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SARS-CoV的来源及其种间传播的分子进化基础: SARS(severe acute respiratory syndrome)的暴发和流行给人类健康和公共卫生带来了重大灾难和深刻教训。SARS病原是一个新型冠状病毒,即SARS冠状病毒(SARS-CoV),来源于野生动...; 孙金福涂长春; 文献传递

尼帕病毒和亨得拉病毒核蛋白单克隆抗体的制备与鉴定被引量：8: 2007年; 尼帕病毒（Nipahvirus，NiV）和亨得拉病毒（Hendravirus，HeV）是近年来出现的2种新的高致病性副粘病毒，在我国尚未发现。为防范2种病毒在我国的出现，本研究开展了前瞻性工作，成功研制了针对2种病毒核蛋白（N）的单克隆抗体，可用于病毒监测与诊断。首先利用大肠杆菌表达的2种病毒N蛋白免疫BALB／c小鼠，细胞融合后应用间接免疫荧光的方法对杂交瘤细胞克隆进行筛选，获得了5株N蛋白特异单抗。单抗腹水的抗体效价均超过2×10^5，培养上清抗体效价1：64～1：256。Western—blot和间接免疫荧光试验证明，5株单抗均特异针对N蛋白，其中1株（H4D11）只与HeVN蛋白反应，而不与NiVN蛋白反应，表明它具有鉴别2种病毒的能力。所研制的单抗对建立2种病毒的检测技术，用于动物监测，以防范2种新发传染病在我国流行具有重要意义。; 肖昌刘勇军徐兴然涂长春张玉静; 关键词：尼帕病毒核蛋白单克隆抗体

尼帕病毒和亨得拉病毒核蛋白基因在杆状病毒表达系统的表达及反应原性鉴定被引量：3: 2006年; 利用改造的昆虫杆状病毒表达系统转移载体，成功地对尼帕病毒（NiV）和亨得拉病毒（HeV）的核蛋白基因进行了分泌表达。重组蛋白表达的时效性分析结果显示，Sf9细胞感染重组病毒72～96h后，蛋白的表达量达到高峰，大规模表达可分别获得2．3～2．4mg／L纯化的目的蛋白。应用Western blot、间接ELISA和间接免疫荧光（IFA）对两种重组N蛋白与兔抗NiV和HeV阳性血清的反应性进行鉴定，结果表明两种重组N蛋白和阳性血清有很好的反应性，并且在血清学上有交叉反应。该研究为今后开展流行病学调查和诊断试剂的研制打下了基础。; 肖昌徐兴然查云峰张玉静宣华涂长春; 关键词：尼帕病毒核蛋白杆状病毒反应原性

SARS-CoV的来源及其种间传播的分子进化基础被引量：2: 2007年; 孙金福涂长春; 关键词：SARS-COV 分子进化种间传播 SARS冠状病毒新型冠状病毒

亨尼帕病毒核蛋白新抗原表位的鉴定: 本研究利用原核表达系统和杆状病毒表达系统分别表达了亨得拉和尼帕病毒核蛋白(N),以此免疫Balb／C小鼠,成功地制备了4株N蛋白单抗(2株抗NiV和2株抗HeV)。Western Blot及间接免疫荧光检测表明4株单抗对...; 肖昌刘勇军江禹郭焕成张玉静宣华涂长春; 关键词：核蛋白抗原表位; 文献传递

尼帕病毒融合蛋白、受体结合蛋白的表达及特异性高免血清制备被引量：8: 2007年; 尼帕病毒膜融合蛋白F和受体结合蛋白G在病毒感染和诱导机体产生保护性免疫中起重要的作用。通过PCR扩增获得尼帕病毒F1和G基因片段(均去掉信号肽和跨膜区),克隆至原核表达载体,IPTG诱导大肠杆菌表达目的蛋白,Western blot表明重组F1、G蛋白与兔抗尼帕病毒血清具有良好的反应原性;同时将F1和G基因克隆至经改造过的杆状病毒表达载体,获得了含有目的基因的重组杆状病毒,接种sf9单层细胞,间接免疫荧光检测表明F1、G蛋白在杆状病毒中正确表达,并与抗尼帕病毒血清具有良好的反应原性。以纯化原核表达的F1、G蛋白免疫兔获得了抗F1和抗G重组蛋白的特异血清,Western blot和间接免疫荧光检测表明所制备的血清具有特异性。试验所表达的抗原和制备的特异血清可用于尼帕病的诊断。; 刘勇军肖昌王贵平宣华涂长春; 关键词：融合蛋白受体结合蛋白重组杆状病毒高免血清

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广东省科技计划工业攻关项目(2004A20403001)