浙江省科技计划项目(2005C33008)
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
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- 相关机构：杭州市第一人民医院浙江大学医学院附属第一医院浙江大学医学院附属第二医院更多>>
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- 融合表达IL-18BP和IL-4的重组腺病毒治疗对胶原诱导型关节炎小鼠血清IL-18表达的作用
- 2011年
- 目的:构建小鼠IL-18BP和IL-4融合表达的重组腺病毒载体(Ad mIL-18BP/mIL-4),对胶原诱导型关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)小鼠进行局部关节基因治疗,观察小鼠血清IL-18表达水平。方法:采用雄性DBA-1/BOM小鼠,建立胶原诱导关节炎的小鼠模型。将融合表达小鼠IL-18BP和IL-4的重组腺病毒载体进行局部关节腔内注射后1、2、4周,采用酶链免疫吸附检测方法(ELISA),检测血清IL-18水平。同时设AdLacZ病毒对照组和PBS组织对照组。结果:CIA小鼠关节腔注射AdmIL-18BP/mIL-4后第1、2、4周,AdmIL-18BP/mIL-4治疗组的血清IL-18平均浓度分别为(36.5±5.4)ng/L、(32.5±3.2)ng/L、(28.7±2.9)ng/L,明显低于相应时间点AdLacZ对照组[(66.2±5.1)ng/L、(69.2±4.2)ng/L、(77.7±3.9)ng/L]和PBS对照组的水平[(67.3±7.1)ng/L、(71.9±1.8)ng/L、(78.7±4.1)ng/L],P均<0.01。但治疗组血清IL-18平均水平在不同时间点无显著性差别。结论:融合表达小鼠IL-18BP和IL-4的重组腺病毒基因治疗,能明显持续下调血清IL-18的表达水平,提示细胞因子基因治疗,可望为类风湿关节炎(RA)提供新的治疗策略。
- 冷建杭姚航平沈俊娅王克义汪子伟卓广超
- 关键词：关节炎
- 他克莫司对类风湿关节炎关节滑膜液淋巴细胞协同刺激分子的作用被引量：4
- 2007年
- 目的研究他克莫司对类风湿关节炎（RA）患者关节滑膜液淋巴细胞协同刺激分子的作用．并初步探讨其免疫抑制的机制。方法分离培养RA关节滑膜液淋巴细胞，经100nmol/L的他克莫司处理后．用流式细胞仪检测T淋巴细胞协同刺激分子CD28、CD154（CD40L）和B淋巴细胞协同刺激分子CD80、CD86、CD40的表达。同时检测T、B淋巴细胞活化标志CD69、CD25、HLA—DR和CD71的表达．用酶联免疫吸附法（ELISA）检测淋巴细胞培养上清Th1细胞分泌的细胞因子白细胞介素（IL）-2、干扰素（IFN）-γ和Th2细胞分泌的细胞因子IL-6、IL-10的水平，并设不加他克莫司处理的为对照组。结果经他克莫司处理后。T淋巴细胞的CD154（CD40L）和B淋巴细胞的CD86表达阳性率低于对照组（P〈0．05），而T淋巴细胞的CD28和B淋巴细胞的CD80、CD40表达阳性率与对照组相比差异无统计学意义；T、B淋巴细胞的HLA—DR表达阳性率明显低于对照组（P〈0．01），而CD69、CD25、CD71表达阳性率与对照组相比差异无统计学意义；淋巴细胞培养上清Th1细胞分泌的细胞因子IL-2、IFN-γ和Th2细胞分泌的细胞因子IL-6、IL-10的水平与对照组相比均显著下降（P〈0．01）。结论他克莫司能明显抑制RA关节滑膜液淋巴细胞的活化，降低Th1细胞因子和Th2细胞因子的分泌水平，这种作用可能是通过下调淋巴细胞的协同刺激分子的表达而实现。
- 冷建杭朱华卓广超王克义汪子伟何荣新
- 关键词：关节炎类风湿滑膜液协同刺激分子他克莫司
- IL-18BP和IL-4共表达腺病毒基因对关节炎小鼠滑膜组织COX-2和iNOS表达的作用
- 2008年
- 目的本研究构建了共表达小鼠白细胞介素-18结合蛋白（IL-18BP）和IL-4的重组腺病毒载体（Ad mIL-18BP／mIL-4），将其用于胶原诱导型关节炎（CIA）小鼠局部关节基因治疗，以探讨对小鼠滑膜组织环氧化酶-2（COX一2）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）及其诱导产物前列腺素E2（PGE2）、一氧化氮（NO）表达水平的影响。方法采用雄性的DBA-1／BOM小鼠，建立CIA的小鼠模型，经共表达小鼠IL-18BP和IL-4的重组腺病毒载体局部关节基因治疗后，分别采用半定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法和Westem印迹法检测滑膜组织COX-2、iNOS mRNA的表达水平和蛋白表达水平，用竞争ELISA和硝酸酶还原法检测关节滑膜液PGE：和NO的含量．并设AdLacZ组和磷酸盐缓冲液（PBS）组分别为病毒对照组和组织对照组。结果AdmIL-18BP／mIL-4治疗组滑膜组织COX-2、iNOS mRNA表达水平明显低于AdLacZ对照组（0．15vs0．42，P〈0．01；0．05vs0．77，P〈0．01）和PBS对照组（0．15vs0．65，P〈0．01；0．05vs0．64，P〈0．01）；AdmIL～18BP/mIL-4治疗组滑膜组织COX-2、iNOS的蛋白表达水平明显低于AdLacZ对照组（0．08vs0．92，P〈0.01；0．11vs1．00，P〈0.01）及PBS对照组（0．08vs0．77，P〈0．01；0．11vs0．84，P〈0．01）；AdmIL-18BP/mIL-4治疗组关节滑膜液中PGE，及NO水平明显低于AdLacZ对照组[（0．68±0．06）vs（2．58±0．21）ng／ml，P〈0.01；（23．4±2．5）vs（60．0±11．3）μmol/L，P〈0.01）和PBS对照组[（0．68±0．06）vs（2．57±0．20）ng／mL，P〈0．01；（23．4±2．5）vs（60．3±13．4）μmol／L，P〈0．01]。结论共表达小鼠IL-18BP和IL-4的重组腺病毒基因治疗能明显下调COX-2和iNOS的表达水平，减少其诱导产物PGE2、NO的合成，这将为RA的基因治疗提供新的治疗策略。
- 卢忠冷建杭姚航平沈後娅王克义汪子伟卓广超
- 关键词：细胞因子类关节炎环氧化酶-2
- 类风湿关节炎基因治疗的研究进展被引量：3
- 2008年
- 类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是累及多关节、多系统的慢性自身免疫性疾病,在自身免疫性结缔组织病中患病率居首位。疾病可发展为关节僵直、畸形、致残而严重影响劳动力。RA的传统药物治疗多起效慢,长期使用副作用大,近年来兴起的生物治疗广泛应用于临床,但生物制剂昂贵、副作用大、需要反复注射且无靶器官特异性,而基因治疗则避免了这些缺点,选择性高,可以从分子水平针对发病机制进行治疗,为RA的治疗开辟了新领域。
- 沈俊娅盛文彬冷建杭
- 关键词：类风湿关节炎基因治疗
