国家自然科学基金(39893290-2B)
- 作品数：5 被引量：7H指数：2
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- 鸡传染性支气管炎病毒中国地方分离株S1基因的克隆及其鉴定
- 2002年
- 用自行设计的 1对引物 you1+和 you2 -对 5个传染性支气管炎病毒 (IBV)地方分离株 (HN2 ,HN4,JX1,SC2和SC4)的基因组 RNA进行 RT- PCR,均成功地扩增出预期大小 (约 16 30 bp)的目的片段 ,经 PCR、酶切鉴定为 S1基因。将 5个毒株的 S1基因克隆到 p GEM- T载体中 ,重组质粒经 Eco R 和 Hind 单酶切以及用引物 you1+和 you2 -进行质粒 PCR扩增鉴定 ,证明 IBV- S1基因已成功地克隆到了 p GEM- T载体中。同时 ,为了测序的方便 ,还将 IBV- S1基因作了目的片段 (约 10 6 0 bp)
- 游洪王林川
- 关键词：传染性支气管炎病毒S1基因RT-PCR克隆亚克隆地方分离株
- Mab-ELISA对IBV毒株定性检测方法的建立与应用被引量：4
- 2001年
- 针对禽传染性支气管炎病毒 (IBV)血清型众多、临床检测不易的难题 ,用我国自己研制的 2株IBV单克隆抗体 ,通过多种方法的比较与鉴定 ,建立起适用于定性检测IBV的包被鼠源IBV单抗的Mab ELISA方法 ,其操作程序是 :包被鼠源IBV单抗 -被检病毒 -鸡抗IBV高免血清 -兔抗鸡IgG (AGP效价 1∶32 ) -羊抗兔IgG -HPR ;用本方法对国内 46个IBV分离株及NDV、AIV H9N2、PPMV I等的检测 。
- 王林川黄爱芳游洪
- 关键词：传染性支气管炎病毒单克隆抗体酶联免疫吸附测定法传染性支气管炎
- 我国鸡传染性支气管炎病毒地方分离株S1基因的分离及初步鉴定
- 2001年
- 根据IBVBeaudette株全基因组序列 ,借助基因分析软件自行设计合成了 3条引物 (you1+、you2 -、youM +) ,引物you1+和you2 -在S1基因两侧 ,跨幅为 16 11bp ,引物you2 -和youM +在S1基因的 3’端 ,跨幅为 5 35bp 用引物you1+和you2 -对 5个IBV地方分离株 (HN2、HN4、JX1、SC2和SC4)进行RT PCR ,均成功地扩增出预期大小的目的片段 用另 1对引物 (you2 -和youM +)对各毒株的RT PCR产物再进行PCR扩增 ,均得到一条约 5 30bp的目的片段 ;对RT PCR产物用限制性内切酶PstⅠ进行酶切分析 ,结果酶切产物中得到 2条条带 ,大小分别为 5 6 0和 10 5 0bp ,与GeneBank中 11株已发表的S1基因分析结果一致 初步鉴定结果显示 ,已经成功分离得到了IBV S1基因 .
- 游洪王林川
- 关键词：传染性支气管炎病毒RT-PCRS1基因地方毒株
- 我国鸡传染性支气管炎病毒地方分离株S1基因的RFLP基因分型的研究被引量：3
- 2001年
- 采用 RT- PCR方法分离得到了五个IBV地方分离株 ( HN2 ,HN4,JX1 ,SC2和SC4)的 S1基因片段 ,并用限制性内切酶Hae 对五个 IBV地方分离株 S1基因的c DNA进行 RFL P分析。结果显示 ,五个 IBV地方分离株 S1基因 c DNA的 Hae 带型与标准毒株 M41和 Beaudette相同。根据Kwon建立的 RFL P分型标准 ,本试验的五个地方分离株应归属于马萨诸塞血清型。
- 游洪王林川
- 关键词：鸡传染性支气管炎病毒RT-PCRS1基因RFLP
- 我国鸡传染性支气管炎病毒地方分离株的形态观察和S1基因的RT-PCR扩增
- 2000年
- 参照已发表的IBVBeaudette株全基因组序列 ,自行设计合成了 3条引物 (youl+、you2 -、youM + ) ,引物you1+和you2 -在S1基因两侧 ,跨幅约 16 10bp ,引物you2 -和youM +在S1基因的 3’端 ,跨幅约 5 30bp。用这两对引物对 5个IBV地方分离株 (HN2 ,HN4,JX1,SC2和SC1)进行RT -PCR ,均成功地扩增出相应大小的目的片段。
- 游洪王林川
- 关键词：传染性支气管炎病毒病毒形态S1基因
