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改造的人乳头瘤病毒16型E6/E7融合蛋白疫苗抗肺癌作用的实验研究: 2004年; 目的　研究经改造的HPV16E6/E7蛋白质疫苗 (HPV 16mE6Δ/mE7)对表达HPV16E6和E7的小鼠肺癌细胞的体内生长抑制作用 ,为肺癌免疫治疗提供新线索。方法　预防性实验 :对C5 7BL/6小鼠先进行免疫 ,然后接种表达HPV 16E6和E7癌蛋白的TC 1肿瘤细胞 ;第 3 3天 ,对未出瘤小鼠进行第二次大剂量肿瘤细胞攻击。治疗性实验 :C5 7BL/6小鼠先接种TC 1细胞 ,然后进行两次免疫治疗 ,再对未出瘤小鼠进行第二次大剂量TC 1细胞攻击实验。计算各组肿瘤发生率、肿瘤体积。采用MTT方法检测淋巴细胞增殖反应。结果　预防性实验 :在 10 0天的观察时间内 ,免疫组小鼠可以有效抵抗第一、二次肿瘤细胞攻击 ,所有小鼠均未见肿瘤发生 ;而PBS组及单纯佐剂组小鼠在第一次肿瘤细胞接种后 6～ 12天内均有肿瘤形成 ,3 0天内因肿瘤负荷出现衰竭。在治疗性实验中 ,免疫组、PBS组、单纯佐剂组小鼠成瘤率分别为 2 0 %、90 %、60 % ;第二次攻击实验中 ,免疫组仍有 87.5 %的小鼠无肿瘤生长 ,而其他两组动物在 4～ 6天内均有肿瘤形成。MTT实验表明经mE6Δ/mE7免疫的小鼠脾淋巴细胞增殖反应明显强于对照组。结论　经改造的HPV16型mE6Δ/mE7蛋白质疫苗对于实验动物肺癌有较好的抑制作用。; 周小山赵清正千新来许春雷陆元志; 关键词：HPV16

表达HPV16 L1、L2和E7蛋白的非复制重组痘苗病毒的构建: 2008年; 目的构建防治宫颈癌的表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1,L2E7蛋白的非复制重组痘苗病毒疫苗株。方法以痘苗病毒为载体,利用同源重组技术筛选共表达HPV16L1,L2E7蛋白的重组痘苗病毒,用PCR和Western blot技术进行鉴定。结果该病毒在鸡胚成纤维细胞(CEF)中连续传代15代,经PCR检测证实病毒基因组中有HPV16L1,L2E7目的基因插入,Western blot检测证实病毒可以稳定表达L1和L2E7蛋白。结论构建的病毒NTVJL1L2E7可以在真核细胞中表达HPV16L1和L2E7蛋白,可以作为治疗和预防HPV16相关疾病的候选疫苗。; 范江涛陈心秋黄薇田厚文; 关键词：人乳头瘤病毒痘苗病毒

表达HPV16L1、L2和E7蛋白的非复制重组痘苗病毒的构建(英文): 2009年; Objective:To construct a non-replicating vaccinia virus expressing human papillomavirus 16(HPV16) L1, L2E7 proteins as a candidate vaccine for cervical cancer.Methods:Using vaccinia virus vector, we generated a strain of non-replicating recombinant vaccinia virus vaccine expressing HPV16 L1, L2E7 proteins by homologous recombination and identified by PCR and Western-bloting.Results:We demonstrated that the L1, L2E7 gene of HPV16 were integrated into vaccinia genosome and could express L1, L2E7 protein stably when infected the CEF using PCR and Western-blot assay.Conclusion:NTVJL1/L2E7 can express L1, L2E7 protein of HPV16 and can be taken as a candidate vaccine for HPV16-associated diseases.; Jiangtao FanXinqiu ChenWei HuangHouwen Tian; 关键词：人乳头瘤病毒16型痘苗病毒载体 E7蛋白病毒表达 HPV16型

共表达HPV16L1、L2、E6、E7蛋白的重组非复制型痘苗病毒构建及鉴定被引量：2: 2005年; 目的构建共表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1、L2、E6、E7蛋白的非复制型重组痘苗病毒人用疫苗株。方法以痘苗病毒为载体、利用同源重组技术筛选共表达HPV16L1、L2、E6、E7蛋白的重组痘苗病毒并对其进行鉴定。结果该病毒在CEF细胞上连续传至第15代,经斑点杂交结果表明重组病毒基因组中有L1、L2、E6、E7基因插入;经WesternBlot检测,重组病毒能稳定表达HPV16L1、L2、E6、E7蛋白。结论非复制型重组痘苗病毒NTVJE6E7CKL1L2可作为预防和治疗HPV16相关肿瘤及其癌前病变候选疫苗。; 黄薇田厚文任皎范江涛赵莉边涛陆振华阮力; 关键词：痘苗病毒非复制型重组痘苗病毒 HPV16L1 E7蛋白共表达 E6

HPV16型-E6、E7在食管鳞癌组织与非癌组织中的表达被引量：25: 2004年; 背景与目的:越来越多的证据表明高危型人乳头状瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV),特别是HPV16型与多种肿瘤发生、发展密切相关。本研究旨在分析人乳头状瘤病毒HPV16型E6、E7在食管正常组织、不典型增生组织和癌组织中的表达,以探讨HPV16型在食管鳞癌发生、发展中的生物学意义。方法:采用PicTureTM免疫组织化学方法对70例食管癌切除标本上、下切缘的正常粘膜上皮组织、43例不典型增生组织以及18例癌组织中的HPV16型E6、E7蛋白表达情况进行研究。结果:E6蛋白阳性率在正常食管粘膜上皮组织中为59.3%,在上皮不典型增生组织中为88.4%,在癌组织中为83.3%;E7蛋白在上述3种组织中的阳性率分别为62.1%、90.7%和88.9%。与正常食管粘膜上皮相比,上皮不典型增生组织和癌组织中E6、E7蛋白表达均有显著性差异(P<0.05)。HPV16型E6、E7蛋白在正常食管粘膜组织中同时表达即同步率为25.7%,而在上皮不典型增生组织和癌组织中二者同步率分别为88.3%和83.3%。结论:HPV16型E6、E7蛋白与食管鳞癌发生、发展密切相关,二者协同作用可能是食管鳞癌发生、发展的重要因素之一。; 许春雷千新来周小山赵清正李艳春; 关键词：食管鳞癌人乳头状瘤病毒16型 E6 E7

人乳头瘤病毒16型E6和E7癌蛋白在肺癌中的表达检测被引量：3: 2004年; 许春雷赵光明千新来陆元志赵清正; 关键词：人乳头瘤病毒 16型E6 16型E7 癌蛋白肺癌 HPV

表达HPV16 L1、L2E7蛋白的非复制重组痘苗病毒的构建和鉴定被引量：1: 2007年; 目的:构建防治宫颈癌的表达人乳头瘤病毒16型、HPV16)L1、L2E7蛋白的非复制重组痘苗病毒疫苗株。方法:以痘苗病毒为载体,利用同源重组技术筛选共表达HPV16L1、L2E7蛋白的重组痘苗病毒,用PCR和Western-blot技术进行鉴定。结果:该病毒在鸡胚成纤维细胞(CEF)中连续传代15代,经PCR检测证实病毒基因组中有HPV16L1、L2E7目的基因插入,Western-blot检测证实病毒可以稳定表达L1、L2E7蛋白。结论:构建的病毒NTVJL1L2E7可以在真核细胞中表达HPV16L1、L2E7蛋白,可以作为治疗和预防HPV16相关疾病的候选疫苗。; 范江涛陈心秋黄薇田厚文; 关键词：人乳头瘤病毒痘苗病毒

HPV16E6/E7融合蛋白疫苗与放疗联合应用治疗宫颈癌的实验研究被引量：3: 2005年; 目的:观察人乳头瘤病毒16型(HPV)E6/E7融合蛋白疫苗与放疗(12Gy)联合应用对宫颈癌的治疗效果。方法:24只雌性C57BL/6小鼠右侧后肢接种肿瘤细胞后7d,随机分为4组:对照组(C,n=6);免疫组(IM,n=6);放疗组(RA,n=6);联合治疗组(IM+RA,n=6)。比较各组小鼠的肿瘤生长速度及存活时间。采用TUNEL法对小鼠肿瘤组织中细胞的凋亡情况进行检测。结果:IM+RA组小鼠肿瘤生长速度较慢,平均存活时间明显长于RA、IM及C组,IM组与C组动物的平均存活时间没有差异。TUNEL实验结果表明,IM+RA组小鼠肿瘤组织中凋亡细胞明显高于其他各组。结论:HPV16E6/E7融合蛋白疫苗与放疗联合应用,具有协同抗肿瘤作用。; 周小山千新来陆元志刘巧赵清正; 关键词：人乳头瘤病毒16型免疫治疗放疗宫颈癌

共表达HPV16L1、L2、E67蛋白的重组非复制型痘苗病毒的构建: 2005年; 目的:构建共表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1、L2、E67蛋白的非复制型重组痘苗病毒人用疫苗株。方法:以痘苗病毒为载体、利用同源重组技术筛选共表达HPV16L1、L2、E67蛋白的重组痘苗病毒并对其进行鉴定。结果:该病毒在CEF细胞上连续传至第15代,经斑点杂交结果表明重组病毒基因组中有L1、L2、E6、E7基因插入;经Westernblot检测,重组病毒能稳定表达HPV16L1、L2、E67蛋白。结论:非复制型重组痘苗病毒NTVJE67CKL1L2可作为预防和治疗HPV16相关肿瘤及其癌前病变的候选疫苗。; 黄薇田厚文任皎范江涛赵莉边涛陆振华阮力; 关键词：人乳头瘤病毒宫颈肿瘤痘苗病毒载体

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国家高技术研究发展计划(2002AA216041)

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