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国家自然科学基金(20476085)

作品数：16 被引量：63H指数：6
相关作者：范代娣骆艳娥马晓轩薛文娇米钰更多>>
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文献类型

  • 13篇中文期刊文章

领域

  • 5篇生物学
  • 4篇化学工程
  • 3篇轻工技术与工...
  • 3篇医药卫生
  • 2篇理学

主题

  • 9篇胶原
  • 9篇胶原蛋白
  • 8篇类人胶原蛋白
  • 4篇重组大肠杆菌
  • 4篇细胞
  • 3篇高密度发酵
  • 2篇生长速率
  • 2篇基因
  • 2篇基因重组
  • 2篇工程菌
  • 2篇杆菌
  • 2篇比生长速率
  • 2篇BHK-21...
  • 2篇补料
  • 2篇纯化
  • 1篇蛋白
  • 1篇动力学
  • 1篇毒性
  • 1篇增殖
  • 1篇质粒

机构

  • 13篇西北大学
  • 2篇长安大学
  • 1篇西安工程大学
  • 1篇西北农林科技...

作者

  • 13篇范代娣
  • 6篇骆艳娥
  • 4篇马晓轩
  • 3篇花秀夫
  • 3篇张兮
  • 3篇薛文娇
  • 3篇米钰
  • 2篇王晓军
  • 2篇王小刚
  • 1篇程宁
  • 1篇刘树文
  • 1篇侯文洁
  • 1篇迟雷
  • 1篇李荣
  • 1篇费强
  • 1篇朱晨辉
  • 1篇王德伟
  • 1篇惠俊峰
  • 1篇尚龙安
  • 1篇段志广

传媒

  • 7篇西北大学学报...
  • 2篇中国生物工程...
  • 1篇中国医药工业...
  • 1篇化学工程
  • 1篇西北农林科技...
  • 1篇化学与生物工...

年份

  • 1篇2009
  • 2篇2008
  • 2篇2007
  • 5篇2006
  • 3篇2005
共 16 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
离子交换批量层析纯化重组类人胶原蛋白Ⅱ被引量：6
2006年
对阳离子交换树脂CM52纯化类人胶原蛋白Ⅱ(Hum an-like Collagen B ioprote inⅡ,HCBⅡ)的合适条件进行了研究。通过实验,确定了批量层析的最佳操作条件,即在pH=4.0、NaC l 0.15 mol/L、进料质量浓度7 mg/mL、处理量17.26 mL/g进行吸附,吸附时间为60 m in,然后在pH=4.0、NaC l 0.30 mol/L下进行脱附。实验表明:采用批量层析吸附HCBⅡ后上柱洗脱,树脂CM52对HCBⅡ的吸附量可达到48.6 mg/g,回收率83.8%,最终纯化的HCBⅡ达电泳纯,相对分子质量为97k。
薛文娇范代娣尚龙安鱼奇鳞
关键词：离子交换
类人胶原蛋白基因工程菌诱导后比生长速率优化
2008年
目的优化类人胶原蛋白基因工程菌高温诱导后的比生长速率。方法通过分析不同比生长速率下发酵液中菌体浓度、类人胶原蛋白浓度、细胞得率系数(YX/S)、产物得率系数(YP/S)的变化,确定诱导后的最佳比生长速率。结果当比生长速率为0.04～0.05h-1,细胞浓度和类人胶原蛋白的浓度分别可达69.5g/L(DCW)和13.8g/L。结论诱导后的比生长速率对细胞生长、类人胶原蛋白的合成均产生显著性影响。
骆艳娥范代娣米钰马晓轩迟雷王小刚
关键词：类人胶原蛋白重组大肠杆菌比生长速率
基因重组大肠杆菌表达类人胶原蛋白诱导条件优化研究被引量：7
2005年
为了提高重组大肠杆菌BL 21高密度发酵生产类人胶原蛋白的产量,分别研究了诱导时 机、乙酸浓度、诱导强度以及补氮方式对外源基因表达的影响,并对各因素进行了优化。采用补 料-分批式发酵,初始装液体积为6L。最终细胞密度可达到84.3g／L,类人胶原蛋白的表达量为 14.6g/L。结果表明:在对数生长的中后期进行诱导,尽量减少乙酸的积累量,42℃诱导3h后降温 至39℃继续诱导,并采用每隔10min补36ml补料氮溶液的周期操作方式,有利于细胞的生长和 外源蛋白的表达。
马晓轩范代娣骆艳娥米钰
关键词：类人胶原蛋白大肠杆菌表达基因重组外源基因表达细胞密度积累量
BHK-21细胞在生物材料溶液中黏附及增殖比较被引量：2
2007年
目的比较BHK-21细胞在3种生物材料溶液中黏附及增殖情况,探讨以类人胶原蛋白为基础制备组织工程材料的可行性。方法将BHK-21细胞分别种植于类人胶原蛋白、壳聚糖、透明质酸以及共混溶液中,在倒置显微镜下观察细胞的黏附和生长情况,并利用MTT方法检测种植后1～5 d细胞的增殖情况。结果BHK-21细胞种植12 h,类人胶原蛋白、壳聚糖以及两者共混溶液能显著促进BHK的黏附(P<0.01);BHK-21细胞在类人胶原蛋白溶液及类人胶原蛋白与其他生物材料共混溶液中功能活跃,维持其形态且能持续增殖,其中类人胶原蛋白/壳聚糖共混溶液促细胞增殖能力最强。结论类人胶原蛋白能够维持BHK细胞的生长与繁殖,在组织工程领域是一种极有潜力的组织工程材料。
王德伟范代娣费强
关键词：类人胶原蛋白MTT
周期操作对重组大肠杆菌高密度发酵表达类人胶原蛋白的影响被引量：2
2006年
采用补料一分批式发酵,研究了4种不同间歇周期补氮操作对细胞生长和类人胶原蛋白表达的影响,以及发酵过程中细胞质粒稳定性、细胞菌落形成能力和乙酸生成量的变化。结果表明,在每隔10min连续补加 36mL补料氮溶液(22s完成补加操作)的周期操作下,细胞质粒稳定性明显提高,细胞菌落形成能力下降较小,乙酸生成量低,仅0．7 g／L,最终细胞密度为84 g／L,类人胶原蛋白表达量可达到14 g／L,在4种操作方式中最高。
马晓轩范代娣刘树文骆艳娥
关键词：重组大肠杆菌高密度发酵类人胶原蛋白质粒稳定性细胞活性
固相金属亲和层析纯化重组类人胶原蛋白被引量：2
2008年
目的研究利用固相金属亲和层析纯化重组类人胶原蛋白的洗脱方法,以优化分离纯化的条件。方法将吸附了重组类人胶原蛋白的层析柱采用降低pH,增大离子强度和增大NH_4Cl浓度3种方法进行洗脱。结果采用增大NH_4Cl浓度的方法进行洗脱所得的洗脱峰面积最大,洗脱体积最小,纯化后重组类人胶原蛋白的纯度达97.9%,回收率为68.6%,纯化倍数为2.78。结论采用固相金属亲和层析纯化重组类人胶原蛋白是可行的,可有效地对重组类人胶原蛋白进行纯化。
王晓军骆艳娥范代娣
关键词：纯化
重组大肠杆菌分批-补料培养生产类人胶原蛋白的过程控制被引量：12
2005年
目的优化重组大肠杆菌高密度发酵的调控工艺。方法通过考察比生长速率、3种控氧方式以及诱导强度对细胞和类人胶原蛋白产量的影响,确定最佳的发酵工艺。结果比生长速率显著影响类人胶原蛋白的产量,且最适比生长速率为0.15～0.20h-1;在提高罐压的条件下,细胞和类人胶原蛋白的浓度均显著高于其他两种控氧方式,充入富氧空气的细胞和类人胶原蛋白的浓度均最低;诱导强度对细胞生长和蛋白质表达的影响非常大,当细胞浓度达47±2g/L(DCW)时,开始升温至42℃进行诱导,最佳条件为42℃保温2～3h,然后降温至39℃继续培养5～6h。结论通过优化重组大肠杆菌分批补料培养生产类人胶原蛋白的工艺,使得细胞和类人胶原蛋白浓度分别达68.94g/L(DCW)和13.02g/L。
骆艳娥范代娣花秀夫张兮王小刚
关键词：类人胶原蛋白重组大肠杆菌比生长速率
壳聚糖金属螯合亲和吸附剂的制备被引量：7
2009年
目的研究利用壳聚糖为载体、戊二醛为交联剂、亚氨基二乙酸(IDA)为螯合配基制备金属螯合亲和吸附剂的条件。方法戊二醛对壳聚糖进行交联,环氧氯丙烷法进行载体活化和螯合配基的偶联。键合IDA后与Cu2+螯合。结果采用0.22 mL/g(壳聚糖)戊二醛对壳聚糖进行交联。交联壳聚糖加入0.4 mol/L NaOH与体积分数为0.5的二甲亚砜的混合溶液中,充分搅匀,25℃下缓慢滴加1.2 mL(体积分数为0.3)的环氧氯丙烷,升温至40℃,170 r/min下振荡反应3h进行活化。之后,以4.26 g/g(壳聚糖)浓度的IDA进行连接反应,65℃下反应18 h。结论采用优化条件制备的金属螯合亲和吸附剂对Cu2+有较大螯合量,可用作固定化金属亲和层析的固定相。
王晓军范代娣任妍君
关键词：壳聚糖交联螯合
重组类人胶原蛋白Ⅱ的表达与纯化被引量：4
2006年
研究了类人胶原蛋白Ⅱ在基因工程菌E.coliBL213.7中的表达与纯化。经高密度发酵及代谢调控,重组菌在12.8L发酵罐中的最终菌体密度约为150。菌体经高压匀浆破碎、沉淀、超滤、阳离子交换色谱纯化后,表达产物纯度达96.4%,总回收率71.6%。
侯文洁范代娣薛文娇张卫刚鱼麒麟
关键词：高密度发酵纯化
重组类人胶原蛋白工程菌补料发酵过程建模
2006年
对产类人胶原蛋白的重组大肠杆菌Escherichia coli(E．coli)的批式和分批-补料培养动力学进行了研究。通过检测发酵过程的基质浓度、菌体量和产物浓度,建立了一组反映发酵的动力学模型,并考虑了非工程菌存在的影响,分析了细胞生长、底物消耗、基因工程产物生成的过程, 结果显示该动力学模型可以很好地拟合发酵过程。
米钰花秀夫范代娣张兮
关键词：动力学发酵胶原蛋白
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