国家自然科学基金(307660287)
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
- 相关作者:田长富胡振良任小丽田腊梅任晓丽更多>>
- 相关机构:昆明医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金云南省科技厅科研基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 2种重组真核蛋氨酸酶原核体系表达及活性比较被引量:1
- 2012年
- 目的构建2种真核L-蛋氨酸γ-裂解酶(MGL1 MGL2)的高效原核表达载体,诱导表达及纯化,比较活性差异.方法通过分子克隆技术构建2种重组表达质粒pGEX-4T-1-MGL1,pGEX-4T-1-MGL2;重组质粒转化感受态大肠杆菌Dh5α,诱导表达纯化蛋氨酸酶.结果构建了高效表达载体pGEX-4T-1-MGL1,pGEX-4T-1-MGL2;pGEX-4T-1-MGL1表达的酶纯度为82.5%,活性为0.505 2 IU/mg,pGEX-4T-1-MGL2表达的酶纯度为81.4%,活性为0.305 2 IU/mg.结论 pGEX-4T-1-MGL1,pGEX-4T-1-MGL2都能表达蛋氨酸酶;pGEX-4T-1-MGL1表达的蛋氨酸酶纯度比较高,酶活性比较高.
- 田腊梅任小丽胡振良曾红静田长富
- 关键词:肿瘤基因治疗
- 蛋氨酸酶基因重组腺病毒载体构建
- 2013年
- 目的构建蛋氨酸酶基因重组腺病毒载体.方法运用Cre-LoxP重组酶系统,通过DNA重组技术,将L-蛋氨酸-γ裂解酶基因(L-Methioneγ-Lyase Gene)与供体载体pDNR-CMV重组,获得含有Metase重组基因的供体载体pDNR-Metase-CMV.将pDNR-Metase-CMV片段与真核腺病毒载体PLP-Ade-X-CMV进行重组,获得pLP-Ade-Metase-CMV重组分子.结果获得了重组腺病毒载体pLP-Ade-Metase-CMV,并证实该重组腺病毒载体中有Metase Gene.结论采用LoxP/Cre体外重组法成功地构建了含蛋氨酸酶基因的真核表达重组腺病毒载体.
- 任晓丽赵瑜陈南芳田长富
- 关键词:肿瘤重组腺病毒