广州市科技计划项目(041011)
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
- 相关作者：龙大宏宣爱国潘学兵谷海刚李佳楣更多>>
- 相关机构：广州医科大学上海市浦东医院广州医学院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 神经生长因子基因重组逆转录病毒载体的构建与鉴定被引量：3
- 2006年
- 目的构建神经生长因子(NGF)基因重组逆转录病毒表达载体,研究NGF在神经干细胞(NSC)中的表达情况。方法从大鼠海马组织提取总RNA,利用RT-PCR的方法获得编码大鼠β-NGF的基因片段,应用基因重组技术,将大鼠β-NGF基因片段克隆到逆转录病毒表达载体pLEGFP-N1中,通过脂质体Lipofectamine2000转染包装细胞PT67,经G418筛选后,收集阳性克隆病毒上清,用于感染神经干细胞(NSC),观察该NSC表达的NGF对PC12细胞突起生长的作用。结果限制性内切酶酶切分析鉴定表明为正确重组子,β-NGF基因在NSC中获得表达,该NSC的培养上清液可以促进PC12细胞突起生长。结论重组逆转录病毒表达载体pLEGFP-NGF构建成功,β-NGF基因可在NSC中表达并具有生物学活性。
- 何峻峰龙大宏李佳楣冷水龙谷海刚宣爱国潘学兵
- 关键词：神经生长因子逆转录病毒载体神经干细胞基因重组阿尔茨海默病
- 神经生长因子重组反转录病毒载体在神经干细胞中的表达被引量：7
- 2014年
- 背景:神经生长因子属于生物大分子,难以透过血脑屏障,而反转录病毒载体能稳定地将外源基因插入并整合到宿主细胞基因组内,适于作为基因治疗的载体。目的:探讨神经生长因子基因重组反转录病毒表达载体在神经干细胞中的表达情况。方法:将SD大鼠神经生长因子基因重组反转录病毒表达载体pLEGFP-NGF通过脂质体Lipofectamine 2000转染包装细胞PT67,经G418筛选后,收集阳性克隆病毒上清,用于感染神经干细胞,用ELISA检测神经生长因子基因的表达,并利用PC12细胞检验神经生长因子的生物学活性,同时观察神经生长因子对神经干细胞存活、分化的影响。结果与结论:重组了神经生长因子基因的反转录病毒液感染神经干细胞后能表达外源性神经生长因子蛋白,该蛋白能促使PC12细胞数量增多,突起明显变长,并能增加神经干细胞的存活数量,促进神经干细胞分化。结果说明整合了神经生长因子基因的神经干细胞能表达外源性神经生长因子,表达的神经生长因子对神经干细胞的存活及分化均有促进作用。
- 何峻峰顾国妹龙大宏
- 关键词：干细胞神经干细胞神经生长因子反转录病毒载体PC12细胞基因重组
