广东省科技计划工业攻关项目(2008B030301032)
- 作品数：6 被引量：9H指数：2
- 相关作者：谭家余黄湘罗雅玲孙海霞邹浩元更多>>
- 相关机构：嘉应学院南方医科大学附属中山市博爱医院南方医科大学南方医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目中山市科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人基因XAPC7在肺腺癌细胞及组织中的表达和定位被引量：1
- 2011年
- 目的了解XAPC7在肺腺癌细胞和组织中的表达及定位情况,为后续的功能研究提供线索。方法首先采用Western-blot技术检测XAPC7在HBE135-E6E7正常支气管上皮细胞株、A549肺腺癌细胞株、NCI-H446小细胞肺癌细胞株中的表达;再用细胞免疫荧光技术,以HBE135-E6E7和A549细胞为研究对象,用鼠抗人XAPC7单克隆抗体分析该蛋白的细胞定位情况;最后利用免疫组织化学法随机检测34例肺腺癌及相应癌旁组织中XAPC7蛋白的定位及表达。结果 Western-blot显示:与HBE135-E6E7相比,XAPC7在NCI-H446中表达明显降低(P<0.05),在A549中表达有所增加,但差异无统计学意义(P>0.05)。激光共聚焦显微镜观察发现XAPC7在A549中主要定位于细胞浆,胞核中少见,而在HBE135-E6E7中除胞浆外,胞核中也有较多分布。免疫组化显示:XAPC7在肺腺癌和肺鳞癌组织细胞的胞浆和胞核中均有表达。在34例肺腺癌中,癌组织胞浆中XAPC7蛋白的表达明显高于癌旁组织胞浆的表达(Z=-4.341,P=0.000),而在癌组织与癌旁组织的胞核中XAPC7蛋白的表达差异无统计学意义(Z=-0.167,P=0.867)。另外,XAPC7蛋白的表达与年龄、性别、肿瘤大小、组织分化和有无淋巴结转移无关(P均>0.05)。结论 XAPC7在肺腺癌细胞株中有表达,主要定位于胞浆。在肺腺癌组织和癌旁组织胞浆中的表达差异有统计学意义,为后续研究打下了基础。
- 谭家余罗雅玲黄湘谭德安
- 关键词：肺腺癌细胞株
- pDsRed1-C3/XAPC7真核表达载体的构建及细胞定位被引量：2
- 2011年
- 目的:构建pDsRed1-C3/XAPC7真核表达载体并观察其在786-O、293T和Chang liver细胞株中的定位情况。方法:采用RT-PCR法从HBE135-E6E7细胞株中克隆得到XAPC7cDNA全长序列,将之与pMD18T载体连接、测序后将该片段亚克隆到真核表达载体pDsRed1-C3中。构建好的pD-sRed1-C3/XAPC7真核表达质粒经酶切和测序鉴定后,采用脂质体法将该重组质粒转染786-O、293T和Chang liver细胞株中,观察其在真核细胞中的表达。结果:pDsRed1-C3/XAPC7重组子经酶切鉴定及DNA测序证实,目的基因XAPC7的序列完全正确,真核表达载体构建成功,转染该重组子的细胞株均可见红色荧光蛋白的表达,呈颗粒状分布。XAPC7主要定位于786-O细胞的胞质,胞核罕见,在293T细胞中,胞质和胞核均有分布,且两者间无明显差别,在Changliver细胞中,胞质和胞核亦均有分布,但以胞质为主。结论:成功构建pDsRed1-C3/XAPC7融合基因并进行真核表达,发现XAPC7在不同细胞中的细胞定位具有差异,为下一步研究XAPC7的肿瘤相关功能奠定基础。
- 谭家余罗雅玲黄湘邹浩元
- 关键词：真核表达载体细胞株细胞定位
- PSMA7在多种肿瘤细胞的表达及意义被引量：3
- 2009年
- 目的了解人蛋白酶体α亚基PSMA7在多种肿瘤细胞的表达情况。方法通过Western blot检测比较PSMA7在不同肿瘤细胞中的表达水平。结果Westernblot检测显示PSMA7在所有检测细胞中广泛表达。与人胚肾293T细胞(正常细胞对照)相比,PSMA7在A549,BACP-37,HeLa,HO-8910,MCF-7和NCI-H446细胞中差异无显著性(均P>0.05),而在Lovo中表达降低(P<0.05),SW480中增高(P<0.05)。与人chang肝细胞(正常细胞对照)相比,PSMA7在肝癌细胞系Bel7402和QGY7703中差异无显著性(P>0.05),在SMMC7721和HepG2中明显增高(P<0.05)。结论PSMA7在肿瘤细胞中广泛表达,具有一定的组织特异性。
- 谭家余罗雅玲黄湘孙海霞
- 关键词：肿瘤细胞WESTERNBLOT
- pSecTag2A-HBV-L真核分泌表达载体的构建及表达
- 2010年
- 目的探索乙型肝炎病毒大蛋白（L蛋白）的分泌表达。方法用PCR方法克隆得到HBV-L基因，通过酶切、连接、转化构建pSecTag2A—HBV—L分泌型真核表达载体：通过脂质体介导的方法瞬时转染293T细胞，用RT-PCR和Westblot鉴定融合蛋白的表达。结果成功构建真核分泌表达载体pSecTag2A—HBV—L．HBV—L在mRNA和蛋白水平表达成功。结论融合IgKV_T2_C区域的外源性分泌信号能有效的引导L蛋白的组装和分泌．为进一步研究其DNA疫苗及免疫保护效果奠定了基础。
- 李晓栋赵香君霍闻钧黄湘乔亚峰
- 关键词：L蛋白293T细胞DNA疫苗
- pcDNA3．1(－)／PSMA7真核表达质粒的构建及其在A549细胞中的表达被引量：2
- 2008年
- 目的构建pcDNA3.1(-)/PSMA7真核表达质粒并建立人肺腺癌细胞株A549的稳定表达株。方法采用RT-PCR法从正常人支气管上皮细胞株HBE135-E6E7中克隆得到PSMA7 cDNA全长序列,将之与pMD18-T载体连接。双酶切和测序鉴定后,再将PSMA7片段亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(-)上。构建好的pcDNA3.1(-)/PSMA7真核表达质粒经双酶切和测序鉴定后,经脂质体转染法转入A549细胞株中,经G418筛选,得到阳性克隆细胞株,再用RT-PCR及Western blotting法检测转染后PS-MA7的mRNA及蛋白表达水平。结果pcDNA3.1(-)/PSMA7质粒经双酶切鉴定和DNA测序证实,目的基因PSMA7的序列完全正确,真核表达质粒构建成功。RT-PCR检测显示,转染pcDNA3.1(-)/PSMA7组的PSMA7 mRNA表达水平(2.698±0.661)明显高于未转染组(1.243±0.176)和转染pcDNA3.1(-)组(1.198±0.514,P<0.05),后两者间无明显差异。Western blotting检测同样显示,转染pcDNA3.1(-)/PSMA7组的蛋白表达水平(1.978±0.661)明显高于未转染组(0.891±0.234)和转染pcDNA3.1(-)组(0.782±0.375,P<0.05),后两组间亦无明显差异。结论成功构建了PSMA7基因的真核表达质粒,并建立了稳定表达PSMA7的A549细胞株,为后续研究奠定了基础。
- 谭家余罗雅玲黄湘孙海霞
- 关键词：质粒真核细胞肿瘤细胞A549细胞
- 人蛋白酶体α7亚基在原发性肝细胞肝癌中的表达及临床意义被引量：3
- 2012年
- 目的:探讨人蛋白酶体α7亚基(PSMA7)与原发性肝细胞肝癌(HCC)发生发展的关系。方法:采用免疫组织化学法检测254例HCC中PSMA7蛋白的表达。结果:在癌组织细胞质中,发现不同临床分期和病理分级之间,PSMA7的表达均无明显差异(P>0.05),但不同肝硬化程度间具有显著性差异(P<0.01),以早期肝硬化患者肝细胞表达量最高。在癌组织细胞核中,不同临床分期之间PSMA7的表达无明显差异(P>0.05),但不同病理分级之间具有显著性差异(P<0.05),同时与肝硬化的程度有一定关系(P<0.05),亦以早期肝硬化患者肝细胞表达量最高。另外,PSMA7的表达在癌组织和癌旁组织的细胞质中无明显差异(P>0.05),而在细胞核中具有显著性差异,癌组织高于癌旁组织(P<0.01)。淋巴结转移组细胞核中的PSMA7表达高于无淋巴结转移组(P<0.05)。结论:PSMA7在HCC细胞核中表达增高,与病理分期有关。此外,PSMA7的表达与肝硬化程度和淋巴结转移有关。
- 黄湘邹浩元杨宇辉谭家余邱玉林
- 关键词：肝细胞肝癌肝硬化
