国家自然科学基金(31160236)
- 作品数：9 被引量：6H指数：2
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- 本氏烟ataxin--3抑制表达的生理表型和蛋白质组学研究
- 本实验室前期以缺水处理的马铃薯（Solanum tuberosum L.）叶片为材料，构建了转录子消减cDNA文库，文库筛选及表达分析，识别了马铃薯缺水响应基因StATX-3，并克隆了其全长cDNA。检索马铃薯基因组数据...
- 拓宁
- 关键词：植物生理学缺水胁迫蛋白质组学
- 文献传递
- 叶绿素结合蛋白CP24介导光照响应基因StRSM 1调控叶绿素积累被引量：3
- 2021年
- 单MYB转录因子成员RSM(RADIALIS-like SANT/MYB)突变,倒置黑暗诱导的叶绿素减少,原因有待确定;为了揭示RSM如何调控叶绿素积累,本研究运用基因工程途径,获得了普通烟草和马铃薯体内抑制和过量表达StRSM 1阳性转化株系,测定了阳性转化株系的叶绿素积累等生理表型;结果显示,普通烟草和马铃薯体内抑制RSM 1表达,显著增加了叶绿素积累,叶色随之加深;RSM 1过量表达,显著减少叶绿素积累,叶色变浅。叶绿素代谢相关基因表达测定结果显示,StRSM 1过量表达增加了黑暗下叶绿素结合蛋白CP24基因的表达,改变了其表达模式。以上结果表明,转录因子StRSM 1响应光照反向调控叶绿素积累,叶绿素结合蛋白CP24参与了StRSM 1对叶绿素积累的调控。结果有助于进一步明确RSM 1如何响应光照和深刻理解RSM 1参与的光照响应。
- 撒世娟伍涵宇张晓萍郑蕊姚新灵
- 关键词：叶绿素
- 器官特异EST随马铃薯不同基因型分化表达
- 2012年
- 匍匐茎是马铃薯的产量构成因素,匍匐茎形成早晚与成熟期早晚紧密关联,但关联的分子基础尚属未知。以两基因型马铃薯匍匐茎及块茎为材料,构建了两基因型两器官消减cDNA文库4个,文库筛选识别了参与两器官形成EST 21个,转录水平检测显示,其中的6个EST呈现基因型及匍匐茎或块茎特异表达,随着块茎形成一些EST表达水平显著降低;对21个EST在20个不同基因型中的表达分析表明,其中9个EST表现基因型特异表达,最低表达频率仅为1/9;其中一些EST仅在早熟或晚熟基因型中表达;研究首次为匍匐茎形成早晚与成熟期早晚获得了分子证据,同时,也进一步明确了马铃薯各基因型间相对独立而稳定的遗传基础。
- 蔡倩崔雪琼冯秀娟黄琦戴海霞姚新灵
- 关键词：基因型匍匐茎表达序列标签成熟期马铃薯
- 抑制AX-3表达改变本氏烟氧化和光合磷酸化ATP积累
- 2020年
- 基因组注释预测了AX-3普遍存在于不同植物种类,但其功能鲜有报道。本研究通过StAX-3基因反义cDNA在本氏烟(Nicotiana benthamiana)体内表达,实现了其AX-3基因表达下调;蛋白质组表达谱测定分析显示,伴随AX-3积累减少,168个DAPs(表达倍绝对值大于1.5)的积累随之改变;其中15个密切关联DAPs网络分析显示,AX-3下调表达,主要降低了9种线粒体内代谢酶类的积累,包括氧化磷酸化ATP合成酶和TCA循环核心脱氢酶,同时,增加了光合作用代谢酶类合成,包括光合磷酸化ATP合成酶和叶绿素合成底物萜类酶等。叶绿素和ATP含量等表型测定结果,证实了萜类底物和叶绿素合成积累增加,促进光合磷酸化ATP合成积累。结果表明,StAX-3调控氧化和光合磷酸化ATP合成积累模式。该结果不仅明确了St AX-3具有调控线粒体和叶绿体能量代谢的功能,而且为进一步研究植物ataxin-3功能提供理论指导。
- 撒世娟拓宁伍涵宇王佩云殷倩姚新灵
- 关键词：ATAXIN-3ATP氧化磷酸化光合磷酸化
- E.coli中表达马铃薯OSM-3b基因对增强渗透胁迫抗性的分析
- 2012年
- 旨在揭示马铃薯OSM-3b基因表达对胁迫的响应。分离获得了OSM-3b的cDNA,构建OSM-3b的重组菌株DH-OSM,实现OSM-3b在大肠杆菌中的表达,RT-PCR检测了NaCl和PEG6000不同浓度梯度下OSM-3b的表达。结果显示,NaCl浓度在1%以上随盐浓度升高,OSM-3b mRNA的表达逐渐下降;在PEG6000浓度从0.25%升至4.0%时,OSM-3b的mRNA表达明显上升;在NaCl胁迫和PEG6000浓度梯度渗透胁迫下,重组菌株DH-OSM菌的菌落存活数统计分析结果显示,在不同NaCl浓度下重组菌的菌落存活数与对照趋势一致,重组菌菌落存活数峰值出现在的PEG6000浓度2.0%时,而对照菌DH-28c峰值则出现在PEG6000浓度1.0%时。结果表明,OSM-3b在大肠杆菌中表达对NaCl胁迫没有响应,但可缓冲渗透胁迫对其存活的影响。
- 胡海英石晶戴海霞蔡倩崔雪琼冯秀娟黄琦姚新灵
- 关键词：NACL胁迫渗透胁迫
- 马铃薯叶片气孔的开张与关闭同步伴随果胶的降解与合成被引量：2
- 2022年
- 【目的】比较气孔关闭与不同气孔密度开张之间叶片分化表达蛋白质及其积累变化,揭示果胶代谢如何调控气孔开张和关闭,为深入理解气孔的环境适应功能提供依据。【方法】构建体内过量和抑制StEPF-2(EPIDERMAL PATTERNING FACTOR2 from Solanum tuberosum)表达载体,以茎段为外植体,转化马铃薯克新1号植株,获得不同气孔密度的转化株系,以黑暗条件下气孔关闭为对照,采用RNA-seq和iTRAQ分别检测不同处理和对照叶片的基因和蛋白质表达谱,比较不同气孔密度分化表达的蛋白质,并通过StEPF-2标记的pulldown和LC-MS/MS结果确认,明确不同气孔密度特异诱导表达的胞壁果胶代谢参与的蛋白质。【结果】叶片成熟过程中,随着气孔的关闭和开张,至少有14个蛋白质家族参与了保卫细胞壁果胶的代谢;黑暗条件下,气孔关闭时有5个蛋白质家族特异表达,分别是阻止HGs水解的多聚半乳糖醛酸酶抑制子(polygalacturonase inhibitor,PGI)、RG侧链合成的UDP-鼠李糖合成酶(rhamnose synthase,RHM)、半乳聚糖β-1,4半乳糖基转移酶(galactanβ-1,4-galactosyltransferase,GALS)、UDP-D-葡萄糖醛-4-异构酶(UDP-D-glucuronate 4-epimerase,GAE)和聚半乳糖4-α-半乳糖转移酶(polygalacturonate 4-α-galacturonosyltransferase,GAUT);光照条件下,在不同气孔密度的叶片中检出4个蛋白质家族特异表达,它们分别是降解果胶C6甲酯的果胶甲基酯酶(pectinmethylesterase,PME)、内切和末端水解果胶的多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)、α-半乳糖苷酶(α-galactosidase,AGAL)和类果胶裂解酶(pectate lyase-like,PLL)。另有5个蛋白质家族同时参与了气孔的开张和关闭,它们分别是阿拉伯半乳聚糖-蛋白质(aabinogalactan-protein,AGP)、果胶乙酰酯酶(pectinacetylesterase,PAE)、β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,BGAL)、类枯草杆菌蛋白酶(subtilase-like,SBT)和果胶甲基酯酶抑制子(pectinesterase inhibitor,PMEI)。【结论】光�
- 张晓萍撒世娟伍涵宇乔丽媛郑蕊姚新灵
- 关键词：马铃薯气孔密度果胶ITRAQ
- 叶绿体特异蛋白质表达谱对本氏烟不同气孔密度的响应
- 2023年
- CO_(2)通过气孔进入叶绿体,叶绿体如何在分子水平响应气孔密度变化的研究鲜有报道。本研究通过调控本氏烟草NtEPF 2(Nicotiana benthamiana EPIDERMAL PATTERNING FACTOR 2)体内表达,分别得到气孔密度增加和降低的本氏烟草转化株系,用叶绿素积累、光合参数和iTRAQ(isobaric tags for relative and absolute quantification)蛋白质表达谱,表征气孔关闭和不同气孔密度开张株系,揭示叶绿体组成动态对气孔密度变化的响应。结果显示,气孔密度增加株系形成PSI-PSII-LHCII超复合体和加速电子传递的分化表达蛋白质(differential expression proteins,DEPs)显著上调积累,PSI光保护与光损伤修复DEPs则显著下调,叶绿素积累和净光合速率均值分别高于对照43%和67%。气孔密度降低株系叶片发育初期,由于高水平的光合磷酸化ATP合成代谢,叶绿素积累和光合参数显著高于对照,但随叶龄增加,叶绿素积累显著降低。结果表明,气孔密度增加,加速了PSII-PSI复合体形成和其电子传递,降低了光损伤修复水平,保持了不同叶龄叶绿素高水平积累;气孔密度降低,ATP合成和碳固定失衡,随叶龄增加,叶绿素积累模式发生了倒置。研究结果有助于更深入理解气孔的工作原理,拓宽通过调控气孔增加碳固定的视野。
- 撒世娟伍涵宇温媛陈雪娜郑蕊姚新灵
- 关键词：ITRAQ蛋白质叶绿素叶绿体气孔密度
