国家高技术研究发展计划(2007AA10Z423)
- 作品数：6 被引量：58H指数：5
- 相关作者：李凤琴赵丽许洪芝宋艳艳温红玲更多>>
- 相关机构：中国疾病预防控制中心山东大学卫生部更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抗赭曲霉毒素A单克隆抗体的制备及其ELISA检测方法的建立被引量：4
- 2009年
- 目的制备抗赭曲霉毒素A(OA)的单克隆抗体(McAb)并对其进行初步鉴定,在此基础上建立竞争抑制酶联免疫吸附试验(ELISA)用于OA的检测。方法采用小剂量长周期的免疫方案,以OA-牛血清白蛋白(BSA)偶联物免疫雌性BALB/c小鼠,采用细胞融合法获得分泌抗OA的McAb的杂交瘤细胞株,用竞争抑制ELISA法进一步检测McAb的特异性,腹水诱生法大量制备McAb,以OA为竞争抗原,建立检测OA的竞争抑制ELISA。结果OA-BSA免疫的BALB/c小鼠血清效价为1:512000,与BSA有强烈的交叉反应。细胞融合后,ELISA筛选抗体分泌阳性的杂交瘤细胞株,抗OA-BSA的McAb与BSA的交叉反应率仅为3.5%,对分泌抗OA-BSA特异的McAb的细胞株经3轮克隆化,抗体分泌阳性率达到100%,建立了1株能稳定分泌抗OA-BSAMcAb的杂交瘤细胞株,竞争抑制法进一步证明了该抗体是特异针对OA的,腹水诱生法制备了大量的McAb。竞争抑制ELISA线性范围为0.24～125ng/mL,线性方程y=-0.1132logx+0.9016,相关系数r=0.98,最低检出浓度为0.24ng/mL。样品的加标回收率为97.07%～107.83%。结论获得了分泌抗OA的McAb的杂交瘤细胞株,建立了OA检测的简单、灵敏、高效的ELISA检测方法。
- 侯霄煜温红玲闫玉芬宋艳艳许洪芝赵丽李凤琴
- 关键词：单克隆抗体细胞融合酶联免疫吸附试验
- 生物利用率在食品污染物风险评估中的应用被引量：16
- 2011年
- 经口生物利用率是描述物质在胃肠道内释放、吸收、代谢、最终到达循环系统的过程,是外暴露剂量中对机体产生作用的物质比例。基于生理条件模拟人类胃肠道消化、吸收、转运等过程的体外消化模型是目前研究食品中污染物生物利用率的有用工具。食物基质成分及脂肪含量、污染物理化性质、食物中其他营养素含量和机体营养状态等影响物质的生物利用率。本文阐述生物利用率在食品污染物风险评估中的应用。
- 李凤琴徐娇刘飒娜
- 关键词：生物利用率食品污染物风险评估
- 抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇单克隆抗体的制备及鉴定被引量：7
- 2010年
- 目的制备抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)单克隆抗体(McAb)并对其进行初步鉴定。方法采用小剂量长周期的免疫方案,以DON-牛血清白蛋白(BSA)偶联物免疫雌性BALB/c小鼠,采用细胞融合的方法制备杂交瘤细胞株,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清中McAb,对抗体分泌阳性的细胞株进行克隆化,直至抗体阳性率100%,用竞争抑制ELISA法进一步检测McAb的特异性,腹水诱生法制备大量McAb,并用饱和硫酸铵对其进行纯化,用抗体亚类鉴定试剂盒对该McAb亚类进行鉴定,BCA蛋白测定试剂盒测定蛋白含量,ELISA检测McAb的滴度、参考工作稀释度和亲和常数。结果 DON-BSA免疫的BALB/c小鼠血清效价为1∶256000,与BSA有强烈的交叉反应。细胞融合后,ELISA筛选抗体分泌阳性的杂交瘤细胞株,经3轮克隆化,建立了1株能稳定分泌抗DON-BSAMcAb的杂交瘤细胞株3G5,腹水诱生法制备了大量的McAb。该McAb属IgG1,IgG含量为6.06g/L,抗体滴度为1∶500000,参考工作稀释度为1∶64000,抗体亲和常数为1.62×109。用间接竞争抑制ELISA测得校正曲线线性范围9.8～10000ng/mL,线性方程Y=-0.2726X+0.2259(r=0.9309)。结论获得了分泌抗DON-McAb的杂交瘤细胞株,该单克隆抗体灵敏度高,特异性强,可用于制备高质量国产DON-ELISA检测试剂盒。
- 赵丽温红玲侯霄煜蒲双双宋艳艳许洪芝李凤琴
- 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇单克隆抗体
- 济南市售小米和玉米中赭曲霉素A污染状况研究被引量：10
- 2010年
- 目的了解济南市售小米和玉米中赭曲霉毒素A的污染情况。方法采用竞争抑制酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测小米和玉米中赭曲霉毒素A的提取溶剂、检测条件、回收率等,并对其进行优化研究,并利用优化出的条件对济南市5个区市售小米和玉米中赭曲霉毒素A含量进行检测并评价。结果含有5%氯化钠的60%甲醇水溶液对谷物中赭曲霉毒素A的提取效果较为理想,检测的所有样品中,小米、玉米赭曲霉毒素A检出率分别为41%和38%,其中,超市小米赭曲霉毒素A检出率(56%)明显高于集市小米(26%)(P<0.05)。赭曲霉毒素A污染水平在0.40～4.45μg/kg之间,中位数为1.67μg/kg,集市和超市出售的小米、玉米中赭曲霉毒素A污染水平均无统计学意义(P>0.05)。本次检测所有样品中的赭曲霉毒素A含量均未超过国家规定的粮食中赭曲霉毒素A的限量标准。结论济南市售的小米和玉米中均不同程度地存在赭曲霉毒素A污染,但污染水平均未超过国家标准。
- 杨延友高文花温红玲蒲双双宋艳艳许洪芝赵丽李凤琴
- 关键词：赭曲霉毒素A小米玉米酶联免疫吸附试验
- 化学发光酶免疫分析法检测食品中赭曲霉毒素被引量：10
- 2010年
- 目的:建立检测食品中赭曲霉毒素(OA)快速灵敏化学发光酶免疫方法。方法:采用棋盘滴定法确定OA-BSA抗原的包被质量浓度、包被量以及一抗和二抗的工作稀释度,建立间接竞争抑制曲线,确定线性范围、检出限和回收率。结果:确定的检测工作条件为:OA-BSA最佳包被质量浓度60ng/mL,抗OA单克隆抗体的最佳工作稀释度1:400,校正曲线线性范围6～400ng/mL,赭曲霉毒素的检出限为0.02ng/mL,50%抑制质量浓度145ng/mL,在100～2000ng/g添加水平的回收率范围为83.6%～105.8%。用所建方法对质控样品进行了分析,检测结果符合率达到100%。结论:所建方法准确、灵敏,适用于食品中OA的筛选。
- 邱云青王伟李凤琴
- 关键词：赭曲霉毒素
- 化学发光免疫分析技术在食品有害因素检测中的应用被引量：11
- 2009年
- 国内屡屡发生的食物中毒和食品污染事件、国际间食品贸易危机和以食品为载体的生物恐怖事件,使食品安全成为政府和公众关注的焦点。创建并研制食品中有害物质现场快速检测技术和装备,对开展食品、中毒样品中有害残留的连续、动态现场监控具有重要意义。本文就化学发光免疫分析技术基本原理及其在食品有害因素现场快速检测中的应用进行综述。
- 邱云青李凤琴
- 关键词：化学发光免疫法食品
