重庆市卫生局科研项目(04-1-005)
- 作品数：3 被引量：17H指数：3
- 相关作者：刘恩梅谢晓虹王莉佳杨锡强罗嘉慧更多>>
- 相关机构：重庆医科大学香港大学更多>>
- 发文基金：重庆市卫生局科研项目教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠呼吸道合胞病毒感染肺TLR4表达与气道高反应性被引量：4
- 2006年
- 目的:研究小鼠呼吸道合胞病毒(RSV)感染对肺TLR4表达与气道高反应性的影响。方法:生后6周16只清洁级BALB/c小鼠被同等分成RSV感染组和对照组,感染后1周两组经吸入相同递增浓度乙酰甲胆碱检测气道高反应性,使用RT-PCR方法测定肺组织TLR4mRNA表达,并对二者的相关性进行了分析。结果:在吸入乙酰甲胆碱浓度为3.2g/L时两组气道阻力差异有显著性(P<0.01)。TLR4/β-actin的值分别为对照组0.239±0.055,RSV感染组0.361±0.102,两组间有显著性差异(P<0.05);TLR4 mRNA表达与吸入3.2g/L乙酰甲胆碱时的气道反应性呈正相关,相关系数为0.721(P<0.05)。结论:小鼠RSV感染后肺TLR4表达增强并呈气道高反应性,二者之间有显著正相关。
- 李睿刘恩梅杨锡强王莉佳
- 关键词：呼吸道合胞病毒气道高反应性
- 呼吸道合胞病毒感染后气道上皮细胞Toll样受体4的表达及其功能被引量：8
- 2008年
- 目的观察呼吸道合胞病毒（RSV）感染后气道上皮细胞Toll样受体4（TLR4）表达变化及其信号通路的功能，探讨RSV诱导气道炎症的机制。方法体外培养人气管上皮细胞株9HTEo，以RSV感染复数为10感染上皮细胞，用半定量逆转录PCR（RT-PCR）检测TLR1-10 mRNA表达；用定量PCR检测TLR4 mRNA表达的动态变化；用流式细胞术检测TLR4蛋白表达及与细胞凋亡的关系；感染后再用TLR4激动剂脂多糖（LPS）刺激细胞，用酶联免疫法（ELISA）检测上清液中白细胞介素-8（IL-8）含量以观察病毒诱导表达的膜TLR4蛋白功能。RT-PCR和流式细胞术实验分为正常组和RSV感染组，用GraphPad 4．0统计软件进行配对t检验；实时定量PCR实验分为正常组、RSV感染组和紫外线灭活RSV感染组，采用Kruskal-Wallis检验分析；ELISA实验分为正常组、RSV感染组、单独LPS刺激组和RSV-LPS共刺激组，采用One-way ANOVA检验分析。结果（1）RSV感染组TLR2～10 mRNA表达均上调（t值为3．49～14．47，P均〈0．05），以TLR2和TLR6变化最为显著；定量PCR结果提示：感染组TLR4 mRNA 3h后开始增高（Kruskal-Wallis检测值=8．82，P〈0．05，n=6），紫外灭活RSV组TLR4 mRNA表达无明显变化；（2）流式细胞术结果表明：RSV感染组膜上TLR4表达比正常组增高（平均荧光强度：1．27±0．48，0．97±0．25，t=2．39，P〉0．05，n=10），感染组胞内TLR4表达比正常组降低（平均荧光强度：3．08±1．38，3．36±1．31；t=2．92，P〉0．05，n=10），感染组膜TLR4阳性细胞中（93．32±1．7）％为膜黏连蛋白-5阳性细胞；（3）RSV-LPS共刺激组培养上清液中IL-8含量明显高于单纯LPS刺激组（F=59．29，P〈0．01，n=3）。结论RSV感染后，上皮细胞TLR4 mRNA和蛋白表达水平上调，与TLR4信号通路相关的IL-8分泌增加；TLR4与上皮细胞凋亡的关系提示TLR4及其信号通路可能参与了RSV诱导的上皮细胞急
- 谢晓虹刘恩梅杨锡强罗嘉慧李欣王莉佳刘伟徐文飞
- 关键词：TOLL样受体4呼吸道合胞病毒气道炎症发病机制
- TLR4基因3’非翻译区11367位点多态性与婴幼儿喘息性疾病的研究被引量：5
- 2009年
- 目的检测TLR4基因3’非翻译区(3’UTR)11367位点的多态性,探讨该多态性与喘息性疾病的易感性、气道分泌物的细胞因子水平、病原学以及临床表型的关系。方法采用单管双向等位基因特异性扩增技术检测TLR4基因3’UTR11367位点的基因多态性。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测喘息组患儿气道分泌物中细胞因子的水平。采用免疫荧光法进行呼吸道合胞病毒检测。结果TLR4G11367C位点核苷酸存在G/C二态性,表现为GG纯合、GC杂合两种基因型。喘息组和对照组该位点基因型、等位基因分布频率之间均存在显著性差异(P均为0.002)。GG型患儿IL-8水平、病原菌感染阳性率均明显高于GC型。不同基因型的临床表型无显著性差异。结论TLR4基因3’UTR基因多态性与喘息性疾病易感性相关,且与气道分泌物中IL-8水平、机体对RSV易感性、气道细菌定植有关。
- 赵静刘恩梅邓昱谢晓虹陈杰华
- 关键词：IL-8基因多态性喘息呼吸道合胞病毒感染
