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国家科技攻关计划(2003DA901A32)

作品数：14 被引量：49H指数：5
相关作者：范代娣骆艳娥马晓轩米钰王晓军更多>>
相关机构：西北大学长安大学西安工程科技学院更多>>
发文基金：国家科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
相关领域：生物学化学工程理学医药卫生更多>>

文献类型

  • 12篇中文期刊文章

领域

  • 7篇生物学
  • 2篇化学工程
  • 2篇理学
  • 1篇轻工技术与工...
  • 1篇医药卫生

主题

  • 8篇胶原
  • 8篇胶原蛋白
  • 7篇类人胶原蛋白
  • 4篇重组大肠杆菌
  • 3篇高密度发酵
  • 3篇补料
  • 3篇纯化
  • 2篇蛋白
  • 2篇质粒
  • 2篇质粒稳定性
  • 2篇生长速率
  • 2篇工程菌
  • 2篇分离纯化
  • 2篇比生长速率
  • 1篇蛋白表达
  • 1篇动力学
  • 1篇增殖
  • 1篇生物材料
  • 1篇亲和层析纯化
  • 1篇螯合

机构

  • 12篇西北大学
  • 1篇长安大学
  • 1篇西安工程大学
  • 1篇西北农林科技...

作者

  • 12篇范代娣
  • 6篇骆艳娥
  • 5篇马晓轩
  • 4篇米钰
  • 3篇花秀夫
  • 3篇张兮
  • 3篇王晓军
  • 1篇刘树文
  • 1篇代菊红
  • 1篇薛文娇
  • 1篇郑文超
  • 1篇费强
  • 1篇王小刚
  • 1篇王德伟
  • 1篇尚龙安
  • 1篇鱼奇鳞
  • 1篇任妍君
  • 1篇童燕
  • 1篇惠俊锋
  • 1篇韩娟

传媒

  • 7篇西北大学学报...
  • 2篇中国生物工程...
  • 1篇化学工程
  • 1篇西北农林科技...
  • 1篇化学与生物工...

年份

  • 1篇2009
  • 1篇2008
  • 2篇2007
  • 5篇2006
  • 3篇2005
共 14 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
离子交换批量层析纯化重组类人胶原蛋白Ⅱ被引量：6
2006年
对阳离子交换树脂CM52纯化类人胶原蛋白Ⅱ(Hum an-like Collagen B ioprote inⅡ,HCBⅡ)的合适条件进行了研究。通过实验,确定了批量层析的最佳操作条件,即在pH=4.0、NaC l 0.15 mol/L、进料质量浓度7 mg/mL、处理量17.26 mL/g进行吸附,吸附时间为60 m in,然后在pH=4.0、NaC l 0.30 mol/L下进行脱附。实验表明:采用批量层析吸附HCBⅡ后上柱洗脱,树脂CM52对HCBⅡ的吸附量可达到48.6 mg/g,回收率83.8%,最终纯化的HCBⅡ达电泳纯,相对分子质量为97k。
薛文娇范代娣尚龙安鱼奇鳞
关键词：离子交换
重组类人胶原蛋白工程菌补料发酵过程建模
2006年
对产类人胶原蛋白的重组大肠杆菌Escherichia coli(E．coli)的批式和分批-补料培养动力学进行了研究。通过检测发酵过程的基质浓度、菌体量和产物浓度,建立了一组反映发酵的动力学模型,并考虑了非工程菌存在的影响,分析了细胞生长、底物消耗、基因工程产物生成的过程, 结果显示该动力学模型可以很好地拟合发酵过程。
米钰花秀夫范代娣张兮
关键词：动力学发酵胶原蛋白
基因重组大肠杆菌生产类人胶原蛋白补氮策略优化研究被引量：5
2006年
优化重组大肠杆菌高密度发酵的调控工艺。利用重组大肠杆菌高密度发酵生产类人胶原蛋白,考察了连续流加和分阶段式两种不同补氮策略对细胞生长和类人胶原蛋白产量的影响。不同补氮方式显著影响类人胶原蛋白的产量。分阶段式补氮方式优于连续流加补氮方式,有利于细胞生长和类人胶原蛋白的表达,最终细胞浓度为76.01 g.L-1(DCW),类人胶原蛋白浓度为16.75 g.L-1,蛋白表达量为22.1%。
张兮范代娣花秀夫骆艳娥马晓轩
关键词：重组大肠杆菌高密度发酵类人胶原蛋白分批补料培养
固相金属亲和层析纯化重组类人胶原蛋白被引量：2
2008年
目的研究利用固相金属亲和层析纯化重组类人胶原蛋白的洗脱方法,以优化分离纯化的条件。方法将吸附了重组类人胶原蛋白的层析柱采用降低pH,增大离子强度和增大NH_4Cl浓度3种方法进行洗脱。结果采用增大NH_4Cl浓度的方法进行洗脱所得的洗脱峰面积最大,洗脱体积最小,纯化后重组类人胶原蛋白的纯度达97.9%,回收率为68.6%,纯化倍数为2.78。结论采用固相金属亲和层析纯化重组类人胶原蛋白是可行的,可有效地对重组类人胶原蛋白进行纯化。
王晓军骆艳娥范代娣
关键词：纯化
类人胶原蛋白工程菌质粒稳定性研究被引量：3
2006年
目的研究基因重组大肠杆菌补料分批发酵生产类人胶原蛋白过程中质粒稳定性。方法通过平板复制法,观察质粒稳定性在不同生长周期、卡那霉素浓度和不同比生长速率中的变化。结果质粒稳定性受生长周期、卡那霉素和比生长速率的影响。在μ为0.15、卡那霉素浓度为0.005g/L的情况下,工程菌生产效率最理想。结论通过控制发酵过程中的质粒稳定性可以有效地提高菌体产量和目标蛋白产量。
郑文超范代娣米钰马晓轩骆艳娥惠俊锋
关键词：类人胶原蛋白补料分批发酵质粒稳定性比生长速率
重组大肠杆菌分批-补料培养生产类人胶原蛋白的过程控制被引量：12
2005年
目的优化重组大肠杆菌高密度发酵的调控工艺。方法通过考察比生长速率、3种控氧方式以及诱导强度对细胞和类人胶原蛋白产量的影响,确定最佳的发酵工艺。结果比生长速率显著影响类人胶原蛋白的产量,且最适比生长速率为0.15～0.20h-1;在提高罐压的条件下,细胞和类人胶原蛋白的浓度均显著高于其他两种控氧方式,充入富氧空气的细胞和类人胶原蛋白的浓度均最低;诱导强度对细胞生长和蛋白质表达的影响非常大,当细胞浓度达47±2g/L(DCW)时,开始升温至42℃进行诱导,最佳条件为42℃保温2～3h,然后降温至39℃继续培养5～6h。结论通过优化重组大肠杆菌分批补料培养生产类人胶原蛋白的工艺,使得细胞和类人胶原蛋白浓度分别达68.94g/L(DCW)和13.02g/L。
骆艳娥范代娣花秀夫张兮王小刚
关键词：类人胶原蛋白重组大肠杆菌比生长速率
元素衡算和代谢衡算在类人胶原蛋白表达期的应用研究
2007年
应用元素衡算和代谢衡算方法,建立用重组大肠杆菌发酵生产类人胶原蛋白表达期的数学模型,并利用非线性优化法对模型中的未知参数进行估算。结果表明该模型与重组大肠杆菌的生长、代谢动力学模型一致,且模型的关键计算参数αh、αp和mx分别为1.173mol.C-mol-1、293.814mol.C-mol-1和17.878mol.C-mol-1.h-1。该模型能较好地预测重组类人胶原蛋白表达期中的宏观反应速率,且在类人胶原蛋白发酵表达期,必须通过控制葡萄糖的补料速率来控制菌体的生长,当μ=0.04h-1时,类人胶原蛋白的比生成速率达最大值。
骆艳娥范代娣马晓轩
关键词：重组大肠杆菌类人胶原蛋白
BHK-21细胞在生物材料溶液中黏附及增殖比较被引量：2
2007年
目的比较BHK-21细胞在3种生物材料溶液中黏附及增殖情况,探讨以类人胶原蛋白为基础制备组织工程材料的可行性。方法将BHK-21细胞分别种植于类人胶原蛋白、壳聚糖、透明质酸以及共混溶液中,在倒置显微镜下观察细胞的黏附和生长情况,并利用MTT方法检测种植后1～5 d细胞的增殖情况。结果BHK-21细胞种植12 h,类人胶原蛋白、壳聚糖以及两者共混溶液能显著促进BHK的黏附(P<0.01);BHK-21细胞在类人胶原蛋白溶液及类人胶原蛋白与其他生物材料共混溶液中功能活跃,维持其形态且能持续增殖,其中类人胶原蛋白/壳聚糖共混溶液促细胞增殖能力最强。结论类人胶原蛋白能够维持BHK细胞的生长与繁殖,在组织工程领域是一种极有潜力的组织工程材料。
王德伟范代娣费强
关键词：类人胶原蛋白MTT
周期操作对重组大肠杆菌高密度发酵表达类人胶原蛋白的影响被引量：2
2006年
采用补料一分批式发酵,研究了4种不同间歇周期补氮操作对细胞生长和类人胶原蛋白表达的影响,以及发酵过程中细胞质粒稳定性、细胞菌落形成能力和乙酸生成量的变化。结果表明,在每隔10min连续补加 36mL补料氮溶液(22s完成补加操作)的周期操作下,细胞质粒稳定性明显提高,细胞菌落形成能力下降较小,乙酸生成量低,仅0．7 g／L,最终细胞密度为84 g／L,类人胶原蛋白表达量可达到14 g／L,在4种操作方式中最高。
马晓轩范代娣刘树文骆艳娥
关键词：重组大肠杆菌高密度发酵类人胶原蛋白质粒稳定性细胞活性
重组类人Ⅰ型胶原蛋白分离与纯化被引量：3
2005年
目的研究重组类人Ⅰ型胶原蛋白基因工程的下游工艺。方法工程菌株Escherichia coliBL21 3.1在B ioengineering L1 523型12.8 L自控发酵罐中经24 h发酵,细胞干重达到77.3 g/L,表达量为菌体蛋白量的29.4%。发酵菌体经超声破碎、硫酸铵沉淀后,依次经DEAE52,Sephadex G-100柱层析分离纯化。结果最终产物纯度达到98%,回收率为80.5%。结论纯化的类人Ⅰ型胶原蛋白经SDS-PAGE电泳测定为电泳纯,分子质量为90ku,N端序列为NH2-H-D-P-V-V-L-Q-R-R-D-W-E-N-P-G,与基因序列设计一致。
马晓轩范代娣王晓军米钰
关键词：分离纯化高密度发酵
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