农业部园艺作物遗传改良重点开放实验室项目
- 作品数：102 被引量：1,185H指数：21
- 相关作者：方智远杨丽梅刘玉梅庄木张扬勇更多>>
- 相关机构：中国农业科学院蔬菜花卉研究所中国农业大学青岛农业大学更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学理学更多>>
- 中国50个甘蓝代表品种EST-SSR指纹图谱的构建被引量：48
- 2014年
- 【目的】研究甘蓝DNA指纹鉴定方法,并构建50份中国甘蓝代表品种DNA指纹数据库,为甘蓝品种特异性、真实性、纯度鉴定提供参考依据。【方法】首先,利用6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术和来源不同的甘蓝材料对已开发的甘蓝EST-SSR引物进行筛选,获得多态性引物;然后将可用于甘蓝DNA指纹鉴定的核心引物正义链5′末端分别标记TAMRA、HEX、ROX、6-FAM四种荧光,利用DNA分析仪检测不同等位变异的扩增片段大小,并确定每个等位变异的标准品种。利用核心引物扩增结合标准品种的片段大小,构建中国50个甘蓝代表品种的SSR指纹数据库。通过人工构建模拟群体对‘中甘21’品种真实性进行鉴定,进而对该指纹鉴定技术进行验证。【结果】利用6份来自中国不同生态条件、植物学性状差异较大的甘蓝品种对978对EST-SSR引物进行初步筛选,获得带型清晰、具有多态性的引物128对。进一步根据引物扩增带型清晰、多态性信息指数较高、不同等位变异的带型易于区分、在染色体上分布均匀原则,筛选出20对核心引物。该套引物可以检测甘蓝染色体20个位点的58个等位变异,平均每条染色体上被检测位点2.22个,平均每个位点包含2.9个等位变异,其中引物BoE607、BoE723等位变异数最多为5个,PIC值处于0.34—0.76之间。通过DNA分析仪检测显示等位变异扩增片段长度范围143—296 bp。利用20对核心引物构建50份中国甘蓝代表品种DNA指纹数据库,并阐述了甘蓝SSR-DNA指纹鉴定的应用和技术流程。本研究还对来自甘蓝主产区的31份‘中甘21’品种进行真实性鉴定,结果显示指纹鉴定与田间鉴结果完全一致。【结论】筛选获得20对核心引物,用于构建中国50个甘蓝代表品种DNA指纹数据库,通过构建人工模拟群体对‘中甘21’品种的真实性进行鉴定,准确率达100%。
- 王庆彪张扬勇庄木杨丽梅刘玉梅吕红豪方智远
- 关键词：甘蓝SSR标记指纹图谱
- 番茄黄化卷叶病毒病(TYLCV)的研究进展被引量：39
- 2009年
- 综述了国内外番茄黄化卷叶病毒病的研究现状,包括TYLCV的发病症状与鉴定、病毒的发生与流行及病原物的生物学特征、抗病遗传资源、抗病基因分子标记和抗病育种等方面的研究进展。
- 国艳梅杜永臣王孝宣高建昌
- 关键词：番茄抗病育种
- 两种甘蓝Ogura细胞质雄性不育源的分子鉴别被引量：4
- 2011年
- 【目的】比较两种可实用的甘蓝Ogura细胞质雄性不育源(CMSHY和CMSR3)在细胞质DNA水平上的区别,以快速、准确鉴别两种不育源。【方法】利用开发的叶绿体SSR(cpSSR)和线粒体SSR(mtSSR)引物,结合聚丙烯酰胺凝胶电泳和测序技术,获得在两种不育源间的分子差异,并对其中有限制性内切酶的位点转化成CAPS标记。【结果】无法在聚丙烯酰胺凝胶电泳上发现32对cpSSR扩增产物的差异,经测序仅发现ACP9引物上SSR重复数的差异。在21对mtSSR引物中,仅mtSSR2引物可以在聚丙烯酰胺凝胶电泳上区分这两种不育源。经测序发现其余5对mtSSR引物上存在9个多态性差异,其中3个为SSR位点的差异。对其中2个可被限制性内切酶MseⅠ酶切的多态性位点转化成CAPS标记,分别命名为m92-143 MseⅠ、m1-346 MseⅠ。这些标记均可以用于这两种Ogura细胞质雄性不育源的区分。【结论】利用获得的cpSSR和mtSSR标记,成功区分甘蓝Ogura细胞质雄性不育源CMSHY和CMSR3。CAPS标记可快速、简便、准确地区分两种不育源。
- 张扬勇方智远王庆彪刘玉梅杨丽梅庄木孙培田
- 关键词：甘蓝分子鉴定CAPS标记
- 大白菜细胞核隐性雄性不育系恢复基因BrMf2的标记及定位被引量：7
- 2010年
- 【目的】筛选大白菜细胞核隐性雄性不育(RGMS)育性基因(Mf)的连锁标记,通过定位该基因,为克隆雄性不育基因打下基础。【方法】939A不育系与YQD56A杂交F1S4后代为试材,利用混合分组分析法(BSA),应用SRAP和SRAP-AFLP标记技术筛选引物1256对。【结果】获得与大白菜细胞核隐性雄性不育恢复基因连锁的标记2个,PM8K4和Me2M49,与恢复基因的遗传距离分别为2.98cM和10.92cM。通过调查PM8K4标记在大白菜DH作图群体中的多态性,将该基因定位在A8连锁群,即大白菜第9染色体。【结论】标记PM8K4可以在苗期对大白菜细胞核雄性不育性状进行标记辅助选择。
- 张慧张淑江武剑李菲章时蕃王晓武张新梅孙日飞
- 关键词：大白菜基因定位分子标记SRAP
- 青花菜相同亲本的DH与F_2群体遗传多样性的比较被引量：6
- 2012年
- 以表型差异明显的两个青花菜(Brassica oleracea var.italica)高代自交系为材料杂交获得F1,通过游离小孢子培养技术和人工自交方法,分别构建了由176个DH系组成的DH群体和由176个单株组成的F2群体。采用性状分离分析和群体遗传多样性分析方法,对两个群体13个主要农艺性状的平均值、变异系数及性状分离区间等遗传表现进行分析。结果表明:13个主要农艺性状均是受多基因控制的数量性状,在DH群体和F2群体中均发现了正向和负向两个方向的超亲基因型,两群体的平均变异系数和遗传多样性指数相近。可见,通过DH技术育种不仅可以加快亲本的纯化进程,而且可获得广泛分离的育种资源,从而提高育种效率。
- 孙继峰刘玉梅方智远刘二艳袁素霞李占省杨丽梅庄木张扬勇孙培田
- 关键词：青花菜DH群体F2群体性状分离
- 转Bt基因早熟春甘蓝抗虫材料的获得被引量：5
- 2014年
- 采用农杆菌介导法，将BtcrylIa8抗虫基因转入早熟春甘蓝自交系F2011中，共获得37株卡那霉素抗性植株，其中23株经PCR检测呈阳性；Southernblot检测结果表明，crylIa8基因已成功整合到甘蓝基因组中；RT-PCR和Westernblot检测结果表明，crylIa8基因在RNA水平和蛋白质水平均得到表达；对转基因植株进行ELISA检测，其Bt毒蛋白含量在201．9～241．3ng·g^-1（FW）之间；离体饲虫试验结果表明，转基因植株对敏感小菜蛾和CrylAc抗性小菜蛾均具有较好的抗性，且Bt毒蛋白表达量越大，植株抗性越强。
- 王丽仪登霞杨丽梅刘建萍方智远程斐刘玉梅庄木张扬勇孙培田
- 关键词：抗虫性
- 化肥施用量对有机基质栽培番茄养分吸收利用的影响被引量：29
- 2011年
- 以番茄为试验材料,以蛭石︰羊粪=2:1为基质配方,研究了有机基质栽培条件下不同化肥施用量对番茄氮、磷和钾吸收利用规律的影响。结果表明:适量施用化肥可提高番茄产量,促进番茄对氮、磷、钾养分的吸收;氮、磷、钾的吸收量均随施肥量的增加而增加;基质中氮、钾的利用率均随施肥量的增加而降低,而磷的利用率则随化肥施用量的增加而增加;适量施用化肥还可明显促进基质迟效养分转化为速效养分。每形成1 000 kg番茄果实,植株需吸收氮2.540 kg、磷0.751 kg、钾4.347 kg。确定了在有机基质栽培下番茄较佳化肥施用量计算方法为:化肥施用量=(1.5倍番茄目标产量需肥量-有机基质中速效养分量)/化肥中养分吸收率。
- 李建勇高俊杰徐守国史修柱于贤昌
- 关键词：番茄有机基质氮磷钾速效养分
- 黄瓜核心种质低温耐受性的田间评价被引量：8
- 2012年
- 在自然低温条件下,利用幼苗存活率、冷害指数、叶片数、株高及叶绿素含量5个指标对303份黄瓜核心种质进行了低温耐受性评价,结果表明:5个指标基本符合正态分布的特点,幼苗存活率和冷害指数均有明显向低值和高值区域偏离的趋势。相关分析结果显示冷害指数与幼苗存活率、叶片数、株高及叶绿素含量4个指标呈极显著负相关。通过隶属度函数综合评价群体的低温耐受性,共筛选获得28份耐低温种质,为黄瓜耐低温的品种选育及进一步深入挖掘低温耐受性相关基因奠定了基础。
- 程嘉琪沈镝李锡香王海平邱杨宋江萍
- 关键词：黄瓜核心种质冷害指数田间评价
- 栽培黄瓜种质遗传多样性的SSR鉴定被引量：26
- 2008年
- 利用62对多态性SSR引物对59份黄瓜材料进行了遗传多样性分析。聚类分析结果将供试材料分为7大类群,第1类包含6个欧洲温室型材料,全为无刺瘤类型;第2类是4个美国类型种质,属于小果型材料;西双版纳黄瓜D59单独聚为第3类,且与其他材料的遗传距离均大于0.33;疑为华南型种质的D38,单独聚为第4类,其果实为乳白色;第5类包括D13及其父本D39,两者含有欧洲和华北血缘;第6类为叶色突变材料D28,是欧洲型和华北型黄瓜的后代;第7类包括33个华北型材料、7个华南型材料和4个日本型材料。主成分分析与系统聚类分析结果基本一致。两种分析方法的分类结果与形态学分类相吻合。
- 穆生奇顾兴芳张圣平王晓武王烨
- 关键词：黄瓜SSR主成分分析
- 甘蓝叶色黄化突变体YL-1的光合生理特性及其叶绿体的超微结构被引量：18
- 2014年
- 以甘蓝叶色黄化突变体‘YL-1’及其叶色正常近等基因系‘WT708’为试材,对比发现:‘YL-1’从子叶期开始表现出叶色黄化现象,并一直持续整个生活周期,叶片小,植株矮小,可以结球,但生长势和叶球显著小于‘WT708’,单球质量只有‘WT708’的39.0%;光合色素含量显著降低;叶绿体数较少,叶绿体内部基粒数少,基粒片层垛叠数少,基粒排列不整齐;‘YL-1’的Fo、Fm、Fv/Fm、Fo′、Fv′/Fm′、ФPSⅡ、QP、QN和ETR均显著低于‘WT708’,说明光合色素含量的降低导致了PSⅡ反应中心捕光能力和光化学转化效率的降低。随着温度的降低,‘YL-1’与‘WT708’之间的光合色素含量差异逐渐加大。
- 杨冲张扬勇方智远刘玉梅杨丽梅庄木孙培田
- 关键词：黄化突变体光合色素含量超微结构叶绿素荧光参数
