国家自然科学基金(81102675)
- 作品数：5 被引量：20H指数：3
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- 龙血素A对体外培养的毛囊干细胞增殖分化的影响被引量：2
- 2016年
- 【目的】探讨龙血素A对体外培养的毛囊干细胞(FSCs)增殖和分化的影响。【方法】分离培养SD乳鼠的FSCs,采用倒置显微镜、扫描电镜观察细胞形态,并进行I型跨膜糖蛋白(CD34)、转铁蛋白受体(CD71)免疫荧光鉴定。将FSCs分为正常对照组、阳性对照组(Li Cl组)、龙血素A组,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测3组细胞的增殖,免疫荧光法检测3组细胞角蛋白15(CK15)、CK19、CK14、CK10、Involucrin的表达率。【结果】倒置显微镜、扫描电镜下观察到培养的FSCs细胞结构完整,生长状况良好,呈CD34、CD71阳性。MTT检测结果提示龙血素A对FSCs促增殖作用最强、Li Cl次之。龙血素A组CK15表达高于正常对照组和Li Cl组。正常对照组CK19表达高于其他2组。CK14 3组表达率相近。龙血素A组Involucrin表达率最高、CK10表达最低,而Li Cl组Involucrin表达最低、CK10表达最高。【结论】龙血素A促FSCs增殖效果明显,氯化锂促FSCs分化效果明显。
- 李凡唐铱陈杏晔刘爱军
- 关键词：角蛋白增殖分化细胞培养
- 七厘散促小鼠触须部创面修复及部分机制探讨被引量：4
- 2012年
- 目的:探讨七厘散在小鼠触须部皮肤修复中的作用。方法:无菌条件下去除小鼠双侧触须部皮肤,分为实验对照组,阳性药物对照组,七厘散内服组、外用组、内服+外用组。术后1d,3d,5d,7d取材,常规病理标本制作。制备七厘散含药血清,检测其对皮肤成纤维细胞的作用。结果:术后1～3d,,各组创面呈炎性反应,七厘散内服+外用组炎性反应较轻,七厘散内服+外用组、阳性药物对照组创面开始修复。术后5d,七厘散内服+外用组较其余各组成胶原纤维合成和分泌增加,真皮层较致密,新生表皮较厚,细胞分层明显。术后7d,七厘散内服+外用组表皮细胞分层明显,真皮致密,表皮-真皮连接牢固,其余各组表皮-真皮连接不牢固。七厘散含药血清能显著促进小鼠皮肤成纤维细胞的增殖。结论:七厘散通过抗炎、促进皮肤细胞增殖和分泌,促进创面修复。
- 刘爱军易华杜标炎
- 皮耐克组织工程皮肤修复皮肤创面的研究被引量：10
- 2015年
- 【目的】探讨采用皮耐克真皮支架与大鼠表皮干细胞、成纤维细胞构建组织工程皮肤修复皮肤缺损的可行性。【方法】分离培养大鼠表皮干细胞、成纤维细胞并进行免疫荧光鉴定。成纤维细胞接种于皮耐克敷料构建类真皮,表面种植表皮干细胞构建组织工程皮肤。将BALB/c裸鼠复制背部皮肤缺损模型,随机分为3组,单纯支架组移植皮耐克敷料,成纤维细胞支架组移植皮耐克成纤维细胞复合物,组织工程皮肤组移植皮耐克组织工程皮肤。术后记录创面愈合情况,并分别取5、7 d创面组织进行病理学检查。【结果】表皮干细胞角蛋白15(CK15)、β1整合素表达阳性,成纤维细胞层粘连蛋白(LN)、纤维连接蛋白(FN)表达阳性。组织工程皮肤组愈合情况最好,移植物处成纤维细胞增生,新生毛细血管明显,表皮细胞分层排列规则。【结论】皮耐克组织工程皮肤促进裸鼠皮肤创面修复效果良好。
- 陈杏晔李凡刘爱军
- 关键词：细胞培养裸鼠
- 毛囊细胞高效分离培养方法的建立被引量：2
- 2014年
- 【目的】建立一种简单易行、高效稳定、细胞活性好的毛囊细胞分离培养方法。【方法】无菌条件下剪下SD乳鼠触须部皮肤,拔出单个毛囊。采用Ⅰ型胶原酶、胰酶两步法消化毛囊,细胞悬液接种于细胞外基质包被的培养板中,以体积分数1%胎牛血清的K-SFM培养液培养,次日换无血清培养液。剩余组织块剪碎铺展于培养瓶中,添加含血清的HG-DMEM培养基常规培养。取以上2种细胞进行免疫荧光鉴定。毛囊上皮细胞进行流式细胞仪检测。【结果】两步酶法分离得到的毛囊上皮细胞贴壁迅速,圆形或多角形,呈典型铺路石状。培养的组织块周围有长梭形细胞爬出,细胞有突起,并连接成网状。毛囊上皮细胞CK15、CK19、β1整合素表达阳性,以G1期细胞为主,占75.6%。毛囊结缔组织鞘细胞的层粘连蛋白、纤维连接蛋白、波形蛋白表达阳性。【结论】分离培养的细胞为毛囊干细胞和成纤维细胞,该方法得到的细胞贴壁快、均一性好、增殖能力强。
- 陈杏晔李凡刘爱军
- 关键词：细胞培养
- 七厘散含药血清对乳鼠毛囊成纤维细胞增殖的影响被引量：3
- 2014年
- 目的:七厘散是促进皮肤愈合的经典方药,本文旨在探讨七厘散含药血清对SD乳鼠触须部毛囊真皮成纤维细胞增殖的影响。方法:无菌条件下分离SD乳鼠触须部完整毛囊,植块法培养真皮细胞,并利用免疫荧光技术进行鉴定。SD大鼠行七厘散灌胃,分别于灌胃后3d、5d、7d行腹主动脉取血,制备含药血清,用不同体积百分比的含药血清检测其对毛囊真皮细胞增殖的影响。结果:分离培养的毛囊真皮细胞呈成纤维状,免疫荧光鉴定为成纤维细胞。3d和5d七厘散含药血清对毛囊真皮成纤维细胞的促增殖作用较7d组强。3d组中以体积百分比为5%的含药血清组促增殖作用最强。结论:3d组体积百分比5%的七厘散含药血清对SD乳鼠触须部毛囊真皮成纤维细胞有较强的促增殖作用,本实验为进一步探讨中药促毛囊真皮成纤维细胞增殖的分子机制提供实验基础。
- 刘爱军陈杏晔
- 关键词：七厘散乳鼠
