广东省自然科学基金(S2012010010406)
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 相关作者：李菲陈东风周健洪李伊为魏刚更多>>
- 相关机构：广州中医药大学广西中医药大学第一附属医院广州中医药大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省中医药管理局基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 自噬基因Beclin1启动子细胞自噬模型的建立被引量：6
- 2015年
- 【目的】构建自噬基因Beclin1启动子报告基因细胞自噬模型,为筛选出以Beclin1为靶标的中药提供新的细胞模型。【方法】采用瞬时转染双荧光素酶报告基因测定法,确定最佳转染浓度、时间等条件,及Beclin1基因启动子转录活性细胞自噬模型的建立和验证,观察血清饥饿、过氧化氢氧化损伤及自噬激活剂雷帕霉素3种自噬刺激因素对Beclin1基因启动子转录活性PC12细胞自噬模型的影响。【结果】血清饥饿诱导12 h,Beclin1基因启动子转录活性是体积分数10%血清组的1.8倍,而血清饥饿诱导18、24 h与诱导12 h比较其转录活性无明显变化;300μmol/L过氧化氢诱导9 h,Beclin1基因启动子转录活性是0μmol/L过氧化氢组的1.3倍;雷帕霉素在浓度0.1、1 nmol/L可上调Beclin1基因启动子转录活性,并呈浓度依赖性,而5 nmol/L及更高浓度的雷帕霉素可下调Beclin1基因启动子转录活性。【结论】成功建立用Beclin1基因启动子报告基因检测Beclin1基因启动子转录活性特异性的细胞发生自噬模型,血清饥饿、过氧化氢、自噬激活剂雷帕霉素3种自噬刺激因素可诱导Beclin1基因启动子的转录活性。
- 黄凤媛李菲曾飞剑李昀骏侯秋科黄俊铭胡跃强陈东风黎辉李伊为邓汝东周健洪魏刚黄贵华
- 关键词：转录活性细胞模型血清饥饿自噬
- p53基因启动子转录活性检测细胞模型的建立被引量：2
- 2013年
- 【目的】构建p53基因启动子靶控报告基因细胞模型,为高通量筛选出以p53为靶标的中药提供新的细胞模型。【方法】采用瞬时转染报告基因测定法,确定最佳转染方案及p53基因启动子转录活性细胞模型的建立和验证,观察p53抑制剂PFT-a、血清饥饿、过氧化氢、自噬激活剂雷帕霉素对p53基因启动子转录活性PC12细胞模型的量效和时效关系。【结果】PFT-α诱导3 h,对p53基因启动子转录活性抑制率达50%左右;血清饥饿诱导12、24、36 h,p53基因启动子转录活性是对照组的1.6倍;过氧化氢300μmol/L诱导9 h,p53基因启动子转录活性是对照组的1.3倍;雷帕霉素在浓度为0.1、1 nmol/L可上调p53基因启动子转录活性,呈浓度依赖性,而5 nmol/L及更高浓度可下调p53基因启动子转录活性。【结论】成功建立采用p53基因启动子报告基因检测p53基因启动子转录活性的特异性细胞模型,血清饥饿、过氧化氢、雷帕霉素可诱导p53基因启动子的转录活性。
- 秦红芳曾玲陈静白晔李菲黄开远温泉赖宝玲陈东风黎晖邓汝东周健洪魏刚刘东辉赖英桃李伊为
- 关键词：转录活性细胞模型血清饥饿
