国家自然科学基金(81273603)
- 作品数：7 被引量：18H指数：3
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- 血浆miR-122作为药源性肝损伤生物标志物的研究及应用
- 目的 本研究旨在建立标准化的血浆microRNAs实时定量PCR (RT-qPCR)技术平台,并采用对乙酰氨基酚(APAP)诱导的大鼠急性肝损伤模型评估血浆miR-122作为药源性肝损伤非侵袭生物标志物的可行性,同时将血...
- 汤纳平王雁马璟
- 关键词：生物标志物
- 氯胺酮对HepG2细胞线粒体功能的影响
- 2015年
- 目的评价氯胺酮的线粒体毒性,从而探讨氯胺酮可能的毒性机制。方法 Hep G2细胞培养基中分别加入齐多夫定10~2000μmol·L-1培养7 d,或加入氯胺酮50~3000μmol·L-1培养24 h,CCK8细胞计数法测定细胞存活率。Hep G2细胞培养基中分别加入齐多夫定100μmol·L-1培养7 d后,或加入氯胺酮100和1200μmol·L-1培养24 h,化学发光法检测胞内ATP合成水平,荧光探针法检测胞内钙离子浓度、活性氧及线粒体膜电位（ΔΨm）的变化,同时设齐多夫定1000μmol·L-1用于实时荧光定量PCR检测线粒体DNA（mt DNA）表达水平的变化。结果与正常对照组相比,齐多夫定10~2000μmol·L-1可以抑制细胞存活,IC50为100μmol·L-1;氯胺酮1000~3000μmol·L-1抑制细胞存活,IC50为1200μmol·L-1。与正常对照组相比,齐多夫定100μmol·L-1组线粒体ATP合成水平显著下降（P〈0.05）,胞内钙离子浓度明显升高（P〈0.05）,活性氧水平显著升高（P〈0.05）,ΔΨm显著下降（P〈0.05）,而1000μmol·L-1可以明显干扰mt DNA表达水平（P〈0.05）。氯胺酮100μmol·L-1组ATP合成水平明显下降（P〈0.05）,其他指标均无显著性差异;氯胺酮1200μmol·L-1组ATP合成水平显著下降（P〈0.01）,活性氧水平和胞内钙离子浓度显著升高（P〈0.01）,ΔΨm显著下降（P〈0.05）,mt DNA水平无明显改变。结论氯胺酮可以通过干扰线粒体代谢功能而诱导线粒体损伤。
- 王雁汤纳平惠涛涛富欣李华杨琛懋周国民马璟
- 关键词：氯胺酮HEP线粒体药物毒性
- 对乙酰氨基酚诱导的急性肝损伤大鼠血浆miR-122表达的变化被引量：9
- 2013年
- 目的探讨血浆微RNA(miR)-122在药物性肝损伤中的变化及其在肝毒理临床前评价中的作用。方法 SD雄性大鼠单次ig给予对乙酰氨基酚0,625和1250mg·kg-1,并于给药后1.5,3,6,12,24,36及96h采集血样。以乙酰氨基酚诱导急性肝损伤大鼠血浆中稳定表达的miR-103为校正基因,实时定量逆转录PCR(RT-qPCR)法检测不同时间点大鼠血浆miR-122的表达。测定血浆中不同时间点谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)和肝组织病理学检查。结果组织病理学观察结果显示,与正常对照组相比,大鼠分别ig给予对乙酰氨基酚625mg·kg-1 1.5和3h后,肝组织病理无明显变化,给药后6和12h,肝腺泡Ⅲ带出现明显的空泡样变性和肝窦充血,给药后24h肝腺泡Ⅲ带有明显的细胞坏死;而36h时基本恢复正常;而对乙酰氨基酚1250mg·kg-1组给药后24和36h时肝腺泡Ⅲ带有明显的细胞坏死。与正常对照组相比,大鼠分别ig给予对乙酰氨基酚625和1250mg·kg-1后12和24h,血清GPT和GOT均有显著性升高(P<0.05),且对乙酰氨基酚1250mg·kg-1组大鼠血清GPT活性均是对照组2倍以上。与正常对照组相比,血浆miR-122在大鼠给予对乙酰氨基酚1250mg·kg-1 1.5h即升高3.6倍(P<0.05),并且持续升高,12h达峰值后开始下降,96h恢复正常水平;大鼠给予625mg·kg-1对乙酰氨基酚给药后6h,血浆miR-122升高5.2倍,12h达峰值后开始下降,36h恢复正常水平。肝损伤大鼠血浆miR-122不同时间点的表达水平与肝损伤GPT和GOT变化相似。结论循环miR-122可能成为药物性肝损伤临床前和临床早期检测的理想的血液学分子标志物。
- 王雁汤纳平富欣殷承胜季龙凤杨琛懋黄欢夏马璟
- 关键词：对乙酰氨基酚肝损伤MIR-122动力学
- Access2免疫化学发光仪检测动物血清心肌钙蛋白I的分析性能确证被引量：2
- 2015年
- 目的对美国贝克曼库尔特有限公司Access2免疫化学发光仪的主要分析性能进行验证。方法对该仪器检测项目血清心肌钙蛋白I（Cardiac Troponin I,c Tn I）进行性能验证。利用变异系数分别对质控及大鼠、犬和食蟹猴血清心肌钙蛋白I的精密度进行评估,并根据质控精密度数据对质控的靶值范围进行计算。利用相对偏差及靶值范围对准确度进行评价;利用携带污染率对携带污染情况进行评价。利用线性方程对Trop I的线性范围进行评价,同时对Access 2免疫化学发光仪检测动物血清c Tn I的功能灵敏度进行了评价。结果 Access2免疫化学发光仪检测c Tn I低、中、高3个水平质控的批内RSD均〈8%,批间RSD均〈63.75%,大鼠、犬和食蟹猴血清c Tn I批内RSD均〈8%。Bio-Rad 3水平质控的靶值范围分别为：0.363 8-0.473 5、1.898 6-2.819 3、7.950 3-9.367 6 ng/m L。Access2免疫化学发光仪检测c Tn I的RSD〈16.32%,且低、中、高3水平质控均在各自的靶值±30%范围内。携带污染率〈10%,线性验证高值动物血清按一定比例稀释后将所得理论值与实测值进行回归分析,a值介于0.95-1.05,R〉0.975,线性范围为0.016 0-82.843 3 ng/m L,功能灵敏度为0.007 6 ng/m L。结论 Access2免疫化学发光仪检测c Tn I的精密度、准确度、携带污染率及线性范围均在可接受范围内,且本研究获得了动物血清c Tn I检测的线性范围及功能灵敏度。因此,Access2免疫化学发光仪可用于临床前不同动物种属c Tn I的检测。
- 王雁袁伟李旻汤纳平邱云良李华马璟
- 关键词：心肌钙蛋白I精密度动物血清
- 血浆/血清MicroRNAs定量分析的校正策略
- 2013年
- 血液循环microRNAs表达量的变化与各种疾病及组织损伤的相关性研究备受关注。但细胞的污染,RNA提取和处理过程中的试验误差都会不同程度的影响microRNAs定量分析的结果。各种校正策略的使用可以消除这些影响因素。就目前使用的不同校正策略的优缺点进行分析,便于研究者正确选择血液循环microRNAs定量分析的校正方法,从而获得准确可靠的生物学意义上的变化。
- 王雁汤纳平邱云良南雅萍马璟
- 关键词：RT-QPCR内参基因
- 基于HepG2细胞的药物体外线粒体毒性评价模型的建立
- 目的 拟建立基于HepG2细胞的药物体外线粒体毒性评价模型,为早期药物线粒体毒性筛选提供研究平台.方法 以HepG2细胞作为细胞模型,采用核苷类逆转录酶抑制剂齐多夫定(AZT)作为阳性药物,通过CCK8法检测AZT对He...
- 汤纳平王雁惠涛涛富欣马璟
- 药源性肝损伤的新型生物标志物研究进展
- 肝脏是人体的主要代谢器官,也是药物代谢的主要场所,因此,在药源性不良反应中,药源性肝损伤(DILI)是最常见不良反应之一。尽管目前难以准确统计人群中药源性肝损伤的发生率,但研究显示,DILI是临床上导致急性肝衰竭的主要原...
- 马璟汤纳平
- 人诱导多能干细胞在药物肝损伤研究中的应用被引量：2
- 2016年
- 人诱导多能干细胞具有自我更新和分化的多潜能性,其诱导分化的肝样细胞可应用于药物发现、筛选以及药物肝毒性评价研究。药物性肝损伤是导致上市药物被召回和药物研发失败的主要原因之一。临床前动物实验因其种属差异等方面的不足导致药物临床研究失败,浪费了大量人力物力。本文全面总结了人诱导多能干细胞诱导分化的肝细胞在药物肝毒性评价中的研究应用,希望有助于在药物研发过程中准确把握肝毒性,保证人体用药安全。
- 陈洁汤纳平马璟
- 关键词：多能干细胞肝损伤安全评价
- ACCESS 2免疫化学发光仪检测动物血清心肌钙蛋白I的分析性能确证
- ＜正＞目的对美国贝克曼库尔特有限公司Access2免疫化学发光仪的主要分析性能进行验证。方法对该仪器检测项目血清心肌钙蛋白Ⅰ（CardiacTroponin I,cTnI）进行性能验证。利用变异系数分别对质控及大鼠、犬和...
- 王雁李旻汤纳平邱云良李华马璟
- 文献传递
- 血浆miR-122作为药源性肝损伤生物标志物的研究及应用
- 目的本研究旨在建立标准化的血浆microRNAs实时定量PCR(RT-qPCR)技术平台,并采用对乙酰氨基酚(APAP)诱导的大鼠急性肝损伤模型评估血浆miR-122作为药源性肝损伤非侵袭生物标志物的可行性,同时将血浆m...
- 汤纳平王雁马璟
- 关键词：生物标志物
