国家高技术研究发展计划(2006AA02A128)
- 作品数：30 被引量：126H指数：5
- 相关作者：顾晓松丁斐杨宇民王军姚登兵更多>>
- 相关机构：南通大学中国医学科学院北京协和医学院中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 神经生长液治疗老年帕金森病的初步临床应用研究被引量：4
- 2010年
- 目的:围绕"研发多重靶标治疗神经退行性疾病的多功能药物"的设想探讨中药神经生长液治疗老年帕金森病的初步临床应用。方法:选择典型的老年帕金森病例3例(年龄75～90岁,病程4～10年,长期服用多巴丝肼维持,YAHR分级4～5级);服用神经生长液治疗(1贴/日,30天为一疗程,间隔2～4周后进行第二疗程。重复上述2～5个疗程);观察患者的临床症状改善和多巴丝肼的减量情况。结果:3例患者在服用神经生长液2～5个疗程后,临床症状均获得不同程度的改善,多巴丝肼减量达20%～50%,YAHR分级达2～4级。结论:中药提取的神经生长液治疗老年帕金森病取得预想中的初步临床疗效,提示该中药的有效成分对人体可能有多靶点的调节和修复作用,有望成为中西医结合治疗老年帕金森病的新方法。
- 王军吴翔郝传铮黄焕新季俊霞顾晓松
- 关键词：帕金森病多巴丝肼神经生长液
- MoCA和MMSE评估老年帕金森病患者认知障碍的分析被引量：45
- 2013年
- 目的探讨帕金森病患者轻度认知功能障碍(mild cognitive impairment with Parkinson’s disease,PDMCI)的特点和简易精神状态量表(mini-mental state examination,MMSE)、蒙特利尔认知评估量表(Montreal cognitive assessment,MoCA)在帕金森病患者认知功能评价中的应用价值。方法采用MMSE、MoCA评测57例PD患者与30例正常老年人,并采用运动功能指标、年龄、性别、发病时间、受教育水平等可能影响PD患者认知功能的因素评估其对认知影响的程度。结果 MoCA对认知障碍的检出率大于MMSE。PD患者MoCA总分较正常老年人低(P<0.05),PD患者与正常组相比存在视空间与执行功能、抽象理解、延迟回忆功能的损害(P<0.05)。结论 PD患者存在视空间与执行功能、抽象理解、延迟回忆功能的损害,MoCA可作为老年PD患者认知障碍有效的筛查工具,能较早地发现PD-MCI。
- 汤海艳王军魏其林黄焕新郝传铮顾晓松
- 关键词：帕金森病轻度认知功能障碍蒙特利尔认知评估量表简易精神状态量表
- 丝素生物制品甲醇残留量顶空气相色谱法测定被引量：3
- 2008年
- 任艳玲赵亚红仲齐庆杨宇民
- 关键词：顶空气相色谱法甲醇含量生物制品丝素组织工程材料
- 犬骨髓基质细胞和蚕丝丝素的体外生物相容性
- 2010年
- 目的探讨体外培养的犬骨髓基质细胞(BMSCs)与蚕丝丝素材料的生物相容性,寻找BMSCs组织工程化神经的支架材料。方法通过差速贴壁法体外分离、培养犬骨髓基质细胞,与丝素共培养后,通过光镜(经免疫荧光染色)、扫描电镜观察细胞在丝素上黏附和生长情况。利用丝素浸出液培养BMSCs后,通过透射电镜观察细胞内部超微结构,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测丝素、羟基磷灰石、有机锡浸出液和普通IMDM完全培养基培养细胞12、24、48、72h和7d的细胞活力,每组重复12次。流式细胞术检测丝素浸出液培养BMSCs的细胞周期及表型,实验重复3次。结果通过光镜、扫描电镜观察,发现BMSCs紧紧黏附于丝素材料,并沿着丝素纤维延伸,黏附于丝素纤维的细胞呈圆形、椭圆形及呈梭形。与普通IMDM完全培养基培养的细胞相比,透射电镜下可见丝素浸出液培养后的BMSCs内部结构未见异常;MTT检测丝素和羟基磷灰石浸出液对骨髓基质细胞的活力无显著性影响(P>0.05);流式细胞术检测丝素浸出液对骨髓基质细胞周期和表型无明显影响。结论蚕丝丝素材料与犬BMSCs生物相容性好,且未见丝素对BMSCs有毒性作用,可作为BMSCs组织工程化神经的支架材料。
- 吴红胡楠杨宇民姚登兵顾晓松
- 关键词：骨髓基质细胞丝素免疫荧光流式细胞术
- 大鼠背根神经节源干细胞分离培养和鉴定
- 2008年
- 目的:探讨大鼠背根节(DRG)内是否存在神经干细胞。方法:取胚胎大鼠DRG进行原代细胞培养,观察其增殖与分化情况,并行P75BrdU/Nestin,GFAP,NF200免疫荧光组织化学鉴定。结果:细胞培养获得大量能够分裂增殖且呈巢状悬浮生长的干细胞团,呈P75BrdU/Nestin免疫荧光组织化学阳性反应;培养第三代细胞加入胎牛血清10d后,相差显微镜下可见部分细胞伸出多个细长突起,且免疫组化呈NF200阳性;部分细胞具有扁平多突起的或双极细胞形态,免疫组化呈GFAP染色阳性。细胞球经NGF培养诱导1d左右有些神经元样的细胞开始迁出,随着时间增长迁出的细胞越来越多,并且细胞和细胞之间发生联系,形成交错的复杂网络,迁出的细胞经免疫组化鉴定几乎都是呈NF200免疫染色阳性。结论:大鼠DRG内存在有神经干细胞,这些细胞可以分化为神经元和神经胶质细胞。
- 顾芸丁斐顾晓松
- 关键词：胚胎大鼠背根节细胞培养神经干细胞
- 帕金森病运动症状与并发症评估的研究进展被引量：1
- 2012年
- 帕金森病（Parkinson disease,PD）是一种病因不明的渐进性神经退行性疾病,是中老年人常见的运动障碍性疾病。据报道,帕金森病平均发病年龄60岁,从诊断到死亡的平均生存期为15年[1]。帕金森病的病因和发病机制十分复杂,至今仍未彻底明确。
- 魏其林王军
- 关键词：帕金森病运动症状并发症病史
- 小鼠骨髓基质细胞和蚕丝丝素材料的体外生物相容性被引量：4
- 2008年
- 目的研究体外培养的小鼠骨髓基质细胞(BMSCs)与蚕丝丝素材料的生物相容性,寻找BMSCs组织工程化神经的支架材料。方法通过贴壁法体外分离、培养小鼠(C57BL/6-GFP小鼠和C57BL/6小鼠)的BMSCs,与丝素共培养,通过光学显微镜和扫描电镜,观察细胞的黏附和生长情况。利用丝素浸出液培养BMSCs后,通过透射电镜观察细胞超微内部结构,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测丝素、羟基磷灰石、有机锡浸出液和普通IMDM培养基培养细胞12h、24h、48h、72h、7d的细胞活力,每组重复12次。流式细胞术检测丝素浸出液培养BMSCs的细胞周期及细胞表型,实验重复3次。结果通过光镜、电镜观察,发现小鼠BMSCs黏附着丝素纤维、并沿着丝素纤维延伸,一些BMSCs缠绕并包裹丝素纤维,黏附着丝素纤维的细胞有的呈圆,形有的呈梭形。与普通IMDM培养基培养的细胞相比,透射电镜下丝素浸出液培养后的BMSCs内部结构未见异常;丝素和羟基磷灰石浸出液对BMSCs的活力无显著性影响(P>0.05);丝素浸出液对骨髓基质细胞周期和表型无明显影响。结论蚕丝丝素与小鼠BMSCs有好的生物相容性,且丝素对BMSCs没有毒性作用,可作为BMSCs构建组织工程化神经的支架材料。
- 吴红胡楠杨宇民顾晓松
- 关键词：骨髓基质细胞丝素流式细胞术
- 壳寡糖对神经干细胞分化的影响被引量：8
- 2007年
- 目的:探讨壳聚糖的降解产物壳寡糖对神经干细胞分化的影响。方法:将壳聚糖降解为分子量1100能够溶于水的壳寡糖,然后将不同浓度的壳寡糖(0.1mg/ml,0.01mg/ml)与神经干细胞共培养12天,研究壳寡糖对神经干细胞分化的影响,对照组采用无壳寡糖培养。结果:实验组的神经干细胞分化的突起平均长度比对照组要长,表明一定浓度的壳寡糖能够促进神经干细胞的分化。结论:用壳聚糖制备人工神经移植物时,壳聚糖导管不仅在神经再生过程可起到支架,细胞依附的作用,同时其降解产物壳寡糖能够起到促进神经生长的作用,而进一步阐明壳聚糖具有多功能的生物学作用。
- 杨宇民林社裕刘梅丁斐顾晓松
- 关键词：壳聚糖壳寡糖神经干细胞神经细胞分化神经再生
- 大鼠Myostatin蛋白成熟肽的原核表达及纯化
- 2007年
- 目的:利用谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白表达系统在大肠杆菌中表达纯化Myostatin成熟肽。方法:应用RT-PCR从大鼠的腓肠肌mRNA中逆转录扩增Myostatin成熟肽编码序列,克隆入原核表达载体pGEX-4T1中,IPTG诱导其在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,采用Western-blot用抗-GST抗体验证融合蛋白表达。融合蛋白经Glutathione-agarose色谱纯化。结果:PCR扩增的Myostatin基因序列与GenBank数据库中的序列一致;30°C,0.1mmol/LIPTG诱导16小时,GST-Myostatin融合蛋白获得优化表达,表达效率为25%;Western-blot证实融合蛋白的特异性表达。结论:成功构建融合蛋白GST-Myostatin重组基因,并在大肠杆菌中获得有效表达,为Myostatin抗体的制备及进一步研究该蛋白的功能奠定基础。
- 王莉莉黄丽刘梅顾晓松
- 关键词：原核表达融合蛋白
- 坐骨神经横断伤后远侧段组织的形态学及相关因子表达变化被引量：2
- 2011年
- 目的:通过制备GFP小鼠和B6小鼠坐骨神经横断伤模型,应用免疫组化技术以及RealTime-PCR技术观察和分析周围神经损伤后远侧段组织的形态学及相关因子表达变化。方法:制备GFP小鼠坐骨神经横断伤模型,应用免疫组化技术分别染色S100蛋白以显示施万细胞,染色NF蛋白以显示轴突;结合GFP小鼠的自发荧光以及Hoechst核染观察横断伤后不同时间点远侧段组织的形态学变化。制备B6小鼠坐骨神经横断伤模型,应用RealTime-PCR技术检测横断伤后远侧段组织中相关营养因子BDNF、NGF、CNTF及抗凋亡因子Bcl-2 mRNA的表达变化。结果:坐骨神经横断伤后,远侧段施万细胞S100蛋白的表达第7天时达到高峰,第14天时下降,形成狭长细胞索带;第21～28天时仅少数细胞S100蛋白阳性。远侧段NF免疫组化产物于横断伤后第7天时断裂呈碎片状,第28天时碎片亦基本消失不见。远侧段非特异核染数目随损伤时间延长而增加。同时,在远侧段整个溃变过程中,神经基膜管结构仍然可见。坐骨神经横断伤后,BDNF mRNA表达第1～3周内逐渐上调,其中第3周时达到高峰(P<0.01),第4周时下降到与正常值相比无统计学意义的水平。NGF mRNA表达第1周时达到高峰(P<0.01),第2周时比第1周有小幅下降,但仍然具有统计学意义(P<0.01),第二周以后下降到与正常值相似的水平。CNTF mRNA表达则在损伤后第1周时下降了35%,第2周时继续下降到正常水平的42.7%,其下降均具有统计学意义(P<0.01),第3周时有所回升,第4周时下降到低点。Bcl-2 mRNA表达在损伤后第1周时下降,第2、3周时上升,第3周时达到高峰,并且上升具有统计学意义(P<0.01)。结论:坐骨神经横断伤后4周,远侧段神经组织中神经基膜管结构仍然存在。神经营养因子BDNF、NGF、CNTF mRNA的表达时相不同,提示其表达调控机制不同。Bcl-2 mRNA表达变化与施万细胞凋亡相关。
- 刘恩辰王鸿奎王亚先张沛云顾晓松
