福建省科技重点项目(2011Y0026)
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
- 相关作者:胡建达王凌燕林敏辉更多>>
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- 核仁素调控急性T淋巴细胞白血病细胞耐药机制的研究
- 尽管白血病的治疗取得了值得肯定的进步,但是仍有10%-40%的BCR-ABL阴性的急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)患者无法取得完全缓解(complete remiss...
- 陈艳欣
- 关键词:急性淋巴细胞白血病ERK信号通路核仁素耐药机制
- 文献传递
- 急性白血病中核仁磷酸蛋白异常表达的研究进展被引量:1
- 2014年
- 核仁磷酸蛋白(NPM)是一种在各种类型的细胞中广泛表达的多功能蛋白质.NPM基因的异常表达可导致细胞的恶性增殖,参与肿瘤的发生与发展.NPM的基因表达异常主要有过表达、基因重排、基因突变三种情况.NPM高表达于增殖活跃的细胞中,参与实体瘤与白血病的发生、发展.NPM还可与其他基因(RARα、MLF1、ALK)形成致癌性的融合蛋白,促进急性早幼粒细胞白病(M3)、骨髓增生异常综合征(MDS)和淋巴瘤的发生.NPM1突变是导致白血病发生的主要分子事件之一,可以累及AML的多种亚型,影响AML的预后.文章就急性白血病NPM基因表达异常的进展作一综述.
- 王凌燕胡建达
- NPM1基因沉默的HL-60及其耐药细胞株的建立
- 2011年
- 本研究旨在构建针对HL-60细胞及其耐药细胞株(HL-60/ADR)的NPM1-RNAi的细胞模型,为研究NPM1基因在白血病耐药过程中的作用奠定实验基础。通过针对NPM1基因的shRNA与线性化的pGCSIL-GFP载体进行连接转化,对获得的重组子(pGCSIL-GFP-NPM1-shRNA)进行PCR和测序鉴定。采用慢病毒载体系统将pHelper 1.0载体、pHelper 2.0载体与pGCSIL-GFP-NPM1-shRNA共转染293T细胞,包装成NPM1-RNAi-LV,将慢病毒载体感染HL-60及HL-60/ADR细胞。采用实时定量RT-PCR和Western blot法分别从mRNA和蛋白水平验证建立的细胞株的转染效率。结果表明,成功构建了重组真核表达载体pGCSIL-GFP-NPM1-shRNA,并通过慢病毒载体系统包装成NPM-1-RNAi-LV;将NPM1-RNAi-LV转染至HL-60及HL-60/ADR细胞后,从mRNA水平上看,对细胞的NPM1 mRNA表达有显著抑制,达到90%以上(p<0.05);从蛋白水平上看,对细胞的NPM蛋白表达具有显著的抑制效果,表明转染后的HL-60及HL-60/ADR细胞的NPM1基因特异性沉默。NPM1基因沉默后,HL-60/ADR对阿霉素的耐药性有一定程度的下降。结论:成功构建了NPM1-RNAi的HL-60及HL-60/ADR细胞模型,为进一步研究NPM1基因在白血病耐药过程中的作用建立了良好的实验基础。
- 林敏辉胡建达
- 关键词:HL-60细胞HL-60/ADR细胞慢病毒载体