著性差异（P〈0．05）。空白组与幼海马组细菌数量均呈显著性差异（P〈0．05）。3组池水温变化相差不大，亲海马组、幼海马组中NHf—N含量呈升高之势，DO极不稳定，有机残留物含量、细菌数量增加趋势，导致水质恶化。
- 吕军仪林强邓钢高永利
- 关键词：动物性饵料环境因子弧菌异养菌
- 表面活性剂十二烷基苯磺酸钠(SDBS)和十二烷基磺酸钠(SDS)对安氏伪镖水蚤的急性毒性研究被引量：23
- 2010年
- 为探讨表面活性剂成分对海洋桡足类生物的影响,测定了十二烷基苯磺酸钠(SDBS)和十二烷基磺酸钠(SDS)对安氏伪镖水蚤(Pseudo-diaptomus annandalei Sewell)的急性毒性作用.结果表明,SDBS对安氏伪镖水蚤雌体24h、48h、72h和96h的半致死浓度LC50分别为2.40、1.67、1.59和1.58mg·L-1,而对雄体分别为1.84、1.54、1.41和1.40mg·L-1;SDS对雌体24h、48h、72h和96h的LC50分别为54.33、30.85、25.21和15.85mg·L-1,对雄体分别为18.48、13.55、10.51和8.50mg·L-1;SDBS对雌体和雄体的安全浓度分别为0.24mg·L-1和0.32mg·L-1,而SDS对雌体和雄体的分别为2.98mg·L-1和2.19mg·L-1.结果显示,对安氏伪镖水蚤而言,SDBS比SDS的毒性更强;以半致死浓度LC50为参考依据,安氏伪镖水蚤雄体均比雌体对这两种表面活性剂敏感.
- 陈清香吕军仪
- 关键词：急性毒性
- 斜带石斑鱼转化生长因子β1(TGF-β1)基因的克隆及表达分析被引量：2
- 2011年
- 转化生长因子β1(TGF-β1)是一种高度保守的多效细胞因子。通过分子克隆得到了斜带石斑鱼Epi-nephelus coioidesTGF-β1 cDNA全长序列,全长为2 477 bp,开放阅读框为1 161 bp,编码一种含386个氨基酸的多肽。Realtim e PCR分析表明,TGF-β1基因在健康斜带石斑鱼所取组织中均有表达,肾脏中表达最高,其次是头肾和脾脏。用PolyI:C或ConA刺激斜带石斑鱼头肾淋巴细胞,TGF-β1表达量明显上升,且在刺激4 h后达到最高值。用PolyI:C刺激16、24 h后,TGF-β1几乎不表达,而用ConA刺激实验组,TGF-β1表达量一直高于对照组。结果说明,斜带石斑鱼TGF-β1基因结构和表达特征与其他硬骨鱼类具有高度相似性。
- 平海林吴金英徐胜威胡开顺段志刚
- 关键词：TGF-Β1克隆
- 大海马育苗池水华发生期间细菌动态及相关理化参数被引量：7
- 2005年
- 大海马(HippocampuskudaBleeker)育苗池为水泥池,规格为4.0m×6.0m×1.6m,分设正常池与水华发生池,各设3个平行池,每池养殖幼海马约1000尾,测定水体水华发生时水体细菌数量和理化因子变化的规律。结果显示,当水温高于24℃时,育苗池易发生水华,形成水华的优势藻为铜绿微囊藻(Microcysticaeruginosa)。正常育苗池水体中异养细菌总量平均比水华池的高出近1个数量级。正常池和水华池表层异养细菌变动范围分别为2.50×103～7.23×104CFU/mL和4.75×102～6.90×103CFU/mL,水华池比正常池减少了60%～99%;底层异养细菌变动范围则分别为4.75×103～7.53×104CFU/mL和6.25×102～1.50×104CFU/mL,水华池比正常池降低了73%～97%。水华池与正常池底层异养细菌数量的差异极显著(P<0.01)。两组池表层弧菌数量变动范围分别为0.85×102～7.19×103CFU/mL和0.33×102～8.92×102CFU/mL,水华池比正常池减少5%～93%;底层弧菌数量变动范围则分别为8.30×102～1.16×104CFU/mL和0.53×102～2.04×103CFU/mL,水华池比正常池降低2%～97%。水华发生池的底层和表层的细菌数量与正常池的差异均显著(P<0.05)。同时,水华池平均水温比正常池约低1℃,溶解氧(DO)比正常池的降低了22%～33%;而水华池中的氨氮含量则为正常育苗池的1.41～2.34倍。水华发生时,育苗池表层和底层水体中弧菌数量比正常池的分别减少了61%～87%和82%～93%。
- 邓钢吕军仪林强
- 关键词：水华育苗池环境因子
- 饵料对安氏伪镖水蚤生殖力的影响被引量：2
- 2006年
- 分别用亚心形扁藻Platymonas subcordiformis、球等鞭金藻Isochrysisgalbans、亚历山大藻Alexandriumspp.、新月菱形藻Nitzschiaclosterium、赤潮异弯藻Heterosigmaakashiwo为饵料,研究安氏伪镖水蚤Pseudodiaptomusannandalei(Sewell,1919)的产幼量,在产幼期间,日平均产幼量分别为14.5、15.0、10.1、9.2和9.9个·d-1,平均持续产幼天数分别为12.0、9.0、12.6、7.7和3.1d。以日平均产幼数和持续产幼天数的乘积作为综合指标进行分析,结果表明亚心形扁藻综合指标值最大,但与亚历山大藻和球等鞭金藻之间无显著差异,亚心形扁藻和球等鞭金藻的差异显著高于赤潮异弯藻和新月菱形藻。赤潮异弯藻和新月菱形藻之间无显著差异。对安氏伪镖水蚤的日平均产幼量和平均持续产幼天数进行回归分析,得出一直线回归方程y=8.357+0.385x(p<0.0030),日平均产幼量和平均持续产幼天数有显著的正相关,表明优良的饵料不仅能提高安氏伪镖水蚤的日平均产幼量,而且能延长产幼期,说明饵料质量可显著地影响安氏伪镖水蚤的生殖力。
- 陈清香吕军仪盛军庆高永利陈清潮
- 关键词：饵料生殖力
- 枯草芽孢杆菌Bs-1拮抗溶藻弧菌的特性被引量：10
- 2006年
- 研究了枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis(Bs-1)抗菌物质产生的特点及培养液的无菌滤液的抗菌谱和理化性质,结果表明Bs-1生长快速,在5h内产生抗菌物质;该物质能抑制多种分离自养殖大海马Odobenus rosmarus肠道和海水的弧菌如溶藻弧菌Vibrio alginolyticus的生长;在一定范围内该物质对热、酸碱、变性剂和蛋白酶均有较好的稳定性。进一步尝试用Bs-1的含菌培养液来控制养殖海水中弧菌的数量,结果表明每升海水中加入4ml培养液(浓度为4×106CFU.ml?1)已能达到较好的抑菌效果;改变海水的pH和盐度,Bs-1培养液仍有较理想的抑菌作用。因此,Bs-1有望开发成良好的益生菌剂。
- 黄汝添谢海平陆勇军吕军仪吴金英
- 关键词：SUBTILISALGINOLYTICUS益生菌
