中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2009hzs1J007)
- 作品数:3 被引量:13H指数:2
- 相关作者:彭军黄俊生王国芬汪军杨腊英更多>>
- 相关机构:中国热带农业科学院中国农业大学更多>>
- 发文基金:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家科技支撑计划公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域:农业科学化学工程生物学更多>>
- 农杆菌浸润瞬时表达分析番木瓜miR162a的研究(英文)
- 2011年
- 农杆菌浸润瞬时表达方法不仅在蛋白互作、鉴定基因沉默抑制子及基因功能研究方面得到广泛应用,目前还应用在小RNA的研究中。在对植物microRNA的研究中,农杆菌浸润方法通过将将转基因导入农杆菌浸润本生烟瞬时表达,可以快速、稳定地对植物microRNA进行检测和鉴定,样品在几天内就可分析完成,比获得稳定遗传的转基因有优势。笔者借鉴国外拟南芥microRNA瞬时表达分析的方法,克隆了番木瓜的miR62a前体序列连接到双元表达载体pSuper1300上构建成35S::cpa-miR162a质粒,导入农杆菌GV3101后浸润本生烟,浸润后48 h提取本生烟叶片总RNA后通过miRNA northern blot检测到miR162a,而本生烟和番木瓜自身则无法检测到低丰度的miR162a。本文介绍的农杆菌浸润瞬时表达方法能够在体外加工产生成熟的miRNA,该技术有助于对microRNA的结构-功能的相关性及靶标验证进一步研究。
- 彭军杨腊英王国芬郭立佳汪军黄俊生
- 关键词:番木瓜瞬时表达分析MICRORNA
- 香蕉条斑病毒LAMP快速检测方法的建立被引量:7
- 2012年
- 环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种特异、灵敏、快速的新型基因检测技术。本研究以香蕉条斑病毒(Banana streak virus,BSV)ORF3保守区域为基础针对6个特定区域设计并筛选了4条LAMP扩增引物,通过对LAMP反应中MgSO4、dNTPs、Betaine等主要试剂浓度进行优化,建立了香蕉BSV的LAMP检测方法,63℃反应90 min后通过在反应产物中添加SYBR GreenⅠ染料后颜色的变化,肉眼即可判断检测结果。LAMP具有极高的检测特异性和灵敏性,其检测下限约为3.2 ng·μL-1,是PCR检测灵敏度的25倍,能快速、准确地对疑似样品进行检测,本研究对华南地区部分疑似样品的检测结果显示LAMP阳性检出率比PCR检出率高。本文建立的BSV LAMP检测方法是对BSV检测方法的拓展和延伸,为香蕉病毒的快速检测提供技术保障。
- 彭军郭立佳王国芬杨腊英汪军黄俊生
- 10%三唑酮·腈菌唑ME高效液相色谱分析被引量:6
- 2009年
- 采用反相高效液相色谱法,以甲醇-水(体积比75:25)为流动相,同时测定三唑酮和腈菌唑的含量。结果表明:三唑酮和腈菌唑变异系数为4.32%、3.82%,平均回收率为100.61%、99.67%,线性相关系数为0.9971、0.9990。
- 符瑞益彭军
- 关键词:三唑酮腈菌唑微乳剂高效液相色谱