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Combined Pluronic P85- and Ultrasound Contrast Agents-mediated Gene Transfection to HepG2 Cells: 2011年; This study examined the effect of P85(a pluronic block copolymer)and microbubble(MB)ultrasound contrast agents under ultrasound irradiation on gene transfection and expression.The pEGFP plasmids that can encode enhanced green fluorescent protein(pEGFP)served as a report gene and were mixed with different concentrations of MB/0.05%(w/v)P85.Then the plasmids were transfected into human hepatoma G2(HepG2)cells.The HepG2 cells treated with MB/P85 or without treatment were exposed to ultrasound(US parameters:1 MHz,1.0 W/cm2,20 s,20% duty cycle).Twenty-four hours later,the transfection efficiency was assessed by fluorescence microscopy and fluorescence activated cell sorting(FACS)analysis.The cell viability was evaluated by Trypan blue exclusion test.The results showed that the gene transfection efficiency in HepG2 cells under ultrasound irradiation was significantly higher than that without ultrasound irradiation.HepG2 cells in the MB or P85 group in the absence of ultrasound expressed less amount of green fluorescent protein.The expression efficiency reached(22.14±3.06)% and the survival rate was as high as(55.73±3.32)% in the 30% MB plus P85 group.It was concluded that MB and P85 in the presence of ultrasound can enhance gene transfection and expression.; 张喜君李开艳崔贤胡良军陈云超; 关键词：超声造影剂增强型绿色荧光蛋白组合聚醚

不同浓度超声微泡结合共聚物P85对人肝癌细胞HepG2基因转染的影响: 2011年; 目的不同浓度超声微泡造影剂(MB)结合共聚物P85后联合一定强度超声(US)辐照,初步摸索最适人肝癌细胞HepG2质粒转染及表达的MB浓度。方法以人肝癌细胞HepG2为研究对象,以绿色荧光蛋白(EGFP)质粒为报告基因,添加共聚物P85和不同浓度的MB后进行脉冲多普勒US辐照。24 h后台盼蓝染色评价细胞存活率,荧光显微镜和流式细胞仪评价细胞的基因转染率。结果 MB浓度在30%时达到较理想的转染率(22.14±3.06)%,且细胞存活率无明显下降(55.73±3.32)%。添加MB后基因转染率均较pEGFP+P85+US转染率高。结论 MB与共聚物P85结合同时给予US辐照可增强基因转染率,且在MB浓度为30%时达到较理想的转染率。; 张喜君李开艳崔贤胡良军陈云超; 关键词：共聚物微泡超声检查基因转染

超声微泡破裂法联合阳离子脂质体介导基因转染的实验研究被引量：3: 2013年; 目的探讨超声微泡破裂法联合阳离子脂质体（cationic liposome，CL）介导绿色荧光蛋白质粒在肝癌细胞（HepG2）基因转染的可行性，并探索最佳转染条件。方法依次采用培养液中是否含有血清和不同的CL浓度、不同超声辐照时间点、不同纳米级脂质微泡造影剂（nano—liposomalbubble，NB）浓度等处理因素进行细胞基因转染。荧光显微镜和流式细胞仪检测基因转染效率，CCK-8法检测细胞活性，以获得优化的转染参数。结果血清能降低CL的细胞毒性，但对基因转染效率无明显影响，CL与质粒DNA质量比4：1时可以达到相对高效低毒的转染效果，转染率（17．71±0．79）%，存活率（91．28±0．76）％。CL联合1h时间点辐照超声可以提高转染率至（24．85±0．78）%（P〈0．01），加入10％的NB可进一步提高转染率至（32．47±4．01）％（P〈0．05）。结论超声微泡破裂法可以有效增强CL介导的基因转染，联合应用为基因治疗提供了新思路。; 丁璐陈云超刘晓玲刘娜香张青萍; 关键词：微气泡阳离子脂质体转染

超声联合微泡造影剂治疗肿瘤的研究进展被引量：1: 2015年; 超声分子成像以靶向超声微泡造影剂为显影剂，能够对体内组织器官病变进行微观的探测与显像，且随着这项技术的进步，已使疾病的诊断及治疗成为一体。国内外学者在造影剂表面或内部载人基因或药物，使超声造影剂成为一种安全、便捷的载体，靶向释放药物或基因，从而达到治疗疾病的目的。现就超声联合微泡在肿瘤治疗中的研究进展作一综述。; 刘娜陈云超; 关键词：超声微泡造影剂肿瘤超声分子成像超声造影剂组织器官

2型糖尿病患者下肢动脉血管病变的超声诊断分析被引量：8: 2013年; 目的:分析2型糖尿病患者下肢动脉血管病变超声诊断的意义,为临床超声诊断提供理论依据。方法:选取我院2011年4月-2012年10月收治的100例2型糖尿病患者作为观察组,另选取同期100例健康体检者作为对照组。对比两组下肢动脉彩色多普勒超声检测结果的差异。结果:观察组检出85例斑块、23例狭窄、13例闭塞,对照组分别为21例、12例及0例;观察组下肢动脉管腔斑块、狭窄和闭塞发生率显著高于对照组(P>0.05);病程10-15年的患者,其足背动脉管径为(1.25±0.07)mm,显著低于对照组;病程超过25年的患者,全部下肢动脉血管管径均显著低于对照组(P<0.05);观察组股前动脉、胫后动脉及足背动脉血流速度明显低于对照组(P<0.05),两组人群股总动脉、腘动脉血流速度无明显差异(P>0.05)。结论:超声可有效反映2型糖尿病患者下肢动脉血管病变情况,且具有无创、可多次检查等优势,费用较低,降低了患者诊疗负担,为血管病变的早期诊断提供了有利条件,也在预防和控制患者糖尿病足等并发症方面起到了重要作用。; 陶安宇邓又斌李开艳刘娅妮余杨曾智琳王纯周晓东; 关键词：2型糖尿病下肢动脉血管病变超声诊断

超声纳米微泡联合阿霉素对小鼠H22移植瘤治疗及毒性的探讨被引量：2: 2016年; 目的探讨超声纳米微泡是否能减少阿霉素治疗小鼠H22移植瘤的剂量及降低对小鼠的心脏毒性。方法将30只已建立皮下H22移植瘤模型的昆明雌鼠随机分为5组，即对照组、阿霉素1．0mg／kg、阿霉素1．5mg／kg、阿霉素2．5mg／kg组及1．0mg／kg阿霉素＋微泡＋超声组，每组6只，隔天治疗1次，治疗5次。用超声监测皮下肿瘤的生长情况，绘制肿瘤生长曲线图，治疗后取肿瘤组织切片，进行HE染色及CD34、ki67免疫组化染色，观察肿瘤细胞坏死情况，计数肿瘤组织微血管密度，对肿瘤细胞增殖活性进行定量，测定小鼠血清的肌酸激酶（CK）、天冬氨酸转氨酶（AST）和乳酸脱氢酶（LDH），评价各组处理对肿瘤的抑制作用以及毒性作用。结果与对照组相比，其他各组肿瘤生长延缓，肿瘤坏死面积增加，微血管密度（MVD）减少，增殖期肿瘤细胞数减少（P〈0，05），1．0mg／kg阿霉素＋微泡＋超声组的肿瘤体积、MVD值及增殖期肿瘤细胞数均显著小于除了2．5mg／kg阿霉素组外的其他各组（Pd0．05）。1．0mg／kg阿霉素＋微泡＋超声组小鼠血清的AST、CK、LDH值均低于2．5mg／kg阿霉素组（P〈0．05），与1．5mg／kg阿霉素组相比仅CK值低于后者（P=0．002）。结论超声微泡与阿霉素联合应用可减少阿霉素对小鼠H22移植瘤的治疗剂量，在确保治疗效果的同时减少了化疗药的毒性。; 刘娜陈云超肖婷仇春丽; 关键词：微气泡阿霉素移植肿瘤微血管密度心肌酶

超声介导自制纳米泡联合顺铂对小鼠H22肿瘤抑制作用的研究被引量：8: 2016年; 目的探讨超声介导自制纳米泡对小鼠皮下H22肿瘤抑制效果最佳的治疗参数，超声辐照自制纳米泡联合顺铂对小鼠皮下H22肿瘤抑制效果及其可能的机制。方法建立30只小鼠H22肿瘤皮下移植瘤模型，随机分为6组，按照治疗方案的不同应用超声联合自制纳米泡对肿瘤予以不同超声强度和时间，在治疗前、治疗后即刻、治疗后24h及72h行超声造影检查及声学定量分析，以超声造影增强强度及微血管密度表达定量评价其疗效，筛选出较理想的超声治疗参数后，再以超声介导微泡联合顺铂治疗肿瘤，观察肿瘤生长情况，计算抑瘤率，以CD31染色作为微血管密度（microvascular density，MVD）表达的定量检测指标，用细胞核相关抗原（KI-67）染色检测肿瘤细胞的增殖情况。结果各条件组肿瘤治疗后各时刻超声增强强度与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05），且随着治疗功率的增强和辐照时间的延长，对小鼠肿瘤的抑制作用越显著，但不良反应也明显增多;联合药物的实验中，除单纯超声组外，各组的肿瘤抑瘤率、微血管计数、KI-67表达与对照组相比差异有统计学意义（P〈o．05），以超声微泡联合药物组肿瘤抑瘤率最大（抑瘤率为70．01％），MVD及肿瘤细胞增殖指数（KI-67LI）最低。结论超声联合自制纳米泡抑制肿瘤生长效果较理想的参数为辐照强度为1W／cm^2，辐照时间1min或3min间歇辐照模式；超声微泡联合药物具有协同抗肿瘤效应，其机制可能是通过抑制肿瘤新生血管生成和诱导肿瘤细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用。; 仇春丽陈云超刘娜肖婷; 关键词：微气泡顺铂

自制阳离子纳米泡介导HepG2细胞基因转染的实验研究被引量：1: 2013年; 目的观察自制阳离子纳米泡作为基因转染载体体外转染肝癌细胞系HepG2细胞的可行性。方法将脂质体、聚乙烯亚胺（PEI）和全氟丙烷声振后制得微囊带有PEI的阳离子脂质体纳米泡（PNB），评价其基本特性，用其转染HepG2细胞，并辐照超声，荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况，流式细胞仪检测细胞转染率，CCK-8法评估其细胞活性。结果制备的PNB表面带有正电荷，能阻碍质粒DNA在电场作用下发生迁移，且能有效地转染HepG2细胞，转染效率达30％～45％，辐照超声后转染效率明显提高（P〈0．05）。结论新型阳离子纳米泡在体外可作为基因转染载体，有效地携带质粒DNA并促进转染，辐照超声可使转染效率显著提高。; 刘晓玲陈云超丁璐刘娜香张青萍; 关键词：微气泡聚乙烯亚胺转染

超声微泡与阳离子多聚物联合应用促进基因转染的研究进展: 2012年; 超声能够促发携核酸分子微泡于靶部位破裂并释放核酸分子,同时声致孔隙效应使得细胞膜通透性增加,促使外源基因进入细胞,实现安全有效的靶向基因转染,但其转染效率较低,转染质粒表达持续时间短暂。阳离子多聚物可通过凝聚带负电荷的核酸形成复合物并结合于细胞膜表面,通过细胞内吞或膜融合作用进入胞内,转染效率相对较高,但具有一定细胞毒性。超声联合微泡与阳离子多聚物结合应用能够进一步促进基因转染,并降低阳离子多聚物的细胞毒性,是一种有前景的非病毒载体联合基因转染技术。; 刘晓玲陈云超; 关键词：基因转移技术超声微泡

超声联合微泡介导肝癌靶向治疗的研究进展被引量：4: 2012年; 随着超声影像技术的不断发展和造影剂制备工艺的不断改进,超声造影剂正在从诊断领域向治疗领域拓展。作为一种新的药物和基因载体,造影剂受到广泛关注,同时其在增强超声介导疾病治疗方面也显示出一定优势。本文就造影剂联合超声辐照介导肝癌靶向治疗的研究进展进行综述。; 丁璐陈云超; 关键词：微泡肝肿瘤

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国家自然科学基金(30970882)

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