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人轮状病毒NSP4蛋白的表达及其致小鼠腹泻作用的初步研究被引量：7: 2003年; 研究人轮状病毒非结构蛋白NSP4在轮状病毒致病性中的作用。分离得到我国人轮状病毒97SZ8株,以谷胱甘肽S-转移酶融合蛋白的形式在大肠杆菌BL-21中表达NSP4蛋白C端86-175氨基酸并用GlutathioneSepharose^(TM) 4B亲和纯化。将纯化蛋白分别以0.4nmol和1.5nmol的剂量腹腔注射新生Balb/C乳鼠,记录腹泻发生和体重变化情况。当注射0.4nmol GST-NSP4_T重组蛋白时,有1只小鼠发生一过性腹泻(1/6),给予1.5nmol重组蛋白时,实验组所有乳鼠都先后出现了腹泻,存在一定的剂量依赖性。本研究初步在新生小鼠建立了一种人轮状病毒腹泻动物模型,该模型有望在人轮状病毒的致腹泻机理、治疗和预防研究中发挥重要作用。; 王大燕王健伟魏强屈建国于修平洪涛; 关键词：人轮状病毒腹泻

人轮状病毒NSP4基因变异与功能关系的初步研究被引量：9: 2002年; 在比较我国人A组轮状病毒一般腹泻患者分离株和重症患者分离株非结构蛋白 (NSP) 4cDNA序列时发现 ,两者在可能与致病性有关的区域 (aa131～ 14 6 )内存在着显著的差异。为进一步探讨这种变异是否与毒力改变有关 ,利用杆状病毒表达载体在昆虫细胞Sf9中表达两种毒株的NSP4 ,通过激光扫描共聚焦显微镜初步观察了它对细胞内钙离子浓度的影响。结果表明 :两种来源的NSP4均可使细胞内钙离子浓度明显升高 ,在 4 8h时大致升高3.1～ 3.4倍 ,96h时升高 5 .6～ 5 .8倍 ,但两种毒株之间的差别并不明显。研究证实 ,人轮状病毒NSP4与以往报道的动物轮状病毒NSP4一样 ,可以引起细胞内钙离子增高 ,即可能与病毒的致病性有关。但重症腹泻毒株SZ1NSP4第 131～ 14 6位氨基酸位点出现的变异并未提高其毒力。轮状病毒的毒力改变可能与其它因素有关。; 徐倏燊王健伟何雅青姜慧英洪涛; 关键词：非结构蛋白病毒蛋白人轮状病毒

轮状病毒非结构蛋白NSP4研究进展被引量：8: 2002年; 轮状病毒 (rotavirus,RV)是病毒性腹泻的主要病因。NSP4 (nonstructural protein4 )作为轮状病毒的一种非结构蛋白 ,在病毒形态发生和致病性中发挥重要作用 ,近年来日益受到重视。本文就 NSP4的研究进展作一综述。; 王大燕王健伟; 关键词：轮状病毒非结构蛋白病毒性腹泻

中国轮状病毒非结构蛋白NSP4基因变异特征的分析被引量：8: 2003年; 目的　研究我国轮状病毒流行株NSP4基因的变异特点。方法　对近年来从我国不同地区获得的 2 7份人轮状病毒流行株的NSP4基因用RT PCR进行扩增 ,克隆后进行全长cDNA序列分析 ,并利用Clustal× 1.8,TreeView3 2及DNAStar软件与参比株Wa、KUN、AU 1、EW及来自GenBank的OSU、SA11、Hochi、US2 44、Bristol株的NSP4序列进行分析比较。采用PCR分型方法对VP7血清型进行鉴定 ,确定轮状病毒G型与NSP4基因型的关系。结果　氨基酸同源性比较表明 ,我国轮状病毒不同流行株NSP4之间同源性为 81.7%～ 99.4% ,据此可将 2 7株RVNSP4分为 2组 ,分别以Wa株和KUN株为代表 ,其中以Wa组为主。组内同源性分别为 92 .0 %～ 99.4%和 92 .0 %～ 98.9% ,组内变异率分别为 0～ 8 5 %及 1 2 %～ 8 5 %。两组间变异率达 16 6%～ 2 1 0 %。氨基酸进化树提示在Wa组内包括 3个亚组。轮状病毒G血清型与NSP4基因型之间的联系不确定。结论　我国流行株NSP4基因主要可分为Wa组和KUN组 ,在Wa组内可形成三个亚组 ,并且在高变区有特征性的氨基酸位点。; 王大燕王健伟徐倏燊温乐英毛宇荣于修平洪涛; 关键词：轮状病毒属蛋白质构象基因转变

我国各血清型轮状病毒非结构蛋白NSP4基因特征的初步分析被引量：3: 2001年; 目的　对我国血清学调查中发现的四型 (G型 )轮状病毒NSP4序列进行测定和分析 ,了解NSP4的基因类型和变异状况。方法　利用银染测序方法对G1、G2、G3、G9型毒株NSP4cDNA序列进行测定。结果　四个血清型毒株NSP4的核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为 78 8% ,93 5 % ;83 0 % ,95 5 %。G1、G3、G9型标本多属Wa组 ;G2型标本多属KUN组。NSP4的变异主要位于VP4结合域内的 135 145位氨基酸。结论　Wa组和KUN组是我国主要的两种NSP4基因型。; 徐倏燊王健伟张忠浩何金生董京芳温乐英洪涛; 关键词：轮状病毒 NSP4 基因型

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