国家自然科学基金(81260030)
- 作品数：20 被引量：30H指数：5
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- 抑制干扰素诱导蛋白p204表达促进大鼠血管外膜成纤维细胞生长与迁移被引量：4
- 2016年
- 目的观察干扰素诱导蛋白p204表达抑制后对大鼠血管外膜成纤维细胞(VAF)凋亡、增殖与迁移的影响及其部分机制。方法应用Ifi204小干扰RNA(si RNA)转染VAF使Ifi204基因沉默(Ifi204-si RNA组),以非特异性si RNA转染作为其转染阴性对照组(Con-si RNA组)和未经处理的VAF作为未干预阴性对照组(Neg组)。用MTT法检测VAF细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,细胞划痕法和Transwell法测定细胞迁移情况,应用实时荧光q RT-PCR和Western blot分别检测p204、p53及p21的m RNA和蛋白表达。结果与Con-si RNA组和(或)Neg组相比,Ifi204-si RNA组的p204、p53及p21的m RNA和蛋白表达减少(P<0.05),细胞凋亡率下降(P<0.05),细胞增殖及迁移速度提高(P<0.05)。结论抑制p204表达可减少大鼠VAF细胞凋亡,促进其增殖与迁移,其机制可能部分与抑制p53及p21表达有关。
- 宋方田茂波黄晶龙向淑吴强
- 关键词：血管外膜成纤维细胞细胞迁移
- 干扰素α通过IFI16和P21影响人血管内皮细胞凋亡被引量：2
- 2015年
- 目的观察干扰素α(IFN-α)对人血管内皮细胞(VECs)凋亡的影响并了解其部分机制。方法应用IFN-α和转染IFN诱导蛋白16基因(IFI16)的siRNA瞬时干预体外培养的VECs,以转染非特异性siRNA设为对照组,RT-PCR法检测IFI16及P21mRNA表达,Western blot检测IFI16及P21蛋白表达,流式细胞仪Annexin-V FITC/PI法检测细胞凋亡情况。结果与对照组比较,IFN-α组IFI16mRNA和蛋白表达上调(P<0.05),细胞凋亡增多(P<0.05),伴P21mRNA和蛋白表达增多(P<0.05);IFN-α干预后再转染IFI16siRNA,IFI16mRNA和蛋白表达下调(P<0.05),细胞凋亡减少(P<0.05),P21mRNA和蛋白表达减少(P<0.05)。结论 IFI16及P21参与IFN-α诱导VECs凋亡过程的调控。
- 龙向淑吴强宋方黄晶田茂波肖燕
- 关键词：干扰素Α凋亡
- 抑制干扰素诱导蛋白16表达减少人主动脉外膜成纤维细胞凋亡
- 2017年
- 目的:研究干扰素诱导蛋白16(IFI16)表达抑制后对人主动脉外膜成纤维细胞(HAAFs)凋亡的影响。方法:应用IFI16基因小干扰RNA(siRNA)转染HAAFs使IFI16基因沉默(IFI16-siRNA组),以非特异性siRNA转染作为其转染阴性对照组(Con-siRNA组),未经处理的HAAFs作为未干预阴性对照组(Neg组)。应用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡,实时定量逆转录-聚合酶链反应(Realtime qRT-PCR)检测细胞中IFI16 mRNA表达变化,蛋白免疫印迹(Western blotting)检测IFI16、抑癌因子(p53)、细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子p21^(WAF)(p21)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)及Bcl-2蛋白表达。结果:IFI16-siRNA组与Con-siRNA组、Neg组相比,细胞凋亡率[(3.33±0.41)%vs(7.42±1.51)%(、6.49±1.10)%,P<0.05]与G_0/G_1期细胞比例[(56.64±4.77)%vs(69.67±3.54)%、(68.29±4.14)%,P<0.05]减少;而S期细胞比例[(25.23±5.19)%vs(13.76±2.07)%、(14.04±3.00)%,P<0.05]增加;伴随着IFI16mRNA表达减少(P<0.05),以及IFI16-siRNA组IFI16、p53、p21、Bax蛋白表达量减少(P<0.05);同时Bcl-2蛋白表达量增加(P<0.05)。结论:抑制IFI16表达可减少HAAFs细胞凋亡,促进细胞周期G_1/S转换,其机制部分与抑制p53/p21信号通路及调控Bax/Bcl-2表达有关。
- 肖燕宋方吴强黄晶
- 关键词：成纤维细胞细胞凋亡
- 二甲双胍通过lncRNA-MALAT1对人血管平滑肌细胞活力、迁移及凋亡的影响被引量：4
- 2019年
- 目的:探讨二甲双胍通过长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1(lncRNA-MALAT1)对人血管平滑肌细胞(VSMC)活力、迁移及凋亡的影响。方法:RT-qPCR检测38例无冠心病的对照人群与35例冠心病患者血液中lncRNA-MALAT1的表达。用二甲双胍给药后检测lncRNA-MALAT1的表达;用二甲双胍给药或MALAT1小干扰RNA(si-MALAT1)转染VSMC后,用CCK-8法检测细胞活力,细胞划痕法测定细胞迁移情况,流式细胞术检测细胞凋亡水平, RT-qPCR检测lncRNA-MALAT1表达及抑癌因子p53 mRNA表达水平, Western blot检测p53蛋白表达水平。结果:与对照人群相比,冠心病患者血液中lncRNA-MALAT1表达显著升高(P<0.05)。二甲双胍给药后,lncRNA-MALAT1表达呈时间依赖性降低;与阴性对照组比较,二甲双胍给药组VSMC活力和迁移能力均显著下降,而凋亡率显著升高,p53 mRNA及蛋白表达水平亦显著升高(P<0.05)。与si-NC组比较,si-MALAT1组VSMC活力和迁移能力下降(P<0.05),凋亡率升高不显著,p53 mRNA水平及蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论:二甲双胍可能通过lncRNA-MALAT1抑制VSMC的活力和迁移能力,促进细胞凋亡,其机制可能部分与激活p53表达有关。
- 游赣花龙向淑宋方黄晶田茂波肖燕邓世燕吴强
- 关键词：二甲双胍P53蛋白细胞迁移
- α干扰素对人脑血管成纤维细胞增殖、凋亡与迁移的影响被引量：6
- 2013年
- 目的:探讨α干扰素(IFN-α)对人脑血管外膜成纤维细胞(HBVAF)增殖、凋亡与迁移的影响及相关机制。方法:培养HBVAF细胞,实验设空白对照组与IFN-α组(用终浓度为2 000kU/L的IFN-α刺激细胞24h)。用流式细胞仪测定细胞周期与细胞凋亡变化。细胞划线法与Transwell法测定细胞迁移能力。应用Real-time PCR和Western blot分别测定细胞中P53与P21mRNA和蛋白表达水平。结果:与空白对照组比较,IFN-α干预HBVAF后,增加了细胞G0/G1期比例[(68.96±0.27)∶(55.46±0.98),P<0.05]与细胞凋亡率[(14.61±0.26)∶(4.69±0.26),P<0.05],而降低了S期细胞比例[(13.46±0.44)∶(32.37±0.99),P<0.05]与细胞迁移能力,且随P53与P21mRNA及蛋白表达水平上调。结论:IFN-α可抑制HBVAF增殖与迁移,促进其凋亡,其部分机制可能与促进P53、P21表达有关。
- 黄晶宋方龙向淑吴强
- 关键词：Α干扰素血管外膜成纤维细胞增殖凋亡迁移
- 干扰素α通过P204和RAS信号途径诱导大鼠血管平滑肌细胞凋亡
- 2015年
- 目的观察干扰素-α(IFN-α)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡的影响,并探讨其部分机制。方法将VSMCs分为A、B、C 3组,A组转染非特异性siRNA,B组予IFN-α干预后转染非特异性siRNA,C组予IFN-α干预后转染IFN诱导蛋白204基因(IFI204)siRNA,均培养至48 h收集细胞。反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测IFN诱导蛋白204(P204)mRNA表达,Western blot检测P204、RAS蛋白表达及RAF/ERK磷酸化变化,流式细胞仪Annexin-V FITC/PI法检测细胞凋亡。结果与A组比较,B组P204 mRNA和蛋白表达上调(P<0.05),细胞凋亡增多(P<0.05),伴RAS蛋白表达减少(P<0.05),RAF/ERK磷酸化水平下降(P<0.05);C组P204 mRNA及蛋白表达下调(P<0.05),细胞凋亡减少(P<0.05),RAS蛋白表达增多和RAF/ERK磷酸化水平上调(P<0.05)。结论 P204及RAS信号途径参与IFN-α诱导大鼠VSMCs凋亡过程的调控。
- 龙向淑吴强刘太河宋方黄晶田茂波肖燕
- 关键词：干扰素血管平滑肌细胞凋亡
- RAS信号途径参与干扰素-α抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖被引量：5
- 2014年
- 目的探讨RAS信号途径在干扰素-α(IFN-α)抑制大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖中的作用。方法应用转染IFI204 siRNA和/或IFN-α瞬时干预体外培养的大鼠VSMCs,以非特异性siRNA转染组为对照组,用MTT法测定细胞活力,流式细胞仪分析细胞周期,RT-PCR法和Western blot分别检测P204 mRNA、P204和Ras蛋白的表达及RAF与ERK的磷酸化水平。结果与对照组比较,IFN-α组P204 mRNA和蛋白表达上调(P<0.01),细胞活力和细胞周期G1/S转换下调(P<0.01),伴RAS蛋白表达减少(P<0.01),RAF及ERK磷酸化水平下降(P<0.01);转染IFI204 siRNA后再加IFN-α干预,P204 mRNA及蛋白表达下调(P<0.01),而G0/G1期细胞增多,S期细胞减少(P<0.01),且RAS蛋白表达和RAF及ERK磷酸化水平亦下调(P<0.01)。结论 RAS信号途径参与IFN-α抑制大鼠VSMCs增殖。
- 龙向淑吴强宋方黄晶张林军
- 关键词：干扰素血管平滑肌细胞增殖干扰素诱导蛋白P204
- 抑制干扰素诱导蛋白16表达对人脑血管外膜成纤维细胞增殖、凋亡及迁移的影响被引量：2
- 2017年
- 目的探讨抑制干扰素诱导蛋白16(IFI16)表达后对人脑血管外膜成纤维细胞(HBVAF)增殖、凋亡与迁移的影响及其可能机制。方法培养HBVAF分3组,未经处理的HBVAF作为空白对照组,转染非特异性小干扰RNA(siRNA)的HBVAF作为阴性对照组,转染IFI16siRNA的HBVAF作为IFI16siRNA组。应用蛋白免疫印迹和实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定细胞中IFI16、p53、p21蛋白和mRNA表达水平。用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞活力,流式细胞术测定细胞凋亡,Transwell法测定细胞迁移情况。结果与阴性对照组比较,转染IFI16siRNA后,HBVAF中IFI16、p53及p21蛋白和mRNA表达水平下调,IFI16siRNA组MTT吸光度值增高(0.70±0.01比0.65±0.01,P<0.05),IFI16siRNA组、阴性对照组与空白对照组之间在细胞迁移数目与凋亡比例上差异无统计学意义。结论抑制IFI16表达可促进HBVAF增殖,其机制可能部分与抑制p53及p21表达有关。
- 黄晶宋方龙向淑田茂波吴强
- 关键词：干扰素诱导蛋白血管外膜成纤维细胞增殖
- 干扰素α通过P204和P21诱导大鼠原代血管平滑肌细胞凋亡被引量：3
- 2014年
- 目的探讨干扰素-α(IFN-α)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡的影响。方法应用转染IFI204 siRNA和/或IFN-α瞬时干预体外培养的大鼠VSMCs,以非特异性siRNA转染组为对照组,RT-PCR法检测P204及P21mRNA表达,Western blot检测P204及P21蛋白表达,流式细胞仪Annexin-V FITC/PI法检测细胞凋亡。结果与对照组比较,IFN-α组P204 mRNA和蛋白表达上调(P<0.01),细胞凋亡增多(P<0.01),伴P21 mRNA和蛋白表达增多(P<0.01);IFI204 siRNA转染组P204 mRNA和蛋白表达下调(P<0.01),细胞凋亡减少(P<0.01),P21mRNA和蛋白表达减少(P<0.01);转染IFI204 siRNA后再加IFN-α干预,P204 mRNA及蛋白表达下调(P<0.01),但P21mRNA及蛋白表达增多(P<0.01),促进细胞凋亡(P<0.01)。结论 P204及P21参与IFN-α诱导大鼠VSMCs凋亡过程的调控。
- 龙向淑吴强宋方黄晶张林军
- 关键词：干扰素血管平滑肌细胞凋亡干扰素诱导蛋白P204
- 干扰素诱导蛋白16 siRNA对干扰素α诱导的人血管内皮细胞凋亡的影响被引量：5
- 2015年
- 目的:探讨干扰素诱导蛋白16(IFI16)siRNA对干扰素-α(IFN-α)诱导的人血管内皮细胞(HVECs)凋亡的影响及其机制。方法:应用转染IFN-α和(或)IFI16siRNA瞬时干预体外培养的HVECs,分别设空白组为阴性对照组,IFN-α加非特异性siRNA转染组为对照组,RT-PCR法检测IFI16mRNA表达,流式细胞仪Annexin-V FITC/PI法检测细胞凋亡,Western blotting检测蛋白表达及细胞增殖信号通路相关蛋白磷酸化水平。结果:与阴性对照组比较,对照组及IFN-α组IFI16mRNA和蛋白表达上调,细胞凋亡增多,伴RAS蛋白表达减少,RAF、ERK磷酸化水平下降(P<0.01);IFN-α加IFI16siRNA组IFI16mRNA及蛋白表达下调,细胞凋亡减少,RAS蛋白表达增多,RAF及ERK磷酸化水平升高(P<0.01)。与对照组比较,IFN-α加IFI16siRNA组IFI16mRNA和蛋白表达减少,细胞凋亡减少,伴Ras蛋白表达增多,RAF、ERK磷酸化水平上调(P<0.01);而IFN-α组上述指标差异无统计学意义。在上述过程中,P38及AKT蛋白磷酸化水平无明显变化。结论:RAS信号途径参与IFI16siRNA抑制IFN-α诱导的HVECs凋亡。
- 龙向淑吴强宋方黄晶张林军
- 关键词：血管内皮细胞凋亡干扰素诱导蛋白
