国家自然科学基金(39870870)
- 作品数：9 被引量：264H指数：6
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- 相关机构：第二军医大学复旦大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- 动脉粥样硬化大鼠实验模型的建立被引量：179
- 2003年
- 目的 :建立动脉粥样硬化大鼠模型。方法 :4 0只雄性 Wistar大鼠随机分成对照组 (10只 )和实验组 (30只 )。实验组在喂食开始时一次性腹腔注射维生素 D 6 0万 IU / kg,喂食高脂饲料 ;对照组给予同等体积的生理盐水 ,喂食基础饲料。观察主动脉、心脏、肝脏的病理变化 ,并根据病变程度评分。结果 :对照组大鼠未出现明显病变。实验组大鼠 2周后未出现明显病变。4周后大鼠主动脉出现动脉粥样硬化斑块 ,病变评分为 0 .5 0± 0 .39;冠状血管仅出现少量脂质浸润 ;心肌组织有少量脂质沉积 ;肝脏切片油红 O染色呈强阳性。 6周后主动脉斑块增多 ,病变评分为 0 .75± 0 .34;冠状动脉形成典型动脉粥样硬化病变 ,病变评分为 1.12± 0 .4 8;心肌组织脂质沉积严重 ,病变区心肌细胞胞质内出现大量红染颗粒。其发病病理过程与人类相似。结论 :成功建立了快速简便的大鼠动脉粥样硬化模型 。
- 杨鹏远芮耀诚焦亚斌
- 关键词：动脉粥样硬化维生素D膳食脂肪类疾病模型
- 辛伐他汀对家兔动脉粥样硬化血管组织作用的蛋白质组研究被引量：16
- 2003年
- 目的 通过研究辛伐他汀对高血脂致动脉粥样硬化家兔血管组织蛋白质组的变化 ,评价其药效影响。方法 建立新西兰家兔高脂致动脉粥样硬化模型 ,用双相凝胶电泳技术检测其蛋白质组的变化。结果 服用辛伐他汀后 ,脂肪肝病变基本消失 ;通过分析比较得到的 2DE图像 ,17个点明显上调 (>3倍 ) ,12个点明显下调 (<3倍 ) ,辛伐他汀对其中少数蛋白点有回调作用 ,对多数点无回调作用。结论 辛伐他汀能明显改善肝脏对脂肪的代谢功能 ,但未能有效修复高血脂引起的动脉血管壁的损伤。
- 于雁灵芮耀诚杨鹏远樊惠芝黄珍玉杨原
- 关键词：蛋白质组动脉粥样硬化血管辛伐他汀
- 一种改进的凝胶分离后蛋白质溶液酶解方法
- 2005年
- 报道了改进的凝胶电泳分离后蛋白质溶液酶解方法。将凝胶分离后的蛋白转移到PVDF膜上,直接用碳酸氢铵中和从膜上的蛋白洗脱溶液至弱碱性,并在此溶液中直接进行蛋白酶解。方法避免了胶内杂质对质谱鉴定蛋白质的干扰。用标准蛋白进行了验证,并在此基础上鉴定了中国仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞系中的16个蛋白点。与已报道的方法比较,本方法蛋白回收率提高到90%左右;与传统的胶内酶解方法比较,本方法具操作简单,实验流程较短;涉及的试剂较胶内酶解少,因此带来的杂质影响小;在蛋白转印以后还可与许多其它实验方法相结合,比如免疫印迹等优点。
- 黄珍玉杨芃原
- 关键词：蛋白质组学蛋白质溶液蛋白酶解电泳分离中国仓鼠卵巢细胞PVDF膜
- 缺氧对血管内皮生长因子诱导主动脉内皮细胞通透性增加的调控研究被引量：2
- 2004年
- 目的 :为了解缺氧对血管内皮生长因子 (VEGF)增强血管内皮细胞通透性作用的影响 ,考察正常和缺氧状态下VEGF对体外培养牛主动脉内皮细胞 (BAEC)脂蛋白通透性的影响及银杏叶提取物 (Egb76 1)的抑制作用。方法 :将VEGF及Egb76 1加入BAEC共孵育 ,用SN 6 95型液闪计数器测 [12 5I]氧化低密度脂蛋白( [12 5I]OxLDL)通过BAEC的百分率。结果 :VEGF可显著增强BAEC对 [12 5I]OxLDL的通透性 (P <0 .0 1) ,这种增加具有浓度依赖性。缺氧 3h可促进VEGF所致的的通透性增加。Egb76 1能显著抑制VEGF诱导的通透性升高 (P <0 .0 1)。结论 :VEGF在动脉粥样硬化的形成和发展过程中起一定作用。Egb76 1对VEGF诱导血管内皮通透性升高有显著的抑制作用。
- 张黎邱彦芮耀诚李铁军刘厚佳
- 关键词：缺氧血管内皮生长因子通透性银杏叶提取物
- 何首乌水溶性成分2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡糖苷(STI)对内皮细胞表达VEGF的影响被引量：22
- 2004年
- 目的 研究何首乌水溶性成分 2 ,3,5 ,4′ 四羟基二苯乙烯 2 O β D葡糖苷 (STI)对溶血磷脂酰胆碱 (LPC)诱导人脐静脉内皮细胞株ECV30 4细胞中血管内皮生长因子 (VEGF)表达的影响。方法 在ECV30 4细胞培养基中加入LPC(2 5mg·L- 1 )或LPC与STI共孵 2 4h ,收集各组条件培养基 ,用基础酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测各组条件培养基中VEGF蛋白含量 ;用原位杂交法、RT PCR及RealtimeRT PCR法检测LPC对内皮细胞VEGFmRNA的表达及STI的影响。结果 ECV30 4细胞暴露于LPC后 ,VEGF蛋白分泌明显增加 ;加入STI后VEGF蛋白含量明显降低 ;LPC可以使ECV30 4中VEGFmRNA的表达明显升高 ,并使VEGF1 6 5mRNA的表达升高 ;STI可剂量依赖性地抑制VEGF1 6 5mRNA的高表达。结论 LPC能诱导ECV30 4细胞表达高水平的VEGF蛋白及VEGFmRNA ,1× 1 0 - 5mol·L- 1STI可抑制LPC的作用 ,降低VEGF的高表达。
- 张黎芮耀诚邱彦李铁军刘厚佳陈万生
- 关键词：水溶性成分VEGF溶血磷脂酰胆碱
- 血管内皮生长因子对内皮细胞产生基质金属蛋白酶2的影响被引量：9
- 2003年
- 研究血管内皮生长因子对人脐静脉内皮细胞产生基质金属蛋白酶2的影响。用免疫组织化学染色方法和酶联免疫吸附测定法测定基质金属蛋白酶2的蛋白含量,明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶2的活性。在基础条件下,内皮细胞自发产生基质金属蛋白酶2,在50μg/L血管内皮生长因子刺激下,基质金属蛋白酶2的产生显著增加(P<0.05),血管内皮生长因子浓度达到100μg/L时,基质金属蛋白酶2的产生进一步增加。与蛋白产生相一致,基质金属蛋白酶2分解明胶的活性也显著升高。血管内皮生长因子促进ECV304细胞产生基质金属蛋白酶2的作用可能与其促血管生成和增加血管通透性有关。
- 王杰松芮耀诚李铁军张黎邱彦杨鹏远
- 关键词：酶联免疫吸附测定血管内皮生长因子基质金属蛋白酶2内皮细胞细胞培养
- 银杏叶提取物对牛主动脉内皮细胞通透性的影响
- 2004年
- 目的:考察正常和缺氧状态下银杏叶提取物(Egb761)对VEGF引起体外培养牛主动脉内皮细胞(BAEC)脂蛋白通透性改变的影响。方法:将VEGF及Egb761加入BAEC共孵育,用SN-695型液闪计数器测[125I]氧化低密度脂蛋白([125I]OxLDL)通过BAEC的百分率。结果:VEGF可剂量依赖性地增强BAEC对[125I]OxLDL的通透性(P<0.01),缺氧3h可促进VEGF所致的的通透性增加。Egb761能显著抑制VEGF诱导的通透性升高(P<0.01)。结论:Egb761对缺氧状态下VEGF诱导血管内皮通透性升高有显著的抑制作用。
- 张黎邱彦芮耀诚李铁军刘厚佳
- 关键词：缺氧血管内皮生长因子通透性银杏叶提取物EGB761
- 缺氧对血管内皮生长因子诱导牛冠状动脉内皮细胞脂蛋白通透性升高的调控及丹酚酸B的抑制作用被引量：12
- 2003年
- 目的 为了了解缺氧对血管内皮生长因子(VEGF)增强血管内皮细胞通透性作用的影响及其与动脉粥样硬化的关系 ,考察了正常和缺氧状态下VEGF对体外培养牛冠状动脉内皮细胞 (BCEC)脂蛋白通透性的影响及丹酚酸B的抑制作用。方法 正常及缺氧条件下 ,将VEGF及丹酚酸B加入BCEC共孵育 ,用SN 695型液闪计数器测 [12 5I]低密度脂蛋白([12 5I]LDL)通过BCEC的百分率。结果 VEGF可显著增强BCEC对 [12 5I]LDL的通透性 ,这种增加具有浓度依赖性。缺氧 3h可促进VEGF所致的的通透性增加。丹酚酸B在正常和缺氧条件下均显著抑制VEGF诱导的BCEC通透性升高。结论 VEGF可增强血管内皮细胞的通透性 ,可能在动脉粥样硬化的形成和发展过程中起一定作用。
- 邱彦芮耀诚李铁军张黎张卫东
- 关键词：细胞低氧内皮内皮生长因子丹酚酸B
- U937泡沫细胞中血管内皮生长因子的表达及药物的抑制作用被引量：27
- 2002年
- 目的 研究U937泡沫细胞中血管内皮生长因子 (VEGF)表达以及丹酚酸B和银杏叶提取物对其的抑制作用。方法 U937细胞与 80mg·L- 1 氧化型低密度脂蛋白 (OX LDL)孵育 4 8h ,建立U937泡沫细胞模型。用基础酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测各组培养基中VEGF蛋白分泌含量 ,用免疫组织化学法检测VEGF蛋白表达 ,用原位杂交法检测VEGFmRNA水平。给予不同浓度丹酚酸B和银杏叶提取物 ,观察VEGF表达的变化。结果 培养的U937泡沫细胞培养液中VEGF含量和细胞中VEGF表达均明显高于U937正常细胞。丹酚酸B和银杏叶提取物加入后阳性反应明显减弱。结论 泡沫细胞中VEGF呈高表达、含量明显增加 。
- 杨鹏远芮耀诚张黎李铁军邱彦王杰松张卫东
- 关键词：泡沫细胞血管内皮生长因子酶联免疫吸附试验药物丹酚酸B银杏叶提取物
