江苏省农业科学院科研基金(6110818)
- 作品数:2 被引量:2H指数:1
- 相关作者:邵乐杨杰翟频潘孝青白文霞更多>>
- 相关机构:江苏省农业科学院南京工业大学更多>>
- 发文基金:江苏省农业科学院科研基金江苏省农业三项工程项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 早孕因子多克隆抗体的制备及应用被引量:1
- 2011年
- 通过含有家兔早孕因子的重组质粒EPF-pET-32a(+)转化表达宿主菌Escherichia coli Rosetta,IPTG诱导,融合表达硫氧还原蛋白-兔早孕因子Trx-EPF。亲和层析纯化Trx-EPF,并在柱上进行肠激酶酶切,得到EPF蛋白并进行复性。EPF免疫波尔山羊,制备羊抗兔家兔早孕因子抗血清,硫酸铵沉淀纯化多克隆抗体,用于家兔早孕检测。Western-blot结果表明,羊抗兔家兔早孕因子多克隆抗体对家兔早孕的检出率达到100%。
- 杨杰张海涛翟频潘孝青邵乐
- 关键词:早孕因子家兔多克隆抗体
- 家兔早孕因子原核表达及重组蛋白的纯化、复性与鉴定被引量:1
- 2011年
- 通过已构建的含家兔早孕蛋白因子(EPF)基因的重组表达质粒,转化大肠杆菌Rosseta(DE3),在IPTG诱导下表达硫氧还原蛋白-家兔早孕因子融合蛋白(Trx-EPF)。结果显示蛋白表达量占菌体总蛋白的30%左右。重组家兔早孕因子融合蛋白(Trx-EPF)经过Ni2+柱纯化、柱上复性,浓缩以后溶液中蛋白浓度达到10 mg/mL,复性率达到13.1%。SDS-PAGE及Western Blot分析表明,在分子量30 ku左右处有一特异性蛋白条带。
- 杨杰张海涛翟频白文霞潘孝青邵乐
- 关键词:早孕因子家兔原核表达蛋白纯化