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国家高技术研究发展计划(2006AA02A245): 作品数：46 被引量：139H指数：6; 相关作者：王蓉李红霞钟惟德何慧婵韩兆冬更多>>; 相关机构：首都医科大学宣武医院北京世纪坛医院广州市第一人民医院更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金北京市卫生系统高层次卫生技术人才培养项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

罗格列酮与阿尔茨海默病被引量：9: 2011年; 随着人类步入老龄化社会,阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的发病率不断增加,但其发病机制仍不明确,缺乏有效的治疗手段。近年来研究发现AD的患病风险与2型糖尿病具有一定相关性。有证据表明,治疗2型糖尿病的噻唑烷二酮类氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ)激动剂罗格列酮可以改善AD患者和AD动物模型中与此疾病相关的病理变化和学习记忆功能。本文对以上内容和罗格列酮对AD的作用机制进行综述。; 张旭王蓉; 关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体Γ 罗格列酮阿尔茨海默病 Β-淀粉样肽炎性反应载脂蛋白E

血管内皮生长因子在终末期肾细胞癌中的表达及其意义被引量：1: 2008年; 目的检测终末期。肾细胞癌动物模型血管内皮生长因子（VEGF）血浆水平，探讨肾细胞癌侵袭力标记物的相关性。方法以人肾癌细胞grc-1经皮下植入裸鼠的背部建立终末期细胞癌模型，对实验裸鼠血浆VEGF水平检测，并进行统计学分析。结果在肿瘤植入度为（4500±2340）ng/L，而对照组裸鼠血浆VEGF浓度几乎未发现变化。结论VEGF表达强度与肾癌细胞的侵袭能力呈正相关，血浆VEGF浓度越高，肾癌细胞的侵袭能力越强。; 钟惟德梁宇翔何慧婵韩兆冬毕学成戴奇山叶永康陈清标秦卫军陈志南张阳德; 关键词：VEGF 肾细胞癌

昆虫杆状病毒表达系统表达TCRγ9/δ2-Fc融合蛋白及其生物学功能的初步鉴定被引量：1: 2009年; 目的建立昆虫杆状病毒表达系统表达TCRγ9/δ2-Fc融合蛋白技术平台并鉴定其表达产物的生物学功能。方法用搭桥PCR获得γ9Fc和δ2(OT3)Fc基因片段,构建成pBACp10ph-γ9/δ2(OT3)-Fc重组质粒,与AcNPV昆虫病毒DNA共转染昆虫sf9细胞,表达TCRγ9/δ2-Fc融合蛋白;Western blot鉴定TCRγ9/δ2-Fc蛋白表达位置;胞内流式细胞仪检测γ9Fc和δ2(OT3)Fc两基因表达效率;蛋白G亲和层析后,SDS-PAGE鉴定蛋白纯度;激光共聚焦扫描显微镜技术和生物传感器技术检测了TCRγ9/δ2-Fc蛋白与SKOV3细胞和MNS蛋白的结合特性。结果成功构建pBACp10ph-γ9/δ2(OT3)-Fc表达载体,经鉴定发现TCRγ9/δ2-Fc蛋白在sf9细胞内表达,但γ9Fc和δ2(OT3)Fc两基因的表达效率有较大差异。纯化得到一定纯度的TCRγ9/δ2-Fc蛋白,并且具有与SKOV3细胞和MNS蛋白结合的特性。结论成功建立昆虫杆状病毒表达系统表达TCRγ9/δ2-Fc融合蛋白的技术平台,表达产物TCRγ9/δ2-Fc可以在体外模拟TCRγδ识别抗原的特性。; 郭阳郑静胡愉崔莲仙何维; 关键词：昆虫杆状病毒表达系统

淀粉样前体蛋白转基因痴呆模型小鼠视网膜和视神经纤维层病理改变被引量：2: 2012年; 目的观察淀粉样前体蛋白(amyloid precusor protein,APP)转基因痴呆(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠视网膜组织病理和视神经纤维记数的改变。方法本实验采用6只10月龄的C57BL/6JAPP转基因雄性小鼠模型作为模型组,6只同月龄的C57BL/6J正常雄性小鼠作为正常对照组。处死小鼠,完整取出眼球分离视网膜,进行视网膜常规HE染色,同时取球后视神经制作半薄切片,甲苯胺蓝染色,光镜观察视神经形态,行图像分析和轴突纤维计数。结果视神经横断面模型组小鼠与正常对照组相比:神经纤维组织疏松,排列较紊乱,染色深浅不均,间质增多,部分轴突水肿。与正常对照组(1.77±0.04)×106相比,模型组小鼠视神经纤维数量(2.28±0.06)×106明显减少,视神经纤维密度正常对照组和模型组分别为(0.3836±0.0697)μm-2和(0.2701±0.0517)μm-2,差异有统计学意义(P<0.01)。模型组神经细胞平均光密度值无明显变化,与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与正常对照组比较,模型组小鼠视网膜神经节细胞层细胞数量明显减少,差异有统计学意义(P<0.01),两组内颗粒层和外颗粒层细胞数量无明显变化,差异无统计学意义(均为P>0.05)。结论 APP转基因AD模型小鼠视网膜神经节细胞数减少,视神经纤维数明显减少而且受损,提示APP转基因AD模型小鼠视网膜和视神经存在退行性病变。; 卢艳董海莲张丽娜王蓉

APP5肽类似物P165和罗格列酮对SH-SY5Y细胞IRS-1和p-CREB表达的影响被引量：2: 2011年; 目的观察APP5肽类似物P165和罗格列酮(rosiglitazone)对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)损伤人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞后,胰岛素信号通路相关因子IRS-1和p-CREB表达水平的影响。方法将人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞分为对照组、STZ损伤模型组(STZ 0.8 mmol/L)、罗格列酮保护组(STZ 0.8 mmol/L+罗格列酮20μmol/L),APP5肽类似物P165保护组(STZ 0.8 mmol/L+P165 30μmol/L),进行细胞形态观察,IRS-1和p-CREB免疫细胞荧光染色观察,采用image-pro plus图像分析软件测定平均吸光度值。结果与对照组相比,STZ损伤组细胞生长分裂减慢、突起缩短,细胞胞体皱缩,IRS-1和p-CREB免疫荧光染色强度减弱;与STZ损伤组相比,罗格列酮组和P165组突起伸展,细胞形态和细胞胞体皱缩现象明显改善,细胞出现强荧光染色。平均吸光度值测定结果显示:与对照组相比,STZ损伤组IRS-1和p-CREB平均吸光度值降低(P<0.008),与STZ损伤组相比,P165组和罗格列酮组平均吸光度值有所上升,差异均有统计学意义(P<0.008)。结论 APP5肽类似物P165和罗格列酮可能通过增加IRS-1、p-CREB的表达来改善STZ对于SH-SY5Y细胞的损伤,从而达到保护神经元的作用。; 张景燕王蓉赵静姝姬志娟赵志炜盛树力; 关键词：罗格列酮胰岛素受体底物-1 P-CREB

前列腺癌与前列腺增生Ki-67/PCNA mRNA特异性表达比值的研究被引量：2: 2009年; 目的以实时荧光定量RT-PCR技术研究良性前列腺增生(BPH)与前列腺癌(PCa)组织标本Ki-67蛋白和组织核增殖抗原(PCNA)mRNA的比值,探讨此比值在PCa诊断中的特异性意义。方法通过实时荧光定量RT-PCR检测63例PCa和37例BPH前列腺组织Ki-67/PCNAmRNA的表达,比较其在PCa与BPH组织中定量的差异。结果BPH与PCa组织Ki-67/PC-NA mRNA的定量表达值分别为2.264±0.460与5.905±0.780,差异有统计学意义(P<0.05)。结论实时荧光定量RT-PCR检测Ki-67/PCNA mRNA为PCa的诊断提供了可靠的辅助指标。; 钟惟德张阳德毕学成叶永康韩兆冬戴奇山梁宇翔蔡岳斌何慧婵; 关键词：前列腺肿瘤实时荧光定量RT-PCR

错配修复基因2与卵巢癌紫杉醇化疗耐药相关性研究被引量：5: 2015年; 目的检测人类错配修复基因2(human mismatch repair gene2,hMSH2)在卵巢癌紫杉醇耐药细胞株及卵巢癌组织中蛋白表达的变化,探讨其与卵巢癌紫杉醇化疗耐药的相关性。方法选用卵巢癌紫杉醇耐药细胞株SKOV3/TAX及敏感细胞株SKOV3,选取北京世纪坛医院2010-01-01-2014-06-30卵巢癌患者石蜡标本58例,其中紫杉醇化疗后复发行二次手术的患者标本19例(化疗组),术前未化疗患者39例(未化疗组)。采用免疫组化二步法,检测卵巢癌细胞及组织中hMSH2蛋白表达。结果耐药细胞株SKOV3/TAX中hMSH2蛋白表达强度为50 214.64±27 218.39,明显高于敏感细胞株SKOV3的11 791.79±7 385.98,P=0.016;卵巢癌组织中化疗组hMSH2蛋白表达累积光密度值为74 322.52±27 162.82,较未化疗组的57 244.96±24 332.86明显增加,P=0.019;化疗组及未化疗组两组患者在病理分级(P=0.366)、病理类型(P=0.768)和手术病理分期(P=0.533)差异均无统计学意义;全部卵巢癌组织中hMSH2蛋白表达在病理分级(P=0.161)、病理类型(P=0.649)和手术病理分期(P=0.519)中的分布差异均无统计学意义。结论错配修复基因hMSH2在卵巢癌紫杉醇耐药细胞株及组织中表达上调可能与紫杉醇耐药机制有关。; 李健李红霞; 关键词：卵巢癌紫杉醇耐药

TGF-β_1影响人牙周膜成纤维细胞分泌基质金属蛋白酶-1的初步研究被引量：3: 2010年; 目的:研究转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)在体外对人牙周膜成纤维细胞(human peri-odontal ligament fibroblasts,HPDLFs)分泌基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)的影响,进而探讨TGF-β1对HPDLFs分泌MMP-1的调控作用,以期为通过生物学途径建立防治正畸过程中牙根吸收的有效方法提供理论依据。方法:原代培养HPDLFs,取传代至第5代HPDLFs实验。设立TGF-β1工作浓度梯度:0.03ng/ml、0.05ng/ml、0.07ng/ml、0.09ng/ml;0ng/mlTGF-β1为空白对照组;选取4h、8h、12h、24h、48h5个时间点收获上清液。双抗体夹心酶联免疫吸附实验(enzyme-linked-immunosorbent serologic assay,ELISA)法检测各样本中MMP-1含量。采用多元线性回归方法分析实验结果。结果:MMP-1分泌量与TGF-β1作用时间总体上存在时间依赖性,具有统计学差异,P<0.05。但各作用时间下MMP-1分泌量与TGF-β1工作浓度并没有表现出一致的剂量依赖关系;4h时各实验组MMP-1分泌量随TGF-β1浓度的递增而下降;8h、12h、24h时,各实验组MMP-1分泌量与TGF-β1工作浓度基本呈正相关;48h时各组MMP-1含量变化较大没有明显趋势。结论:MMP-1分泌量与TGF-β1作用时间存在显著时间依赖性,TGF-β1可通过促进MMP-1分泌参与正畸过程中牙根吸收的发生和发展。; 刘琦曹军黎志东解涵刘馨蔚徐静李新平; 关键词：牙根吸收转化生长因子Β1 基质金属蛋白酶-1 牙周膜成纤维细胞

阿尔茨海默病模型小鼠视网膜退行性变研究被引量：2: 2012年; 目的探讨淀粉样体蛋白（APP）／早老素1（PS1）双转基因阿尔茨海默病（AD）转基闪小鼠视网膜是否存在退行性变。方法11月龄APP／PS1双转基因AD模型雌性小鼠6只，同月龄同背景非转基因雌性小鼠6只作为正常对照。完整取出左眼球做石蜡切片行Tunel检测，行视网膜凋亡细胞计数。结果视网膜凋亡细胞计数：对照组与模型组视网凋亡细胞数分别是每视野（6．0±1．7），（13．2±2．8）个；2组视网膜凋亡细胞比较，模型组视网膜凋亡细胞增加（P〈0．05）。结论APP／PS1双转基因AD模型小鼠视网膜细胞凋亡增加，而且主要发生在节细胞层。; 卢艳唐娜王蓉; 关键词：阿尔茨海默病细胞凋亡

JAK2,HSP基因蛋白表达与卵巢癌紫杉醇化疗耐药相关性的研究: 2014年; 目的检测卵巢癌细胞株及紫杉醇化疗后卵巢癌组织中JAK2,HSP,基因蛋白表达的变化,探讨其与卵巢癌紫杉醇化疗耐药的关系及临床意义。方法选用卵巢癌紫杉醇耐药细胞株SKOV3/TAX及敏感细胞株SKOV3,及58例卵巢癌组织,包括卵巢癌术后及紫杉醇化疗后复发患者19例(化疗组),术前未化疗患者39例(未化疗组)。采用免疫组化二步法,检测卵巢癌组织及细胞中JAK2,HSP基因的蛋白表达。结果 1.光镜下观察SKOV3/TAX细胞株中JAK2、HSP蛋白表达强度均明显高于SKOV3细胞株;组织中化疗组与未化疗组相比JAK2,HSP的蛋白表达累积光密度值均明显增加(分别为:36987.38±16873.42 vs 27756.29±7136.09;34905.64±12361.87 vs 26684.56±12662.24),差异均有统计学意义(P<0.05)。2.各基因蛋白表达在临床分期,分化程度和病理类型中均无显著性差异。3.JAK2、HSP基因蛋白表达两者间呈正相关关系(r=0.330,P=0.011)。结论 JAK2、HSP基因蛋白表达上调可能与卵巢癌紫杉醇化疗耐药有一定相关性。; 李健李红霞; 关键词：JAK2 HSP 卵巢癌紫杉醇耐药

国家高技术研究发展计划(2006AA02A245)

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