国家自然科学基金(81260238)
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 相关作者：李春明张颖鹏刘志刚刘藕根张淑兰更多>>
- 相关机构：南昌大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江西省自然科学基金江西省卫生厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 色素上皮衍生因子在A431细胞的表达及对其增殖的影响被引量：1
- 2013年
- 目的明确色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)在A431细胞的表达情况以及对其增殖影响。方法采用RT-PCR和Western-blot分别检测A431细胞PEDF mRNA和蛋白的表达;MTT方法检测PEDF对A431细胞增殖的影响。结果A431细胞在mRNA和蛋白水平均可检测到PEDF的表达。此外,100ng/ml的PEDF可以抑制A431细胞的增殖。结论PEDF抑制A431细胞增殖,有望用于皮肤鳞癌的治疗。
- 李春明张颖鹏刘志刚
- 关键词：色素上皮衍生因子A431细胞细胞增殖
- pEGFP-N1-PEDF重组质粒的构建和鉴定
- 2013年
- 目的构建pEGFP-N1-PEDF真核表达质粒,并进行鉴定。方法利用RT-PCR方法从组织中提取PEDF的基因片段,与pMD18-T载体连接,构建pMD18-T-PEDF重组质粒,酶切后与pEGFP-N1真核表达载体连接,构建pEGFP-N1-PEDF真核表达质粒,进行测序、酶切鉴定,表明质粒构建成功。结果本实验成功构建了pEGFP-N1-PEDF真核表达质粒。结论为进一步研究利用PEDF基因治疗皮肤肿瘤提供实验基础。
- 李春明张颖鹏刘志刚谭艳平
- 关键词：PEDF基因
- 色素上皮衍生因子及受体在皮脂腺SZ95细胞的表达
- 2018年
- 目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)及受体在皮脂腺细胞系SZ95细胞的表达。方法采用RT-PCR法检测SZ95细胞中PEDF及受体的mRNA表达,蛋白免疫印迹法检测PEDF及受体蛋白的表达,同时免疫荧光法定位其在SZ95细胞中的表达情况。使用不同浓度双氢睾酮(DHT)作为刺激因子作用于SZ95细胞,实时定量PCR (qPCR)和免疫印迹法检测PEDF mRNA和蛋白水平变化。结果 RT-PCR发现PEDF及受体在SZ95细胞中均有表达,蛋白免疫印迹发现PEDF及受体蛋白质相对分子质量分别为50KD和55KD。PEDF主要表达在细胞浆内,PEDF受体主要表达在胞膜上。10μmol/L和100μmol/L DHT作用48h后,SZ95细胞PEDF mRNA和蛋白水平明显降低。结论在mRNA及蛋白质水平,SZ95细胞均表达PEDF及受体,雄激素可降低SZ95细胞PEDF表达。
- 李春明刘藕根彭亚婷张淑兰张颖鹏刘志刚
- 关键词：色素上皮衍生因子
- 抑制皮肤鳞癌细胞增殖的PEDF短肽筛选及其透皮性分析
- 2018年
- 目的筛选抑制皮肤鳞癌细胞增殖的6~7氨基酸(aa)的色素上皮衍生因子(PEDF)短肽,并检测其透皮性。方法将PEDF长肽(301~418 aa)分成6段,人工合成相对应的6条18~20 aa短肽,记为P1~P6,采用CCK-8法筛选出可抑制皮肤鳞癌SCL-1细胞增殖的18~20 aa短肽(短肽浓度均为100 ng/mL)。将上述筛选出的18~20 aa短肽均分成3段,人工合成与其对应的6~7 aa短肽,参照上法筛选出可抑制皮肤鳞癌SCL-1细胞增殖的6~7 aa短肽(短肽浓度均为100 ng/mL)。生物素标记筛选出的6~7 aa短肽,将其外涂于裸鼠的局部皮肤,2 h后分离局部皮肤组织,采用免疫荧光法观察其皮肤渗透性。结果 18~20 aa短肽P1、P2均可抑制皮肤鳞癌SCL-1细胞增殖(P均<0.05),P3~P6对皮肤鳞癌SCL-1细胞增殖均无明显影响(P均>0.05)。P1、P2对应的6~7 aa短肽P1-1、P1-2、P2-2均可抑制皮肤鳞癌SCL-1细胞增殖(P均<0.05),P1-3、P2-1、P2-3对皮肤鳞癌SCL-1细胞增殖均无明显影响(P均>0.05)。经P1-1、P1-2、P2-2短肽外涂的裸鼠皮肤组织血管内及血管壁均可检测到红色荧光。结论成功筛选出可抑制皮肤鳞癌细胞增殖的6~7 aa PEDF短肽P1-1、P1-2、P2-2,其透皮性均较好,有望应用于皮肤鳞癌的治疗。
- 李春明刘藕根彭亚婷张淑兰张颖鹏刘志刚
- 关键词：皮肤鳞癌色素上皮衍生因子短肽裸鼠
