国家自然科学基金(31170924)
- 作品数：6 被引量：13H指数：2
- 相关作者：胡翰青刘彦普刘斌邢红艳王艳更多>>
- 相关机构：第四军医大学第三军医大学大坪医院解放军第九四医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 小鼠脂肪来源干细胞体外培养、诱导分化及鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的:观察C57小鼠ASCs(Adipose-derived stem cells,ASCs)体外培养的生物学特性,探讨其成脂成骨诱导分化能力。方法:无菌条件下切取C57小鼠腹股沟处脂肪组织,0.25%I型胶原酶消化,分离培养ASCs,37℃,5%CO2饱和湿度孵箱培养,细胞融合达80%时消化传代。观察其细胞形态;MTT比色法测细胞生长曲线;流式细胞仪检测细胞表面标志物;取第2代细胞行成骨及成脂诱导培养,3周后分别茜素红染色和油红O染色鉴定。结果:从C57小鼠脂肪组织中分离获取的ASCs呈长梭形,成纤维细胞样。细胞生长曲线呈"S"型,证明ASCs具有很强的增殖能力;流式细胞术分析结果:CD29、CD44、CD90阳性表达,CD31、CD34、CD45阴性表达;成骨诱导后茜素红染色阳性,成脂诱导后油红O染色阳性。结论:本试验分离培养的细胞为ASCs,具有确切分化能力。
- 胡翰青王艳邢红艳徐小方刘彦普刘斌
- 关键词：C57小鼠诱导分化
- 脂肪来源干细胞在小鼠放射性损伤涎腺组织中归巢的实验研究被引量：1
- 2013年
- 目的:观察脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ASCs)在C57小鼠放射性损伤涎腺组织中的归巢现象。方法:体外培养C57小鼠ASCs;建立C57小鼠涎腺放射损伤模型;荧光染料DiI标记的普通C57小鼠ASCs及GFP转基因C57小鼠ASCs、分别以每次2×105/ml从尾静脉注射至涎腺放射损伤模型小鼠体内,注射3次,间隔6 h,末次注射24 h后处死小鼠,将下颌下腺制作成冷冻切片,荧光显微镜观察。结果:建立了C57小鼠ASCs细胞系及小鼠放射性涎腺损伤动物模型。尾静脉注射ASCs后在小鼠放射性损伤涎腺组织中观察到标记细胞。结论:ASCs能够归巢到小鼠放射性损伤涎腺组织中。
- 胡翰青王艳邢红艳梁军王启明刘斌刘彦普
- 关键词：C57小鼠归巢
- 组织工程皮肤及其生物反应器的研究进展被引量：1
- 2018年
- 组织工程是一门生物科学和工程科学密切交叉的前沿学科,组织工程生物反应器已广泛地应用于人体器官修复领域。组织工程皮肤是通过组织工程相关技术来构建人工皮肤替代物,并具有暂时性乃至永久性替代自身皮肤的功效,目前主要有人工表皮、人工真皮和人工复合皮等。灌注式生物反应器是成功培养组织工程皮肤的关键技术,具有培养基的连续供给、气液界面的维持和相对低的应力环境等优点。
- 王洋伍津津
- 关键词：组织工程皮肤生物反应器人工真皮
- 人皮肤鳞状细胞癌体外三维模型的建立及高侵袭性鳞癌细胞的生物学评价
- 2013年
- 目的建立人皮肤鳞癌细胞体外三维培养模型,分离高侵袭性细胞亚群,并比较其生物学特性。方法利用复方壳多糖组织工程皮肤,成功建立人皮肤鳞癌细胞体外三维培养模型,消化分离得到高侵袭性鳞癌细胞亚群,比较肉桂醛和干扰素作用后对不同侵袭特性细胞亚群的增殖抑制效果,同时比较不同侵袭特性细胞亚群在裸鼠中成瘤效果的不同。结果不同浓度的肉桂醛和干扰素对皮肤鳞癌细胞的增殖抑制差异有统计学意义(P<0.01),不同侵袭特性的皮肤鳞癌细胞亚群之间的增殖抑制差异也有统计学意义(P<0.01),另外,两种不同侵袭特性的细胞亚群的成瘤特性差异有统计学意义(P<0.01)。结论成功建立人皮肤鳞癌体外三维培养模型,同时运用此种三维培养模型能够筛选得到侵袭特性更强的细胞亚群。
- 杨晓鲲杨亚东杨桂红唐书谦伍津津
- 关键词：组织工程皮肤鳞状细胞
- 基于准静态平面流场的新型皮肤组织工程灌注式生物反应室设计与初步模拟被引量：3
- 2013年
- 目的设计准静态平面流场的灌注式新型生物反应器,以适合组织工程皮肤的培养要求。方法采用计算流体动力学(computational fluid dynamics,CFD)商业软件FLUENT模拟新型生物反应器中的流场及培养支架壁面上的切应力,设计出一种能够层叠、低剪切力、均匀平面流场的生物反应器。结果模拟结果表明筛网状支撑物及组织工程皮肤构建物表面处的最大切应力小于3×10-5N/cm2,且培养室中的流场是均匀的。结论新型生物反应器满足准静态平面流场的要求,有可能在未来的皮肤组织工程研究和生产中广泛使用。
- 王洋蔡伟华伍津津唐辉杨涛唐书谦
- 关键词：皮肤组织工程CFD
- 小鼠骨髓干细胞的分离培养鉴定及诱导分化的研究被引量：7
- 2013年
- 目的分离培养鉴定小鼠的骨髓间充质干细胞,观察体外培养生长特性,并在特定条件下诱导分化,探讨其成脂成骨分化能力。方法采用全骨髓培养法培养小鼠骨髓间充质干细胞,观察干细胞的形态和生长特性,用流式细胞仪对其细胞表型CD29、CD90、CD34、CD44、CD31、CD45进行鉴定,成脂成骨诱导分化能力鉴定。结果原代分离的细胞培养24 h,干细胞开始贴壁,胞体呈圆形,其他血细胞悬浮。培养3 d,贴壁细胞逐渐变梭形;培养第4 d,细胞开始分裂;随着细胞数目的增加,逐渐形成漩涡状排列,细胞形态呈梭形、三角形、多边形、不规则形;培养第10 d,贴壁细胞长满瓶底的80%,按1∶2传代。选择第3代骨髓干细胞分析显示,CD29、CD44、CD90阳性表达,CD31、CD34、CD45阴性表达。细胞成脂成骨诱导后染色鉴定呈阳性。结论采用全骨髓法培养可获得生长状态良好,增殖能力强的骨髓间充质干细胞,方法简便、实用。
- 王艳胡翰青邢红艳翁雁鸣刘彦普刘斌
- 关键词：骨髓间充质干细胞小鼠流式细胞术诱导分化
