吉林省发展与改革委员会计划资助项目(2006-1550)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
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- 核心蛋白聚糖在HepG_2细胞中的表达及作用
- 2008年
- 目的构建分泌型核心蛋白聚糖(DCN)真核表达载体,并观察其在肝癌细胞HepG2中的表达和抗肿瘤作用。方法应用PCR技术扩增DCN全长基因cDNA片段,与pcDNA3.1载体连接,并转化到大肠杆菌中扩增获得重组载体,应用双酶切、PCR以及测序鉴定此重组载体,脂质体介导转染HepG2,经G418筛选建立稳定转染细胞株,采用RT-PCR、免疫组化检测其表达。MTT检测细胞增殖活力,流式细胞仪分析细胞周期。结果RT-PCR可见转染组细胞mRNA表达明显增多,免疫组化可见转染组细胞DCN蛋白表达明显增高。细胞生长曲线显示转染组细胞生长缓慢,G1期细胞显著增多。结论本方法可成功建立稳定转染DCN的HepG2细胞株,并证实DCN能够抑制HepG2细胞株的生长。
- 张玉成王雅丽杜珍武高申吕俊峰张桂珍
- 关键词：核心蛋白聚糖聚合酶链反应转染HEPG2
