国家自然科学基金(30970830)
- 作品数：7 被引量：28H指数：4
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 靶向于雄激素受体的siRNA筛选及效能评价被引量：1
- 2011年
- 目的设计并合成新的靶向于雄激素受体(AR)的siRNA序列,转染前列腺癌细胞筛选最佳干扰序列。方法设计并合成靶向于雄激素受体的siRNA,以不同浓度转染雄激素非依赖性前列腺癌细胞C4-2,确定最佳转染浓度。以最佳转染浓度转染细胞,分为siRNAⅠ组、siRNAⅡ组、siRNAⅢ组、阴性对照组、空白对照组和无关对照组。RT-PCR检测AR mRNA表达水平,Western blot检测AR蛋白表达水平。CCK-8分析绘制细胞生长曲线,观察C4-2细胞生长活性并筛选出抑制效果最佳的siRNA靶序列。结果以不同浓度的AR siRNA转染C4-2细胞后,细胞生长活性降低(P<0.05),并筛选出100 nmol/L的最佳转染浓度;RT-PCR和Western blot结果显示转染后AR的mRNA和蛋白表达水平显著下降(P<0.05);CCK-8法检测结果显示各组细胞增殖活性显著降低,其中siRNAⅠ的抑制效果最为明显(P<0.05)。结论新设计合成的AR siRNA能通过沉默AR表达高效抑制C4-2细胞的增殖。
- 张淼郭燕丽王洛夫李彦李锐
- 关键词：RNA干扰雄激素受体雄激素非依赖性前列腺癌
- 前列腺特异性膜抗原胞外区的真核表达及其纳米抗体的淘选被引量：1
- 2013年
- 目的寻找能够特异性与前列腺特异性膜抗原(prostate-specific membrane antigen,PSMA)胞外区结合的纳米抗体。方法通过RT-PCR技术在真核细胞HEK-293中重组表达PSMA胞外区。以该重组蛋白为包被抗原,采用固相淘选的方法在天然纳米抗体噬菌体展示库中淘选能够与之特异性结合的噬菌体,以Phage-ELISA方法筛选出具有结合活性的噬菌体克隆。通过细胞ELISA和细胞免疫荧光技术再次验证分子水平淘选到的阳性噬菌体克隆。结果测序证明编码PSMA的重组DNA片段序列正确,Western blot验证该重组蛋白成功表达。4轮固相淘选天然库使具有结合活性的噬菌体克隆得到了有效富集,阳性率从8.3%提高到64.6%。细胞ELISA测值表明PSMA表达阳性细胞明显高于阴性细胞[PSMA+:(0.621±0.043);PSMA-:(0.148±0.014),P<0.01];细胞免疫荧光亦证实分子水平淘选的阳性噬菌体与表达PSMA阳性细胞能发生特异性结合。结论从天然纳米抗体噬菌体库中淘选得到了在分子和细胞水平均能与PSMA胞外区特异性结合的阳性噬菌体克隆。
- 范校周郭燕丽涂追童海鹏李浪王洛夫黄海韵许杨
- 关键词：前列腺特异性膜抗原噬菌体展示
- 超声分子影像学:现状与将来被引量：4
- 2014年
- Weissleder于1999年首先阐述了分子影像学的定义,即分子影像学是通过发展新的工具、试剂及方法,应用影像学方法（X线、CT、MR、超声等）来探查疾病过程中细胞和分子水平的变化。它能使疾病在尚无解剖结构改变前被检测出来,从而有利于探索疾病的发生、发展、转归以及药物疗效的评价,
- 郭燕丽范校周
- 关键词：超声医学分子影像学造影剂靶向治疗
- 前列腺癌的分子影像学进展被引量：5
- 2013年
- 前列腺癌是严重威胁男性健康的疾病。分子影像学的出现,从一个全新角度为前列腺癌的早期诊断与治疗提供了可能,新的前列腺癌标志物也不断出现。本文对当前分子影像学技术,包括核素显像、MRI、超声和光学技术在前列腺癌诊治中的应用进展进行回顾。
- 范校周郭燕丽
- 关键词：分子影像学前列腺肿瘤磁共振成像
- 静电吸附法与生物素-亲和素桥联法制备PSMA抗体靶向纳米微泡的对比实验研究被引量：4
- 2013年
- 目的比较静电吸附法和生物素-亲和素桥联法制备前列腺特异性膜抗原(PSMA)抗体靶向纳米微泡的物理特性和靶向黏附率。方法分别应用静电吸附法和生物素-亲和素桥联法制备PSMA抗体靶向的纳米微泡,检测其物理性状;光镜下观察两种微泡与前列腺癌细胞LNCaP和C4-2的靶向能力,并与胃癌细胞MKN45对照;对比分析两种靶向纳米微泡的粒径、浓度及与前列腺癌细胞结合能力。结果两种靶向纳米微泡均呈圆形,表面光滑,大小均匀,分散度好,无聚集,粒径均<1000 nm。静电吸附法制备的靶向纳米微泡平均粒径为(702.96±66.65)nm,平均浓度为(3.46±0.30)×108/ml,与前列腺癌细胞LNCaP黏附率(77.2±3.19)%,与C4-2细胞黏附率(61.00±4.47)%;生物素-亲和素桥联法制备的靶向纳米微泡平均粒径为(609.90±37.40)nm,平均浓度约(4.52±0.19)×108/ml,与前列腺癌细胞LNCaP黏附率(96.60±1.14)%,与C4-2细胞黏附率(94.00±1.58)%。两种靶向纳米微泡的粒径、浓度及与前列腺癌细胞黏附率比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);与胃癌细胞MKN45均无黏附。结论生物素-亲和素桥联法是一种高效、灵敏、稳定、特异性强的PSMA抗体靶向微泡制备方法,较静电吸附法具有更大的优势。
- 李浪郭燕丽张淼范校周童海鹏
- 关键词：靶向微泡前列腺特异性膜抗原生物素-亲和素系统
- 自制纳米级超声微泡体外基本特性和肿瘤造影增强显影的实验研究被引量：7
- 2011年
- 目的 探讨自制纳米级超声微泡的体内基本特性及体内造影增强显影效果.方法 机械振荡与低速离心法结合制备纳米级微泡,并对微泡粒径大小、分布、微观形态和稳定性进行研究.同时在裸鼠肝、肾及前列腺癌皮下移植瘤进行超声造影实验,与常规微米级造影剂对比造影效果.结果 所制备的微泡形态圆整,大小均一性较好,分布均匀无聚集,平均粒径（580.6±36.3）nm.该纳米级微泡能显著增强裸鼠肝肾及皮下移植瘤显影,与常规造影剂比较,不但增强强度相当,且显影时间显著延长.结论 自制纳米级超声微泡造影剂各项物理特性符合纳米级超声造影剂的要求,体内增强效果和稳定性较强,为下一步纳米级微泡在肿瘤显像和治疗中的应用提供实验依据.
- 张淼郭燕丽谭开彬李锐华兴丁俊
- 关键词：微气泡超声检查肿瘤
- 携载PSMA单抗靶向前列腺癌的纳米级脂质微泡的制备及体外寻靶能力被引量：8
- 2012年
- 目的制备携载PSMA单抗靶向人前列腺癌的纳米级脂质微泡,并观察其体外寻靶能力。方法利用静电吸附法制备携载PSMA单抗靶向前列腺癌的脂质纳米级微泡,检测其一般特性;免疫荧光法检测抗体与纳米级微泡的结合情况;用细胞免疫荧光分析鉴定PSMA的表达及其在细胞膜上的定位;普通光镜下观察靶向微泡对前列腺癌细胞的寻靶能力,同时以胃癌细胞作对照。结果携载PSMA单抗的靶向纳米级微泡分布均匀,平均粒径为(623.70±66.05)nm,免疫荧光法显示微泡表面可见绿色荧光,细胞免疫荧光检测前列腺癌细胞膜高表达PSMA,体外寻靶实验显示该靶向微泡可与人前列腺癌LNCAP及C4-2细胞牢固结合,而与胃癌MKN45细胞不结合。结论本实验成功制备的携载PSMA单抗靶向人前列腺癌的纳米级脂质微泡具有较强的体外寻靶能力,能特异性地与前列腺癌细胞结合。
- 李浪郭燕丽张淼谭开彬华兴
- 关键词：微泡前列腺肿瘤前列腺特异性膜抗原
