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辣椒Me3基因介导抗根结线虫相关基因的SSH分析被引量：15: 2007年; 以辣椒(Capsicum annuum L.)双单倍体HDA149为试验材料,接种南方根结线虫(Meloido-gyne incognita)12、24、36h的根尖材料作为测验方(Tester),相应的未接种根尖材料作为驱动方(Driv-er),构建一个南方根结线虫诱导Me3基因表达早期的抑制消减杂交cDNA文库,通过高密度点阵膜杂交差异筛选,获得了309条表达序列标签(EST)。通过测序,除去重复序列共得到259条EST序列,在Gen-Bank上进行BLAST分析,30个EST片段未发现同源性基因,229个为具有同源性的已知基因,其中71个为功能未知的基因。在显微观察和抗性相关EST表达谱分析的基础上,推测在Me3基因介导的不亲和互作中,编码NBS-LRR结构的抗病基因参与了寄主对根结线虫的识别,激发了过敏性坏死反应的信号基因,同时多种抗性相关的转录因子基因表达,使以代谢为基础的防御反应和保护机制发挥抗线虫作用。; 茆振川谢丙炎杨宇红冯东昕冯兰香杨之为; 关键词：辣椒根结线虫抑制性消减杂交

根结线虫与植物的分子互作被引量：9: 2006年; 根结线虫(Meloidogynespp.)与植物的互作,包括一系列的分子信号识别、调节及表达。在感病寄主中,根结线虫通过分泌独特的食道腺分泌物来改变寄主植物基因的正常表达,刺激植物根尖细胞形成高度专化的巨型细胞,以满足自身生长和繁殖的需要;在抗性植物中,根结线虫能够引发植物抗性反应,使植物抵抗线虫进一步侵染、转移或是防止其建立寄生关系。线虫的分泌物和寄主防御基因的表达产物在信号识别中起着重要的作用,这种分子互作决定着寄主植物的抗、感性,对于抗线虫育种和防治根结线虫具有重要的意义。根结线虫侵染早期植物的分子表达、线虫诱导的根部特异表达转录启动子,以及线虫毒性基因与非毒性基因等方面将成为线虫与植物互作的研究方向。; 茆振川谢丙炎杨之为杨宇红冯兰香; 关键词：根结线虫分泌物抗性基因

南方根结线虫促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)基因的RNAi效应分析被引量：7: 2008年; 促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)在线虫的生长发育等方面具有重要作用,本研究探索利用RNAi技术沉默南方根结线虫mapk-1基因来抑制线虫的生长发育。根据mapk-1基因的cDNA序列设计引物,通过体外转录合成约550bp的dsRNA对南方根结线虫的卵进行RNAi以沉默mapk-1基因。试验结果表明,将南方根结线虫的卵块浸泡在含有2mg/mL dsRNA的M9缓冲溶液中,24h后卵块孵化出的2龄幼虫数量明显多于对照组(无dsRNA),但孵化出的幼虫死亡率高达90%,而对照组的死亡率低于5%,说明mapk-1基因的沉默抑制了卵块的孵化和线虫的生长,同时将孵化的幼虫接种番茄,14d后番茄根部无根结产生,35d后无卵块产生;而浸泡72h后卵块孵化出的2龄幼虫几乎全部死亡,并且孵化的线虫数量明显少于对照。提取导入dsRNA的卵块的RNA进行半定量PCR分析,结果表明mapk-1基因的mRNA被降解。; 陈国华肖罗张双庆杨宇红谢丙炎; 关键词：南方根结线虫卵块 RNAI

植物抗线虫基因工程新途径及其在分子育种中的应用被引量：7: 2007年; 植物寄生线虫种类繁多、危害严重,给世界农业生产造成巨大经济损失。目前防治线虫通常采用轮作、杀线虫药剂、生物防治和应用抗性品种等措施,但存在一定局限性。随着植物与寄生线虫之间相互作用机制的深入研究以及分子遗传操作技术的逐渐成熟,利用基因工程技术构建环保、方便、有效的线虫防治策略逐渐成为研究热点。本文从植物抗线虫基因、抑制线虫的外源活性蛋白、特异表达启动子,以及RNAi介导的抗线虫基因工程策略等方面,简要概述了国内外近年来植物抗线虫基因工程新途径研究进展以及在分子抗病育种中的应用。; 陈国华杨宇红谢丙炎; 关键词：植物寄生线虫抗线虫基因特异启动子 RNAI

辣椒N基因介导抗根结线虫作用早期表达基因的抑制性消减杂交SSH分析被引量：18: 2007年; 以含N基因的辣椒(Capsicum annuumL.)为试验材料,接种南方根结线虫(Meloidogyne in-cognita)12、24、36h的根尖材料作为测验方(tester),相应的未接种根尖材料作为驱动方(driver),构建一个南方根结线虫诱导N基因表达早期的正向抑制消减杂交cDNA文库,并结合文库高密度点阵膜杂交差异筛选,获得了237条表达序列标签(EST)。在GenBank上进行BLASTn与BLASTx分析,得到148条功能已知的EST序列,获得已知的上调抗性相关EST68个。分离出了具有NBS-LRR结构的抗线虫蛋白和类LRR抗性蛋白的基因,防御作用相关的类萌芽素(GLP)、HSR203J蛋白、蜜腺蛋白、蛇毒素肽等基因,抗性相关的WRKY、ERFBP等转录因子基因,以及G蛋白、14-3-3蛋白等多种信号蛋白基因。通过Gene Ontology分析,N基因介导的早期表达抗病基因涉及病原物的识别、抗性信号传导、过敏性坏死、系统获得性抗性以及植物细胞保护机制等多个方面,并有许多功能未知的基因有待于进一步的研究。; 茆振川谢丙炎杨宇红冯东昕冯兰香杨之为; 关键词：根结线虫辣椒 N基因抑制性消减杂交

线虫耐寒性研究进展被引量：14: 2006年; 对于分布在温带和寒带的线虫,它们只有战胜冬季寒冷的挑战,才能有利于种群的存在与发展。因此,耐寒性是线虫生物学研究中不可忽视的内容。综述了关于线虫在低温胁迫下的耐寒性测定方法、耐寒对策及耐寒机制等方面的研究进展。线虫的耐寒性和昆虫一样,可通过过冷却点和低温存活率两种指标进行评价,但在具体的实验方法上,线虫耐寒性研究有其不同之处。线虫的耐寒对策和耐寒机制具有多样化。耐寒对策主要有耐冻和避冻,二者能共同渗透于线虫的耐寒过程中。耐寒机制包括特殊发育阶段的形成、低温驯化作用、低分子量抗冻物质的聚集、以及高分子量抗冻蛋白和热休克蛋白的产生,等等。此外,还强调应从多个角度研究线虫的耐寒性,如寒冷敏感型线虫的研究、寄生线虫的耐寒对策研究以及交叉胁迫的研究。; 戴素明成新跃肖启明谢丙炎; 关键词：线虫耐寒性

寄生线虫RNA干涉技术研究现状与展望: 自从在C．elegans中发现RNAi现象后,线虫RNAi已成为研究热点之一。通过线虫突变体分析,生物体普遍存在的RNAi机制得到进一步解析。目前,RNAi已发展成为一种实验技术,使模式线虫和寄生线虫基因的功能分析发生了...; 戴素明成新跃肖启明谢丙炎; 关键词：RNAI 线虫功能分析; 文献传递

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重大基础研究前期研究专项(2004CCA05300)