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饲料中黄曲霉毒素B1的纳米金修饰电化学免疫传感器研究被引量：9: 2009年; 同时固定四羧基酞菁钴Ⅲ(CoPc)、HRP酶标记黄曲霉毒素B1抗体(HRP-Ab-AFB1)以及纳米金微粒在玻碳电极表面的Nafion膜上,制备了可用于快速测定饲料中黄曲霉毒素B1(AFB1)的新型电化学传感器(GCE|Nafion/CoPc/Au/HRP-Ab-AFB1)。CoPc对H2O2的还原具有催化作用;当该传感器在含AFB1样品的溶液中温育20min后,AFB1与Ab-AFB1的免疫结合导致HRP的活性中心与CoPc之间的电子传递被部分阻碍,使HRP对H2O2电催化氧化电流Io降低。ΔIo与AFB1浓度在1.0～200ng/mL呈线性关系,检测限为0.5ng/mL。该传感器检测AFB1基于一步免疫反应,温育时间短,较酶联免疫吸附法(ELISA)快速灵敏,为饲料中的黄曲霉毒素快速现场检测提供了新的技术平台。; 干宁王峰刘飞李天华郑磊; 关键词：免疫传感器黄曲霉毒素B1 饲料

基于碳纳米管修饰的无酶型新型甲胎蛋白安培免疫传感器研究被引量：1: 2011年; 目的构建新型甲胎蛋白安培免疫传感器。方法首先在玻碳电极(GCE)表面修饰一层羧基化碳纳米管(CNTs),然后利用带负电荷的DNA分子和带正电荷的硫堇之间的静电作用,层层自组装修饰硫堇以增强检测信号,然后利用硫堇的氨基固定纳米金,以便固定抗体,最后利用牛血清白蛋白封闭未结合位点。结果修饰的碳纳米管能够显著地提高电极的导电性,利用层层组装技术修饰了5层硫堇。在优化的条件下(pH7.0,温浴时间25min),制作的甲胎蛋白免疫传感器线性范围在0.5～25ng/ml内,检测限0.02ng/ml。结论成功利用层层自组装技术构建新型基于碳纳米管修饰的无酶型甲胎蛋白安培免疫传感器,该传感器灵敏度高,特异性好,有望成为原发性肝癌早期诊断的新方法。; 贾立永郑磊干宁Wen Wang王前; 关键词：碳纳米管层层组装 DNA 硫堇

采用抗体包被金磁纳米微粒修饰电极的HIV p24/gp36安培联检芯片被引量：5: 2009年; 研制了以聚碳酸酯为基底的双通道安培检测微流控免疫芯片,在其中分别集成了修饰有HIV核心抗原p24/gp36的单克隆一级抗体的纳米金修饰电极,并应用于人血清中p24和gp36抗原的同时分析.检测原理是：基于夹心免疫分析法,在电压驱动下,一次性加入含有p24和gp36样品及HRP酶标记的p24和gp36二级抗体溶液,与电极表面的一级抗体生成夹心免疫复合物;接着在体系中加入H2O2,以方波溶出伏安法检测免疫复合物上HRP催化H2O2的还原电流.在pH为6.2的磷酸缓冲液中,对HIV p24和gp36的检测时间均少于2 min,线性范围为0.5-400μg/L,检测限为0.25μg/L.该芯片集成了加样、分离和检测系统,检测时间短,灵敏度明显高于传统的酶联免疫吸附分析法,可应用于对艾滋病的早期诊断和大范围筛查.; 干宁李榕生陈亚东杨欣李天华; 关键词：方波溶出伏安法

基于磁性碳纳米管修饰印刷电极的无酶型HIV p24安培免疫传感器被引量：5: 2010年; 在多壁碳纳米管(MWNTs)表面固定Fe3O4(核)/Au(壳)纳米微粒(GMP),使其具有超顺磁性,包被p24抗体(anti p24),制得检测探针(MWNTs-GMP/anti p24);在磁场作用下将此探针吸附于N,N'-双(2-羟基苯亚甲基)邻苯二胺合铜(CuRb)修饰的碳基丝网印刷电极(SPCE|CuRb)表面,制得了免疫传感电极(SPCE|CuRb/MWNTs-GMP/anti p24)。当此电极在含p24样本中于室温下温育15min后,随p24浓度的增加在电极表面生成的免疫复合物增加,导致CuRb对H2O2的催化还原电流下降。在含5mmol/L H2O2的PBS(pH7.0)中和-300mV下,催化还原电流降低值ΔIo与p24浓度在0.6～160μg/L呈线性关系;检出限为0.32μg/L(3σ)。将其用于实际样品检测,结果与标准EILSA方法一致。由于MWNTs-GMP/anti p24具有超顺磁性,并可以显著提高电极比表面积及anti p24负载量,而CuRb代替易失活的HRP酶,使得该传感器灵敏度和稳定性俱佳,电极表面可更新,可用于艾滋病人血清中p24筛测。; 干宁罗乃兴李天华郑磊倪敏君; 关键词：碳纳米管

基于包被包膜糖蛋白抗体纳米金磁性微粒的无试剂安培免疫传感器被引量：1: 2009年; 在玻碳电极(GCE)表面固定对H2O2有催化还原活性的富马酸二甲酯联吡啶铜(GCE|CuL);再在GCE|CuL表面修饰一层金磁微粒-壳聚糖复合膜(nanoAu/Fe3O4/Chit),进而固定艾滋病毒(HIV)诊断标志物——包膜糖蛋白(gp160)抗体(antigp160),由此构建了一类快速检测gp160的无试剂安培免疫传感器。当该传感器在含gp160溶液中37℃下温育30min后,传感器表面生成的免疫复合物随gp160浓度的增大而增加,导致CuL对H2O2电催化还原效果降低,催化电流呈现下降趋势。在PBS溶液(pH7.0)和-300mV下,催化电流的降低值ΔIo与gp160浓度在1～400μg/L呈线性关系;检出限为0.5μg/L(3σ)。研制的免疫传感器检测gp160时,一步免疫反应即可得结果,较相同条件下包被gp160抗体的纳米金单分子层修饰电极灵敏度更高,检测范围更宽,有望用于艾滋病人血清标志物gp160快速筛测。; 于宁王鲁雁李天华郑磊王峰; 关键词：纳米金艾滋病毒包膜糖蛋白

HIV-1电化学活性-非活性开关分子信标的构建及验证: 2012年; 目的构建人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)电化学活性-非活性开关分子信标(CAs-MB)并验证其结构及功能。方法合成并纯化针对HIV-1 gag基因保守区序列的CAs-MB,用傅里叶变换红外光谱(FT-IR)和循环伏安法(CV)验证其结构,用差分脉冲伏安法(DPV)信号强度评价CAs-MB的识别功能。结果胭脂红酸(CA)单体与CAs-MB FT-IR图的变化证明CA已标记于MB末端,CV图证明CAs-MB电化学活性ON和OFF状态的存在。DPV结果证实其能够在电化学平台上实现对目标序列的特异性识别,且能够区分一个碱基的差异。结论 CAs-MB作为HIV-1 gag基因的特异性识别元件有望用于构建新型HIV-1电化学基因传感器。; 李博顾大勇司徒博李政良颜晓慧刘芹兰郑磊王前; 关键词：人类免疫缺陷病毒1型分子信标

人免疫缺陷病毒感染的实验室检测及进展被引量：6: 2010年; 实验室检测是诊断人免疫缺陷病毒感染的主要手段,可以从基因水平、蛋白水平和细胞水平进行检测。本文对HIV感染诊断的各种方法及进展作一概述。; 郑磊贾立永干宁王前; 关键词：人免疫缺陷病毒获得性免疫缺陷综合症

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广东省科技计划工业攻关项目(2008A050200006)