国家杰出青年科学基金(39725029)
- 作品数：10 被引量：57H指数：6
- 相关作者：夏照帆刘志国肖仕初贲道锋杨珺更多>>
- 相关机构：第二军医大学解放军第455医院福州总医院更多>>
- 发文基金：国家杰出青年科学基金上海市卫生系统百名跨世纪优秀学科带头人培养计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 含活性细胞的新型创面覆盖物的研制及初步应用被引量：6
- 2003年
- 目的:制备含活性细胞的高生物学活性的创面覆盖物,并观察其对创面愈合的促进作用。方法:提取鼠尾胶原,与硫酸软膏素按一定比例混合制成胶原膜;采用胶原酶消化培养法,取健康成人(15～35岁)环切包皮分离成纤维细胞培养并传代。将异体成纤维细胞种植于胶原膜表面培养1周,采用ELISA法和RIA法测定培养上清中细胞因子IL-6、IL-8、TGF-β1及细胞外基质层粘连蛋白、透明质酸的分泌;从需手术植皮的烧伤患者(18～45岁,烧伤面积5％～32％TBSA)大腿外侧切取厚约0.4mm的中厚皮片,将成纤维细胞-胶原膜覆盖物用于中厚皮片供皮区,观察愈合时间。结果:成纤维细胞种植于胶原膜表面生长良好,可长入膜内形成具有三维结构的覆盖物。培养1周,上清中测得IL-6为(502.2±21.9)pg/ml、IL-8为(340.5±23.2)pg/ml、TGF-β1为(1.431±0.063)pg/ml,层粘连蛋白为(92.1±13.5)ng/ml,透明质酸为(2 037.4±105.8)ng/ml。将覆盖物用于供皮区,其表皮化时间为(6.2±2.5)d,较单纯胶原膜的(9.8±2.3)d、凡士林纱布的(10.1±1.9)d明显缩短(P<0.01),上皮分化程度高。结论:合成纤维细胞的胶原膜具有较高的生物学活性,可作为一种良好的暂时性创面覆盖物。
- 肖仕初杨珺贲道锋俞为荣王广庆杨勇朱世辉夏照帆
- 关键词：创面覆盖物胶原膜成纤维细胞层粘连蛋白创面愈合
- 腺病毒绿色荧光表达载体追踪皮肤组织工程种子细胞的转归被引量：1
- 2002年
- 目的 :用转基因技术标记组织工程种子细胞 ,探索一种追踪种子细胞转归的方法。 方法 :用腺病毒荧光表达载体转染人皮肤成纤维细胞 ,观察转染率及其荧光表达。再将细胞种植在真皮支架上 ,活体观察荧光标记的效果和持续时间。结果 :所制备的腺病毒荧光表达载体能转染靶细胞 ,转染率 >95 %。转染的细胞经一次传代后 ,尽管荧光强度降低 ,细胞轮廓仍清晰可见。细胞种植至真皮支架上 ,观察 2周 ,可以在荧光显微镜下较清晰地观察到培养物活体上细胞的形态。结论 :应用腺病毒荧光表达载体标记皮肤组织工程种子细胞以追踪细胞的转归是方便。
- 刘志国夏照帆贲道锋程大胜李刚肖仕初
- 关键词：人工皮肤种子细胞成纤维细胞
- 烧伤休克期心肌细胞内钙反常及其机理探讨被引量：7
- 1999年
- 采用磁共振波谱、细胞化学和膜片钳等技术,探讨烧伤后心肌抑制与细胞内钙超载的关系,并在整体动物、离体灌注心脏和细胞培养3个层次进一步观察烧伤后心肌细胞内钙反常现象,分析细胞内钙超载的发生机理。结果显示烧伤休克期心肌舒张和收缩功能降低可能与心肌细胞内钙超载和兴奋-收缩脱偶联有关;引起烧伤后心肌细胞内钙超载的病理机制至少包括了钠钙交换增加、细胞膜结构改变、钙内流增加和肌浆网功能紊乱几个方面;烧伤后心脏微血管内皮细胞产生的氧自由基增多,可能是造成心肌细胞膜损伤的重要原因之一、
- 夏照帆唐洪泰沈洪兴
- 关键词：烧伤休克心肌细胞膜钙反常
- 抑制差减杂交筛选严重烫伤大鼠免疫细胞差异基因被引量：2
- 2001年
- 目的 探索严重烧伤后早期免疫细胞基因表达变化与烧伤后免疫功能紊乱的关系。 方法 分离严重烫伤F34 4雌性大鼠的外周血免疫细胞并提取mRNA ,以烫伤前为对照进行抑制差减杂交筛选差异表达基因 ,将差异基因克隆后测序 ,与Genbank进行同源性比较。 结果 分离的免疫细胞经检测基本为单核细胞及淋巴细胞 ,抑制差减杂交得到多个位于 2 0 0～ 40 0bp的条带 ,将它们克隆到 pGEM -T质粒载体 ,构建了差异表达基因库。随机测序 2 0个克隆 ,得到的基因与烧伤后机体改变相符 ,部分新基因序列在Genbank登录。 结论 严重烧伤早期外周血免疫细胞的基因表达就有改变。构建了F34 4雌性大鼠的差异表达基因库 ,从中检出的部分基因可能对严重烧伤后的免疫功能紊乱有诱发作用。
- 石胜军夏照帆
- 关键词：烧伤免疫细胞差异表达基因免疫功能
- 严重烧伤后胰岛素抵抗及其防治的机制被引量：9
- 2004年
- 严重烧伤后出现的胰岛素抵抗 ,不但加重烧伤病程中的代谢紊乱 ,影响创面愈合 ,而且使感染和多器官功能障碍的发生率增高 ;其发生可能是胰岛素受体前、受体及受体后多环节障碍的综合作用 ,目前防治措施有限。本文针对严重烧伤后胰岛素抵抗发生机制和干预措施进行了探讨 ,以期提高大面积烧伤的救治水平。
- 夏照帆
- 关键词：胰岛素抵抗烧伤干预
- 维拉帕米减敏巨噬细胞机制研究被引量：7
- 2000年
- 目的 :探讨维拉帕米对严重烧伤小鼠早期腹腔巨噬细胞 ( MΦ)内毒素 ( L PS)后信号转导途径的影响。方法 :BAL B/C小鼠随机分成烫伤组和假烫组 ,将收集到的腹腔 MΦ 加入不同浓度维拉帕米 ( 10、10 0和10 0 0 nmol/L )培养。用细胞免疫组化、逆转录聚合酶链反应 ( RT PCR)和酶联免疫方法 ,观察维拉帕米对小鼠 MΦ表达磷酸化酪氨酸 ( Tyr P)、CD14m RNA和产生肿瘤坏死因子α( TNFα)、白介素 6 ( IL 6 )的影响。结果 :与假烫组比较 ,烫伤后 2小时小鼠 MΦ Tyr P和 CD14表达明显增强 ,分泌细胞因子明显增加。维拉帕米各浓度对烫伤小鼠 MΦ CD14m RNA表达无明显影响 ;维拉帕米能使 MΦ 表达 Tyr P和分泌细胞因子TNFα、IL 6减少。结论 :维拉帕米减敏 MΦ 的机制可能与其影响 Tyr P的表达有关。
- 贲道锋夏照帆刘志国杨勇郇京宁陈玉林
- 关键词：维拉帕米CD14细胞因子烧伤小鼠
- 含表皮细胞的无细胞真皮复合皮的构建及生长活性研究被引量：17
- 2002年
- 为探讨体外构建复合皮的可能性 ,制备来源于猪皮的无细胞真皮基质 ,在其表皮面种植表皮细胞于体外培养 ,定期消化分离无细胞真皮上的表皮细胞 ,采用细胞计数法和增殖试验观察表皮细胞增殖活力 ,并分别于 1周和 2周后通过组织切片HE染色、扫描电镜观察细胞生长状况。结果显示 ,表皮细胞随培养时间延长 ,数量明显增多 ,且仍具有一定的增殖潜力。培养 1周、2周后分别形成单层细胞膜片及含 3～ 6层细胞的复层膜片。提示以异种无细胞真皮为载体 ,可于体外成功构建含表皮细胞层的活性复合皮。
- 肖仕初夏照帆杨珺刘旺王广庆刘志国
- 关键词：无细胞真皮表皮细胞复合皮
- 重组人生长激素对烫伤小鼠巨噬细胞的影响被引量：7
- 2001年
- 目的 探讨重组人生长激素 (rhGH)、胰岛素样生长因子 1(IGF 1)对烧伤小鼠巨噬细胞 (M)功能的影响。 方法 采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)和酶联免疫反应方法 (ELISA) ,观察在体和离体应用rhGH、IGF 1对M表达CD14和分泌细胞因子的影响。 结果 烧伤后应用rhGH及IGF 1均能增加小鼠腹腔MCD14mRNA的转录和细胞因子的分泌 ,但两因素之间没有叠加作用。rhGH(40 μg/ml)和IGF 1各浓度均可促使培养的小鼠M分泌TNF、IL 6增加。 结论 rhGH可能由IGF 1介导 ,通过增加MCD14的表达激活M ,使其更多的分泌细胞因子 ,有利于增强免疫功能。烧伤后应用 0 2mg·kg-1·d-1剂量的rhGH ,无过度激活M的作用。
- 贲道锋郇京宁杨苓山杨勇陈玉林夏照帆
- 关键词：烧伤重组人生长激素胰岛素样生长因子CD14
- 聚二元共聚物多孔支架活性真皮替代物的体外构建
- 2003年
- 刘志国李刚肖仕初刘旺夏照帆
- 关键词：多孔支架体外构建皮肤组织工程体外培养
- 严重烧伤F344大鼠免疫细胞中一个EST全长序列的扩增被引量：1
- 2003年
- 目的 :探讨免疫细胞在大面积烧伤后全身免疫功能紊乱中的变化 ,对F344大鼠烧伤后血液淋巴细胞和单核细胞中的 1个差异表达基因片段 (AI764697 1 )进一步研究。方法 :根据该片段核苷酸序列设计双向引物和巢式引物 ,应用cDNA末端快速扩增技术 (SMARTRACE)对该片段进行双向扩增 ,扩增后结果经测序 ,用Northernblot杂交验证。结果 :设计的两对引物经扩增都得到了产物 ,克隆测序后得到 1条长度为 592bp的片段。Northernblot杂交在烧伤后得到 1个长度约 70 0bp的产物 ,在脾脏中表达水平较高 ,与RACE结果符合。该核苷酸序列已得到Gen Bank登录号AF2 4 4 895。结论 :在严重烧伤F344大鼠的血液淋巴细胞和单核细胞中分离并扩增出一个新的基因全长序列 ,其来源。
- 石胜军夏照帆
- 关键词：烧伤CDNA差异表达基因
