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牛血清白蛋白介导合成的金纳米簇用于活细胞荧光成像被引量：7: 2010年; 以牛血清白蛋白介导合成金纳米簇,并利用荧光分光光度计、纳米粒度及zeta电位仪以及非变性聚丙烯酰胺蛋白质电泳对其进行了表征.结果表明,该金纳米簇不仅荧光信号较强,而且在不同pH值溶液中荧光稳定性好.在此基础上进一步考察了金纳米簇与宫颈癌细胞(HeLa)间的相互作用.结果表明,该金纳米簇可成功进入活细胞内,在最佳的培育时间和金纳米簇浓度条件下可达到较好的活细胞荧光标记效果,且在经过细胞固定化处理后仍保持其标记形态.; 袁媛何晓晓石慧王柯敏伍旭霍希琴; 关键词：活细胞荧光标记

基于Poly(A)/二氧化硅纳米颗粒的pH可控释放抗肿瘤药物载体被引量：2: 2014年; 利用异喹啉类生物碱小分子化合物与腺嘌呤(A碱基)在酸性条件结合力下降的特点,以具有良好生物相容性、DNA酶切保护性以及易于生物修饰的二氧化硅纳米颗粒为载体,发展了一种基于聚A链(Poly(A))/二氧化硅纳米颗粒(Poly(A)/SiNPs)的pH可控释放抗肿瘤药物体系.在该体系中,选择了甲氧檗因(coralyne)作为药物模式分子,通过共价修饰方法在二氧化硅纳米颗粒表面修饰Poly(A),获得Poly(A)/SiNPs颗粒,通过A碱基-甲氧檗因-A碱基结合方式构建了甲氧檗因载药体系.采用琼脂糖凝胶电泳、透射电子显微镜以及荧光光谱等方法对载药体系进行了表征,考察了载药体系的稳定性和在不同pH缓冲液中的释放情况,并采用激光共聚焦成像技术和MTT方法分别考察了该体系在Hela细胞内的定位以及杀伤效果.结果表明:Poly(A)被成功修饰在二氧化硅纳米颗粒上后能很好地与甲氧檗因结合,构建甲氧檗因载药体系,该体系在中性条件具有较好的稳定性,而在酸性条件下(pH<6),由于甲氧檗因与A碱基的结合力减弱而被释放出来,实现pH的控制释放.细胞成像结果显示,该载药体系能被细胞内吞并聚集于溶酶体内,通过利用溶酶体的酸性环境释放药物,实现了对肿瘤细胞的杀伤.该体系较好地实现了甲氧檗因抗肿瘤药物的装载和释放,为发展这一类抗肿瘤药物的载体提供了新方法.; 何晓晓陈素叶陈冕王柯敏邹振王玉双杨淑娜

基于甘露糖功能化的水凝胶用于E.coli O157：H7的检测被引量：3: 2012年; 利用伴刀豆球蛋白A(Con A)的多价结合能力,结合水凝胶技术与核酸染色技术发展了一种基于甘露糖功能化的水凝胶检测大肠杆菌(E.coli)O157∶H7的方法.以过硫酸铵(APS)为催化剂,四甲基乙二胺(TEMED)为加速剂,用丙烯酰胺(AAm)、N,N-二甲基双丙烯酰胺和N-丙烯酰氧琥珀酰亚胺(NAS)合成水凝胶,通过氨基化甘露糖与NAS发生交联反应,制备了甘露糖功能化的水凝胶.当甘露糖功能化的水凝胶加入与Con A共孵育后的菌悬液中时,由于Con A既能与甘露糖特异性结合,又能与E.coli O157∶H7表面的O-抗原发生免疫反应而紧密连接,使目标菌被捕获到水凝胶表面,采用核酸染料SYBR GreenⅠ对捕获细菌进行染色,实现了对E.coli O157∶H7的核酸标记,最后通过活体荧光成像系统对水凝胶进行荧光成像,从而实现对待测样品的检测.研究结果表明,该方法可应用于缓冲液体系和混合细菌样品中E.coli O157∶H7的特异性检测,且整个检测步骤包括样品预处理可在2 h内完成.该方法成本低、易操作,且具有较好的灵敏度,可检出3.7×101Cells/mL的目标细菌样品.; 周丽霞何定庚何晓晓卿志和王柯敏曹杰; 关键词：水凝胶 SYBR 大肠杆菌O157:H7

基于MCM-41负载联吡啶钌的电致化学发光传感器被引量：2: 2012年; 利用静电吸附作用将联吡啶钌[Ru(bpy)23+]负载到巯基化MCM-41介孔二氧化硅纳米颗粒上,通过金-巯键修饰法将负载后的MCM-41固定在金电极表面,发展了一种基于MCM-41负载联吡啶钌的电致化学发光传感器,并研究了其电化学及电致化学发光行为.基于三聚氰胺与增敏剂三正丙胺氨基结构的相似性,将负载Ru(bpy)23+的MCM-41电致化学发光传感器用于三聚氰胺的检测,获得了良好的检测效果,为检测三聚氰胺提供了一种快速、简便的方法.同时,该研究为Ru(bpy)23+在电极表面的固定化提供了新思路.; 王永红何晓晓王柯敏苏婧陈智峰晏根平; 关键词：电致化学发光联吡啶钌三聚氰胺

pH响应的介孔二氧化硅纳米颗粒的制备及可控释放被引量：9: 2012年; 选择带负电荷且溶解度和分子结构对pH值非常敏感的聚丙烯酸作为封堵分子,采用静电吸附的修饰方法,制备了pH响应的MCM-41型介孔二氧化硅纳米颗粒.利用高倍透射电子显微镜(TEM)、X射线衍射(XRD)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)及比表面积分析等手段表征了介孔二氧化硅纳米颗粒的物理化学性质.以联钌吡啶染料分子作为模式客体分子,研究了pH调控下的模式客体分子在介孔二氧化硅纳米颗粒中的包裹及释放行为.结果表明,该介孔二氧化硅纳米颗粒对pH具有很好的响应性;在近中性条件下,带正电的二氧化硅纳米颗粒通过静电吸附作用吸附带负电的聚丙烯酸,导致介孔封堵,使包载的染料分子几乎无释放;客体分子的释放率随着pH值的降低而升高,当pH≤5时,染料分子显著释放,pH=1时客体分子的释放率高达98%,可以实现对包载客体分子的控制释放.该pH响应的介孔二氧化硅纳米颗粒载体具有制备简便、价格低廉和包载量大等优点,有望应用于药物的控制释放.; 曹杰何定庚何晓晓王柯敏赵应香; 关键词：聚丙烯酸

基于氧化石墨烯的DNA聚合酶检测新方法: 2011年; DNA聚合酶由于在DNA复制、损伤修复、细胞周期调控和肿瘤发生发展等生命过程中的重要作用，已成为肿瘤等多种疾病药物研发的重要靶标之一，其活性检测对肿瘤等疾病的诊断和治疗疗效考察具有重大价值。; 徐凤州徐凤州石慧王柯敏; 关键词：氧化石墨烯 DNA聚合酶

基于二氧化硅荧光纳米颗粒与核酸染料SYBR Green Ⅰ的双色显微成像技术用于E.coli O157∶H7的检测被引量：2: 2011年; 将免疫荧光纳米标记技术与激光共聚焦显微成像方法相结合,发展了一种基于二氧化硅荧光纳米颗粒和核酸染料SYBR Green Ⅰ的双色显微成像技术用于大肠杆菌O157∶H7的检测.采用联吡啶钌(RuBpy)二氧化硅荧光纳米颗粒对羊抗大肠杆菌O157∶H7抗体进行修饰,基于抗体-抗原相互作用实现了其对目标大肠杆菌O157∶H7的特异性标记;同时以核酸染料SYBR GreenⅠ对细菌进行染色,将细菌和纳米颗粒团聚体区分开,实现了对大肠杆菌O157∶H7的双色标记,并通过激光共聚焦显微镜进行免分离的荧光成像检测.结果表明,该方法可用于缓冲溶液体系和混合细菌样品中目标大肠杆菌O157∶H7的特异性检测,在仅含5%目标菌的混合样品中仍能观察到具有明显黄色荧光的大肠杆菌O157∶H7,且整个检测步骤包括样品预处理可在3 h内完成.该方法则具有较好的灵敏度,可检出2.6×103 Cell/mL的目标细菌样品.若采用针对其它病原菌细胞壁抗原的特异性抗体,则有望发展成为一种通用技术用于多种病原菌的快速和灵敏检测.; 周丽霞何定庚何晓晓石慧王柯敏曹杰

基于金纳米颗粒信号放大效应电化学检测DNA聚合酶被引量：2: 2012年; 基于金纳米颗粒(AuNPs)比表面积大、尺寸小和能够承载大量DNA片段的特点,建立了一种免标记、简便、快速检测DNA聚合酶Klenow fragment exo-(KF-)的电化学方法.首先将巯基化的DNA引物片段修饰在金电极上,然后加入模板DNA链以及修饰有报告DNA链的金纳米颗粒(AuNPs-DNA),模板DNA链能同时与DNA引物片段和修饰在AuNPs上的报告DNA链进行互补杂交形成"三明治"结构,从而将AuNPs-DNA修饰在电极表面;当加入电活性物质钌铵(RuHex)后,RuHex可通过静电吸附作用结合在DNA上.AuNPs上修饰的报告DNA链能够吸附大量RuHex,导致电化学信号放大.当加入脱氧核糖核苷三磷酸(dNTPs)以及KF-聚合酶后,引物片段发生延伸反应,将与模板DNA链杂交的AuNPs-DNA竞争下来,带走大量的RuHex,使电信号降低,从而实现对聚合酶的检测.实验结果表明,利用该方法可以检测到5 U/mL的KF-.; 刘金权倪小祺何晓晓王永红王柯敏陈智峰苏婧晏根平; 关键词：DNA聚合酶金纳米颗粒信号放大

不同尺寸二氧化硅纳米颗粒体内分布与代谢研究被引量：5: 2013年; 基于二氧化硅荧光纳米颗粒(FSiNP)的荧光信号同步指示功能,通过实时、原位活体荧光成像技术,并结合离体器官成像、组织切片成像以及尿液荧光成像等方法,系统地研究了不同尺寸二氧化硅荧光纳米颗粒在裸鼠活体内的分布与代谢.活体成像结果表明纳米颗粒尺寸越小,血液循环时间越长,全身分布情况越明显,随着时间的延长纳米颗粒逐渐聚集到肝脏、膀胱等部位;通过离体器官成像和组织切片成像进一步证实了活体成像所观察到的结果.同时,肾脏组织切片以及尿液成像结果显示,颗粒越小越容易通过泌尿系统排出体外.研究结果为今后开展不同尺寸纳米颗粒材料在活体内的应用研究打下基础.; 陈冕何晓晓石碧华王柯敏陈素叶周冰; 关键词：活体成像代谢

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湖南省自然科学基金(10JJ7002)

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