广东省科技计划工业攻关项目(2003A3020106)
- 作品数：5 被引量：40H指数：3
- 相关作者：张成冯善伟姚晓黎刘祖国邓宇斌更多>>
- 相关机构：中山大学附属第一医院中山大学更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金卫生部临床学科重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 成人骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的逆转化现象被引量：12
- 2005年
- 目的研究成人骨髓间充质干细胞(hMSC)分化为神经元样细胞后的逆转化现象。方法从成人骨髓分离、培养和扩增hMSC。用参芪液诱导hMSC分化为神经元样细胞,并用免疫组化方法鉴定神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。采用RT-PCR方法检测10个基因(内胚层基因ceruloplasmin;中胚层基因SM22;外胚层基因Amyloidprecursorprotein、syntaxin;生殖系基因protamine;神经元特异性基因NeuroD、NF、NSE、GFAP、Tau)在诱导分化为神经元样细胞的动态变化以及逆转化细胞的基因表达变化。结果hMSC经参芪液诱导后,可见神经元样细胞。免疫组化显示诱导出的神经元样细胞表达NSE、NF阳性,GFAP阴性。去除参芪液,观察到神经元样细胞又恢复为hMSC的外形,呈现宽大扁平或长梭形。基因检测显示逆转化的细胞基因表达与未分化hMSC相似。结论参芪液可以促进hMSC分化为神经元样细胞,诱导分化过程可以出现逆转化现象。
- 姚晓黎张成冯善伟冯慧宇刘祖国邓宇斌
- 关键词：间质干细胞神经元
- 成人骨髓间质干细胞诱导分化为神经元样细胞及其与细胞分裂的关系
- 2005年
- 目的探讨成人骨髓间质干细胞(hMSC)向神经元样细胞分化过程中分化与细胞分裂的关系。方法从成人骨髓中分离骨髓间质干细胞(MSC),培养扩增。用参芪液诱导MSC分化为神经元样细胞,经免疫组化鉴定其神经元烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。诱导后进行神经元样细胞计数,掺入Brdu测定,计算标记系数。采用双标记间接免疫荧光法检测神经元样细胞特异性表面标记(NSE、NF)与细胞分裂的标记Brdu的关系。抑制DNA合成,计算Brdu、NSE和NF阳性细胞数。结果MSC经参芪液诱导后,可见神经元样细胞。免疫组化显示诱导出的神经元样细胞NSE、NF阳性,GFAP阴性。MSC诱导分化后的细胞总数增加,诱导分化后12h内细胞增殖较快。30%以上分化的神经元样细胞在表达NSE和NF的同时可见Brdu标记,而另一部分分化的神经元则无Brdu标记。抑制DNA合成,并不会阻止神经元的分化,仍有70%的分化神经元表达神经元特异性标记蛋白NSE。结论MSC诱导分化的部分神经元样细胞可进行细胞分裂,但抑制细胞分裂不影响神经元分化。
- 姚晓黎张成卢锡林陈松林冯善伟李群
- 关键词：骨髓间质干细胞神经元细胞分裂
- 成人骨髓间质干细胞在脑梗塞模型鼠的迁移和分化被引量：9
- 2005年
- 目的:探讨成人骨髓间质干细胞(humanmesenchymalstemcells,hMSC)在脑梗塞模型鼠脑内的迁移和分化,是否影响模型大鼠的运动功能。方法:体外扩增培养hMSC,建立左大脑中动脉梗塞模型(MACO)大鼠,将标记Hoeschst33342的hMSC,经参芪液诱导30min后注入模型鼠脑内,观察hMSC在大鼠脑内的存活、迁移、分化,以及能否改善模型鼠运动功能。结果:第5代呈集落生长的hMSC,均一性好。hMSC可在脑内存活6周以上;随着时间的延长,hMSC在脑内迁移的范围越来越大;间接免疫荧光表明hMSC在大鼠脑内表达人神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP);模型鼠的肢体运动功能有明显改善。结论:hMSC可在大鼠脑内分化为神经细胞,有望成为治疗脑梗塞的理想的种子细胞。
- 姚晓黎张成卢锡林冯善伟邓宇斌刘祖国
- 关键词：骨髓间质干细胞脑梗塞细胞分化细胞运动
- 参芪扶正注射液诱导成人间质干细胞治疗脑梗塞的实验研究被引量：18
- 2005年
- 目的观察参芪扶正注射液(简称参芪液)诱导成人间质干细胞(hMSCs)在脑梗塞大鼠脑内的分化及其对模型大鼠神经功能的影响。方法建立左大脑中动脉梗塞模型大鼠,将在体外扩增的hMSCs经参芪液诱导0.5h后注入模型大鼠脑内,观察hMSCs在大鼠脑内的存活、分化及对模型大鼠神经功能的改变。结果hMSCs移植排斥反应低,可在大鼠脑内存活6周以上;移植前后脑梗塞面积无明显变化;免疫组化表明hMSCs在大鼠脑内表达人神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP);模型大鼠的肢体运动功能和触觉功能均有改善。结论参芪液可诱导hMSCs在体内分化为神经元,hMSCs有可能成为治疗脑梗塞的理想的种子细胞。
- 姚晓黎张成卢锡林冯善伟邓宇斌刘祖国
- 关键词：参芪扶正注射液间质干细胞脑梗塞
- 成人骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞前后基因表达的研究被引量：2
- 2005年
- 目的探讨成人骨髓间质干细胞(MSC)分化为神经元样细胞前后基因表达的变化。方法从成人骨髓分离MSC,培养扩增。用参芪液诱导hMSC分化为神经元,并用免疫组化法检测神经元烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达来鉴定是否为神经元样细胞。采用半定量RTPCR方法检测10个基因(包括内胚层基因Ceruloplasmin;中胚层基因SM22;外胚层基因Amyloidprecursorprotein、syntaxin;生殖系基因protamine;神经元特异性基因NeuroD、NF、NSE、GFAP、Tau)在诱导分化前后的变化。结果hMSC经参芪液诱导后,可见神经元样细胞。免疫组化结果显示诱导出的神经元样细胞表达NSE、NF阳性,GFAP阴性。hMSC在分化前表达内胚层、中胚层、外胚层和生殖系基因,随着分化时间的延长,生殖系基因不表达,内胚层和中胚层基因表达减弱,外胚层基因表达基本不变。而在分化过程中外胚层基因和神经元特异性标记基因表达明显增强。结论hMSC分化为神经元样细胞的过程并不是简单的神经特异性基因的“开”和“关”,而是与神经细胞分化成熟过程中相关基因表达的量相关。
- 姚晓黎张成冯善伟卢锡林刘祖国邓宇斌
- 关键词：神经元样细胞间质干细胞分化成人骨髓间质干细胞PROTAMINE神经元烯醇化酶NEUROD
