国家质检总局科技计划项目(2005ZK179)
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 相关作者：李树清杜凯周艳琴姚宝安王贵强更多>>
- 相关机构：华中农业大学上海出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 边缘无浆体MSP5基因片段的克隆与原核表达被引量：2
- 2007年
- 目的克隆边缘无浆体MSP5基因,构建重组质粒,并进行表达与鉴定。方法根据GenBank公布的边缘无浆体MSP 5基因序列(AY714547)设计一对引物,无菌颈静脉采集边缘无浆体阳性的牛血,用PCR方法从4血的DNA模板中扩增MSP 5基因582bp的片断。将该片段克隆到原核表达载体pGEX-KG中,构建原核表达载体KG-MSP5,转化BL21,经IPTG的诱导表达蛋白。利用BugBuster GST Bind Purification Kit将其纯化,经Western blotting进行分析。结果重组质粒KG-MSP5,转化BL21,在IPTG的诱导下表达大小约46 kPa蛋白。western blotting分析表明其具有很好的免疫原性。结论本研究为边缘无浆体的血清学诊断试剂盒的研制奠定了基础。
- 杜凯李树清陈志飞周艳琴王贵强王巧全姚宝安赵俊龙
- 关键词：边缘无浆体原核表达纯化
