中央高校基本科研业务费专项资金(JKQ2011043)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- PEG修饰对溶菌酶体外折叠过程的影响
- 2012年
- 以溶菌酶为模型蛋白,通过活性测定比较了PEG修饰前后溶菌酶复性动力学的差异,同时利用圆二色谱、色氨酸荧光谱等方法比较了PEG修饰前后蛋白质折叠过程中构象变化。结果显示:PEG修饰改变了溶菌酶复性动力学过程,使溶菌酶在低浓度变性剂条件下快速折叠。色氨酸荧光谱结果显示,PEG修饰对溶菌酶折叠过程中疏水微环境的形成有明显影响,稳定了溶菌酶折叠过程中的"熔球态",从而提高了溶菌酶正确折叠的概率。
- 田浤申庆亮姚东宁李闻
- 关键词：PEG修饰荧光光谱圆二色谱
- 可诱导高拷贝的正交琥珀抑制性tRNA筛选质粒的构建被引量：1
- 2013年
- 为筛选获得对大肠杆菌氨酰合成酶具有高度正交性的琥珀抑制tRNA,建立了一种基于可诱导高拷贝质粒的筛选系统。利用乳糖操纵子对oriL复制子进行调控,有IPTG存在时使其携带的琥珀抑制性tRNA大量转录。正交性不高的琥珀抑制性tRNA大量转录时导致宿主菌死亡,只有携带高正交性的琥珀抑制性tRNA的克隆可以存活,从而达到筛选目的。利用这一筛选质粒,构建了琥珀抑制性tRNA突变文库,并进行了筛选,获得了与大肠杆菌氨酰tRNA合成酶具有高度正交性的突变体,并利用含琥珀抑制突变的半乳糖苷酶突变体进行了验证,证实利用可诱导高拷贝的筛选质粒可筛选出高正交性的琥珀抑制性tRNA突变体。
- 姚东宁徐晓威于涣冰李尤李星高向东田浤
