中国科学院知识创新工程重要方向项目(KSCX2-SW-318)
- 作品数：4 被引量：33H指数：3
- 相关作者：黄勇平苗雪霞李木旺代红久蒋容静更多>>
- 相关机构：中国科学院上海生命科学研究院中国农业科学院蚕业研究所西南大学更多>>
- 发文基金：中国科学院知识创新工程重要方向项目国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 利用鳞翅目来源的转座子piggyBac建立高效稳定的转基因家蚕技术被引量：18
- 2005年
- piggyBac转座子元件被成功应用于家蚕转基因.EGFP荧光蛋白基因作为筛选标志,受含有Pax-6结合位点的启动子控制,并能在家蚕的眼部组织中特异性表达.荧光筛选质粒和piggyBac转座子表达质粒被以混合物的形式显微注射到家蚕受精卵,获得出生的G0代蛾子700个,互相交配后,利用EGFP荧光筛选获得111个独立的转基因系.大部分转基因系在基因组上携有2个或多个插入拷贝,并且在整个项目过程中转基因的表型稳定遗传6代以上.对插入位点的序列鉴定发现,其插入位点两侧具有特异性TTAA序列,证实转基因的插入受到piggyBac转座子的调控.高效稳定的家蚕转基因技术的建立为家蚕后基因组的研究和蚕业工业的发展提供了基础.
- 代红久徐国江Thomas ean-luc王铸钢蒋容静费俭
- 关键词：鳞翅目转座子PIGGYBAC转基因技术家蚕荧光蛋白
- 利用SSR标记鉴定家蚕不同系统的品种初探被引量：10
- 2005年
- 选择能够区分中国系统和日本系统的分子标记对品种鉴定和杂交率检测具有重要意义。采用了17对微卫星标记(SSR)引物,对7个中系品种、7个日系品种和3个欧系品种及1个中系×日系杂交种进行了多态性分析。筛选出15对具有多态性的SSR引物,其中11对SSR引物在中系品种和日系品种间具有多态性,同时获得2个理想的SSR位点,其组合完全可以对供试的中系品种和日系品种进行鉴定。引物FL1148在中系的7个品种间的条带基本一致,在日系的7个品种间,除保存品种6048外,均具有一致的带型,保存品种6048具有和7个中系品种一致的带型,引物FL1113在6048和7个中系品种间的带型均不相同。引物FL1148和FL1125的PIC值分别为0.654、0.785,说明SSR标记引物FL1125能对家蚕品种进行有效鉴定。
- 郭秋红李木旺李明辉司科苗雪霞徐安英黄勇平
- 关键词：家蚕微卫星标记杂交率多态性
- 利用SAGE方法分析家蚕基因表达数目的初探被引量：1
- 2005年
- SAGE(serial analysis of gene expression)是基因表达水平差异分析和大规模发现新基因的分子生物学技术。已构建了家蚕卵、幼虫、蛹、成虫等4个不同发育时期的SAGE表达库,经测序分别得到69 100、62 232、63 966和62 666个基因标签序列,其中特异标签数目依次为17 718、13 243、14 044和15 224。这些特异标签数目即为家蚕在这4个不同发育时期的基因转录本数量。根据测序数与获得标签的数量动态监测,发现测序的数目尚未达到饱和,因此基因转录本的数目还可能会有所增加。在上述研究的基础上,利用SAGE数据为基础,采用双倒数作图求最大值的方法,推测出了家蚕在4个不同发育时期的基因表达数目,同时也发现家蚕卵期的基因表达数目远远大于其它3个时期。
- 黄健华王四宝苗雪霞黄勇平
- 关键词：家蚕标签
- 利用昆虫杆状病毒表达SARS冠状病毒的刺突蛋白和膜蛋白被引量：4
- 2006年
- SARS冠状病毒是人的严重急性呼吸综合征的病原体。对其他种类冠状病毒的研究结果显示,刺突蛋白(S蛋白)和膜蛋白(M蛋白)是病毒主要的结构蛋白。重组M蛋白和S蛋白可被用来作为抗原检测冠状病毒的感染和制备疫苗。这两个蛋白质分别被克隆并重组到昆虫杆状病毒基因组中,利用重组杆状病毒感染昆虫细胞来表达重组M蛋白和S蛋白,并对M蛋白进行了细胞内定位,融合蛋白的绿色荧光暗示了该蛋白质定位在细胞膜上。
- 贾世海周博吴峻李木旺潘敏慧鲁成苗雪霞黄勇平
- 关键词：冠状病毒刺突蛋白膜蛋白昆虫杆状病毒
