黑龙江省农垦总局科技攻关项目(HNK10A-08-03-03)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 相关作者：刘彩霞余丽芸曹宁谭君武龙宇更多>>
- 相关机构：黑龙江八一农垦大学更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 重组干酪乳杆菌贮存期内质粒稳定性及活菌数的检测被引量：1
- 2013年
- 目的检测产肠毒素性大肠杆菌(Enterotoxigenic E.coli,ETEC)基因重组干酪乳杆菌(Lactobacillus casei,L.casei)贮存过程中质粒的稳定性及活菌数的变化。方法将ETEC K88重组干酪乳杆菌(pLA-K88/L.casei)接种于MRS培养基,转种WPC培养基,收集菌液,置4、15、37℃贮存。通过抗生素MRS(+)和MRS(-)平板计数菌落数的方法及PCR法检测重组质粒在4℃贮存1、15、30、60、90和120 d的稳定性;Dot ELISA法检测菌液外源蛋白免疫学活性的变化;平板计数法检测4、15、37℃贮存1、2、3、7、15、30、60、90、120、210和240 d的活菌数。结果在4℃贮存120 d内,重组质粒稳定性良好,目的基因片段无缺失,外源蛋白活性稳定,乳清蛋白对工程菌的稳定性及外源蛋白的免疫原性均无影响;工程菌在4℃贮存效果最好,存活时间最长,第240 d活菌数仍保持在9×106cfu/ml以上,15和37℃贮存期仅为90和15 d。结论 ETEC基因重组干酪乳杆菌于4℃贮存条件下,质粒及外源基因表达稳定。
- 曹宁侯喜林谭君刘彩霞武龙宇余丽芸
- 关键词：干酪乳杆菌质粒稳定性活菌数
