辽宁省教育厅高等学校科学研究项目(2004D180)
- 作品数:3 被引量:20H指数:3
- 相关作者:王力宁马健飞李志明马犁丁红更多>>
- 相关机构:中国医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金:辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 脂多糖通过核因子-κB途径影响腹膜间皮细胞生长及TNF的表达被引量:9
- 2007年
- 目的研究脂多糖(LPS)是否通过核因子κB,即IκBα、NF-κBp65途径引起腹膜间皮细胞(peritonealmesothelial cells,PMC)凋亡、抑制细胞生长和诱导肿瘤坏死因子(TNF)的表达。方法胰蛋白酶-EDTA消化法用于PMC的原代培养、传代,经鉴定分组①不同浓度LPS组(正常对照组、0.1mg/L、1.0mg/L、10mg/L、50mg/L、100mg/L);②不同时间组LPS作用于PMC0、1、3、6、12、24h。Hoechst33258染色法检测PMC的凋亡;MTT法检测PMC的生长增殖抑制情况;免疫荧光法检测p65的活性;Western blot检测IκBα的表达;用L929细胞株检测TNF的活性;RT-PCR检测TNFα mRNA的表达。结果LPS抑制PMC生长并诱导凋亡、引起IκBα的降解、p65的核移位;LPS诱导PMC表达TNF,1hTNF-α mRNA达最大值、3hTNF-α活性达最大值。结论LPS可抑制PMC的生长及诱导凋亡;LPS诱导PMC表达TNF-α呈浓度依赖性,在LPS作用早期TNF-α明显升高,随后下降。这一过程中IκBα-NF-κBp65信号途径可能发挥了重要作用。
- 李志明马健飞王力宁
- 关键词:脂多糖腹膜间皮细胞核因子KAPPAB
- 左旋肉碱对高糖条件下人腹膜间皮细胞增殖、凋亡及纤维连接蛋白分泌的影响被引量:3
- 2006年
- 目的:探讨左旋肉碱对高糖条件下体外培养人腹膜间皮细胞增殖、凋亡及纤维连接蛋白(FN)分泌的影响。方法:以不同浓度左旋肉碱作用体外培养人腹膜间皮细胞,MTT法测定细胞增殖,Annexin V-FITC/PI双标记法检测细胞凋亡,ELISA法检测培养液中FN浓度。结果:不同浓度左旋肉碱作用24h后,0.1%左旋肉碱组细胞增殖活性显著升高(P<0.05),作用72 h后0.5%及1.0%左旋肉碱组细胞增殖活性明显降低(P<0.05)。作用48及72 h后0.05%及0.1%左旋肉碱组细胞凋亡率降低。作用24 h后0.05%左旋肉碱组培养液中FN浓度升高(P<0.05),作用72 h后左旋肉碱组培养液中FN浓度均下降(P<0.01)。结论:高糖条件下一定浓度的左旋肉碱可以促进人腹膜间皮细胞增殖、减少其凋亡。
- 马犁马健飞丁红樊怡李志明王力宁
- 关键词:左旋肉碱人腹膜间皮细胞
- 大肠杆菌脂多糖对腹膜间皮细胞己糖激酶活性的影响被引量:13
- 2006年
- 目的:观察大肠杆菌脂多糖对原代培养的大鼠腹膜间皮细胞己糖激酶活性的影响;探讨其活性与葡萄糖净利用的关系,初步阐释腹膜透析相关性腹膜炎引起腹膜透析失超滤的机制。方法:利用胰蛋白酶消化法行大鼠腹膜间皮细胞的原代培养及传代,第2代细胞经鉴定及同步化后进入实验;用含不同浓度的大肠杆菌脂多糖(0、0.1、1.0、10、50、100 mg/L)刺激细胞3 h,另用10 mg/L脂多糖分别刺激1、3、6、12、24 h,利用6-磷酸葡萄糖脱氢酶偶联比色法观察腹膜间皮细胞己糖激酶活性的变化;利用比色法观察细胞葡萄糖净利用量。结果:大肠杆菌脂多糖对大鼠腹膜间皮细胞己糖激酶活性的影响呈剂量和时间依赖性并伴有细胞葡萄糖净利用的增加。结论:大肠杆菌感染性腹膜炎时,其脂多糖通过影响腹膜间皮细胞己糖激酶的活性参与腹膜透析失超滤的过程。
- 李志明马健飞王力宁
- 关键词:脂多糖类己糖激酶