国家自然科学基金(81071857)
- 作品数：4 被引量：8H指数：1
- 相关作者：郝思国陈琳军邓晓辉马立元姚烨更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属新华医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 淋巴瘤细胞胞外体生物学特性及其抗淋巴瘤效应的研究被引量：1
- 2012年
- 目的:研究淋巴瘤细胞胞外体(lymphoma cell-derived exosomes,LCEX)的生物学特性及其在抗肿瘤免疫中的作用,探讨以胞外体为基础的肿瘤免疫治疗的可行性。方法:本研究以Raji细胞株为淋巴瘤细胞模型,应用免疫电镜,Westernblot,共聚焦显微镜以及细胞毒杀伤实验等技术对其释放的LCEX的生物特性进行初步研究。结果:淋巴瘤细胞同样也能释放胞外体,与其他肿瘤细胞相似,LCEX同样负载重要的免疫分子HSP70及ICAM-1分子。同时,LCEX能够在体外靶向结合树突状细胞(dendriticcell,DC),并能诱导抗原特异性的抗淋巴瘤效应。结论:淋巴瘤细胞同样能够释放胞外体,LCEX负载有淋巴瘤细胞的相关蛋白分子,有望成为淋巴瘤细胞抗原的重要来源之一,体外致敏DC能够诱导抗淋巴瘤免疫,在淋巴瘤免疫治疗方面具有广阔的应用前景。
- 孙静姚烨陈琳军邓晓辉郝思国
- 关键词：淋巴瘤细胞胞外体树突状细胞
- 小鼠白血病细胞L1210外泌体微RNA表达谱及其功能分析被引量：1
- 2016年
- 目的：对白血病细胞外泌体（LCEX）中微 RNA（miRNA）的表达特点及其功能进行分析。方法以小鼠白血病细胞株 L1210为模型，应用密度梯度超速离心法分离其培养上清，获得 LCEX L1210，应用基因芯片技术检测 L1210细胞和 LCEXL1210中 miRNA 的表达，比较二者 miRNA 的表达，对部分差异表达的miRNA 应用实时荧光定量 PCR 进行验证，通过 Gene Ontology 数据库分析。结果在 LCEX L1210中共鉴定出1044种 miRNA，L1210细胞中共鉴定出872种 miRNA，其中732种 miRNA 为两者共有，两者共同表达的 miRNA 占 L1210细胞的83.9%，占 LCEXL1210的70.1%，提示 LCEXL1210中70%以上 miRNA 来自于其母细胞。在 LCEXL1210中有312种 miRNA 在其母体细胞中没有鉴定出，为 LCEXL1210所特有。有些miRNA 在 LCEXL1210中表达明显高于 L1210细胞，如 miR-16-1、miR-210及 miR-195等，提示 LCEX 的miRNA 表达与其母体细胞存在表达差异。对部分表达差异的 miRNA 应用实时荧光定量 PCR 验证显示，这些 LCEX 高表达的 miRNA 参与多种生物学功能及信号转导途径的调控。结论 LCEXL1210所含的miRNA 与其来源细胞 L1210细胞所含的 miRNA 有高度相似性，但有1／3的 miRNA 为其所特有。这些LCEXL1210中高表达的 miRNA 参与多种生物学功能及信号转导途径的调控。
- 姚烨黄芳郝思国万江波张文皓马立元邓晓辉陈琳军
- 关键词：外泌体基因本体
- 淋巴瘤细胞释放的EXO的蛋白质组分分析
- 2013年
- 目的:分析淋巴瘤细胞释放的胞外体(lymphoma cell-derived exosomes,LCEX)的蛋白质组分。方法:利用Shotgun技术,分析淋巴瘤Raji细胞系和Raji细胞分泌的EXO中所含蛋白种类并进一步进行鉴定。利用网络数据库进行蛋白组分功能分析。结果:Raji细胞共鉴定出了蛋白322种,Raji细胞系分泌的EXO共鉴定出了蛋白197种,其中139种蛋白为二者共有,其余58种为EXO所特有。采用了GO(gene ontology)数据库对Raji细胞释放的EXO蛋白功能进行了分析。①LCEX可能主要参与了对细胞内外刺激的应答及对应答的定位(包括与相关细胞之间的粘附、结合等),并参与免疫调节。②利用KEGG数据库分析发现,Raji细胞释放的EXO所负载的蛋白中涉及细胞粘附分子的有8种蛋白分子,主要为ICAM分子及MHC分子;③涉及抗原加工和提呈的有12种蛋白分子,主要是HSP70和HSP90家族的。结论:EXO负载了大部分其来源细胞的蛋白,所负载的蛋白中涉及多种参与免疫调节作用的分子,可能是淋巴瘤细胞参与肿瘤免疫的调节重要机制。
- 孙静姚烨陈琳军邓晓辉马立元郝思国
- 关键词：胞外体淋巴瘤细胞
- miRNA-181a对多发性骨髓瘤细胞生物学特性影响的初步研究被引量：6
- 2017年
- 目的 探讨miRNA-181a（miR-181a）在多发性骨髓瘤（MM）患者中的表达情况及其对MM细胞生物学特性的影响.方法 应用免疫磁珠筛选的方法分离并纯化25例初治、复发难治MM患者及10例非恶性血液病患者骨髓CD138＋细胞,应用实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-181a表达情况.同时检测RPMI 8226、H929及U266三种MM细胞株中miR-181a的表达.应用miR-181a抑制剂及激动剂观察下调和上调miR-181a表达对MM细胞生物学特性的影响,并对miR-181a进行靶基因预测.结果 与非恶性血液病患者相比,MM患者CD138＋细胞中miR-181a表达上调.对MM细胞株的观察发现,与非恶性血液病患者骨髓CD138＋细胞相比,RPMI 8226及U266细胞株miR-181a高表达,而H929细胞株则低表达.相比对照组,应用100 nmol/L miR-181a抑制剂下调miR-181a后,U266细胞的增殖活力在24、48及72 h分别为（50.5±4.1）%、（52.3±2.2）%和（69.5±4.3）%,低于对照组的（67.1±3.3）%、（71.5±3.6）%和（78.1±5.4）%（均P〈0.05）,提示细胞增殖受抑.而应用100 nmol/L miR-181a激动剂上调miR-181a后,H929细胞在24、48 h时的增殖活力分别为（38.5±3.6）%和（82.2±6.9）%,高于对照组的（21.2±2.4）%和（61.3±5.4）%（均P〈0.01）,提示细胞增殖增强.细胞周期分析提示,miR-181a抑制剂使U266细胞周期阻滞在G0/G1期.细胞药敏实验结果显示,多柔比星、紫杉醇及5-氟尿嘧啶作用后,与药物单独处理的细胞相比,miR-181a抑制剂下调U266细胞miR-181a表达的细胞增殖活力下降.在48 h和72 h的吸光度（A）值显著低于对照组.细胞迁移实验显示,miR-181a抑制剂下调miR-181a能抑制U266细胞的迁移能力,实验组细胞的迁移比例为（62±10）%,低于对照组的（89±12）%（P〈0.05）,而miR-181a激动剂则能提高H929细胞的迁移能力,实验组细胞的迁移比例[（242±9）%]高于对照组的（98±8）%（P〈0.01）.结论 MM细胞高表达miR-181a.miR-181a的高表�
- 张文皓陈琳军李志超郝思国陶荣邓晓辉马立元万江波刘传绪张言
- 关键词：多发性骨髓瘤细胞运动
