湖南省科技计划项目(06sk3064)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：李振振李灼日吴金术廖春红李淑芳更多>>
- 相关机构：湖南省人民医院更多>>
- 发文基金：湖南省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 黏蛋白1靶向小干扰RNA对胆管癌细胞侵袭力的影响被引量：3
- 2010年
- 目的 构建针对黏蛋白1（MUC1）的特异性小干扰RNA（siRNA）片段,体外观察其对人胆管癌细胞QBC939侵袭力的影响.方法 构建MUC1-siRNA,脂质体法体外转染QBC939,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测细胞中MUC1 mRNA的表达,Boyden小室法测定细胞的侵袭力.结果 双酶切、PCR及DNA测序证实MUC1-siRNA真核表达载体构建成功,转染MUC1-siRNA的细胞中MUC1 mRNA表达水平为（0.529±0.011）、明显低于对照组（0.524±0.008）和（0.329±0.010）（P＜0.01）,且细胞侵袭力（52.56±4.69）也显著低于对照组（160.17±9.79）和（155.67±8.86）（P＜0.01）.结论 成功构建了特异性MUC1-siRNA表达载体 该载体可有效抑制QBC-939中MUC1 mRNA表达,同时显著降低细胞的侵袭力.
- 李振振李灼日廖春红李淑芳吴金术
- 关键词：胆管癌RNA干扰黏蛋白类
- 靶向MUC1的siRNA表达载体的构建及鉴定
- 2010年
- 目的构建和鉴定针对黏蛋白1(MUC1)特异性的siRNA表达载体。方法人工合成一对互补并编码相应短发夹状MUC1-siRNA的寡核苷酸链,将其插入pGCsilencerTMU6/Neo/RNAi质粒载体中,用双酶切、阳性克隆聚合酶链反应(PCR)鉴定及DNA测序鉴定所构建的重组载体是否正确;以脂质体法将构建的重组载体导入人胆管癌细胞QBC939中,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western Blot)分别检测转染细胞中MUC1mRNA和蛋白的表达。结果双酶切、PCR鉴定及DNA测序证实MUC1-siRNA真核表达载体构建成功,转染该载体后的QBC939(干扰组)中MUC1mRNA及其蛋白质表达水平明显下调(P<0.05)。结论成功构建的特异性siRNA表达载体,转染QBC939后可特异性地封闭MUC1的表达,为进一步研究MUC1-siRNA载体提供了实验基础。
- 李灼日李振振李诤吴金术
- 关键词：胆管肿瘤RNA干扰黏蛋白类
