广东省重大科技专项(2004A20401001)
- 作品数：1 被引量：9H指数：1
- 相关作者：吴灶和简纪常梁海鹰鲁义善夏立群更多>>
- 相关机构：广东海洋大学中国科学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室更多>>
- 发文基金：广东省重大科技专项国家科技支撑计划广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 溶藻弧菌HY9901鞭毛蛋白flaB基因的克隆及原核表达被引量：9
- 2010年
- 参照GenBank上登录的弧菌鞭毛蛋白flaB基因序列设计引物,PCR扩增溶藻弧菌HY9901株的flaB全长基因,序列分析结果显示该基因为1134bp,编码377个氨基酸。与GenBank中其它弧菌的同源基因序列比对显示,溶藻弧菌flaB基因与副溶血弧菌flaB基因的同源性最高(92%)。将该基因定向克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达出带His-tag的融合蛋白,分子量大小与预期一致。优化的表达条件为28℃,0.4mmol/LIPTG浓度诱导10h。用纯化后的融合蛋白免疫SPF级小鼠,制备了多克隆抗体。Western-blotting结果表明鼠抗FlaB血清不仅能与诱导后的重组蛋白发生反应,而且能与天然的溶藻弧菌全菌蛋白发生反应,提示鞭毛蛋白FlaB可能是溶藻弧菌的重要保护性抗原之一,为下一步进行FlaB蛋白免疫原性的研究以及疫苗的制备奠定了基础。
- 梁海鹰夏立群吴灶和简纪常鲁义善
- 关键词：溶藻弧菌鞭毛蛋白原核表达
