广东省科技攻关计划(2010A020102003)
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
- 相关作者：童雄王翀徐建曾芳李莉更多>>
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- 猪CRYAB基因原核表达载体的构建及表达条件的优化
- 2011年
- 将猪CRYAB基因cDNA连接到原核表达载体pRSET A中,构建重组表达质粒pRSET A-CRYAB,经酶切和测序鉴定后,转入表达宿主大肠杆菌BL21进行诱导表达,SDS-PAGE电泳分析表明,如期获得了重组蛋白的表达,其主要以包涵体的形式存在,且最佳条件为诱导温度25℃,时间15 h,IPTG浓度为0.2 mmol/L。
- 李莉童雄童雄田力
- 关键词：原核表达
- 猪骨骼肌卫星细胞中miR-24功能的初步研究及靶基因分析
- 2012年
- 为了探讨miR-24对猪骨骼肌发育的影响,对体外培养1日龄纯种长白公猪骨骼肌卫星细胞分别转染miR-24过表达载体和干扰片段,发现过表达miR-24后,成肌分化基因MyoD、Myogenin和Myf5表达量显著升高,骨骼肌卫星细胞分化趋势增强;干扰miR-24后,Myogenin的表达量显著降低;同时,靶基因预测结果显示Myogenin可能是miR-24的靶基因。
- 徐建于鑫曾芳童雄王翀
- 关键词：靶基因
- 小窝蛋白-1在猪前体脂肪细胞分化中的作用及其机理
- 2012年
- 以体外培养1日龄猪皮下前体脂肪细胞为研究对象,通过脂质体LipofectamineTM2000介导小窝蛋白-1(Caveolin-1,CAV1)过表达载体pEGFP-N1-CAV1及CAV1的干扰片段siRNA-CAV1分别转染猪皮下前体脂肪细胞,采用RT-PCR定量分析转染后24、48、72、96h的CAV1mRNA表达量以及转染后72h脂肪细胞分化相关基因的mRNA表达量;其后又进行了CAV1过表达或干扰且诱导分化后甘油三脂含量以及脂肪细胞分化相关基因的mRNA表达量测定。结果显示,过表达CAV1基因上调前体脂肪细胞分化相关基因PPARγ、C/EBPβ、AP2、GPDH的表达量,干扰CAV1基因下调C/EBPβ、PPARγ、AP2、LPL、VLDLR的表达量;诱导分化后干扰组C/EBPβ、LPL、VLDLR的表达量仍显著降低,而甘油三脂含量检测结果说明过表达CAV1基因能促进脂肪细胞分化,提示CAV1可能通过C/EBPβ、LPL、VLDLR等基因影响猪前体脂肪细胞分化。
- 曾芳丘德峰童雄徐建王翀
- 关键词：小窝蛋白-1前体脂肪细胞基因表达甘油三酯
