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排序方式：

猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp10基因的克隆及序列分析被引量：2: 2009年; 根据猪繁殖与呼吸综合征病毒BJ-4序列,选择Nsp10基因保守区域设计并合成特异性引物,用RT-PCR方法扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒贵州地方株(命名为JL株)Nsp10基因片段,克隆到pMD18-T载体并测序,应用DNASTAR、C lustal_1.81和Mega序列分析软件进行同源性比较。结果表明:贵州JL株Nsp10基因的cDNA长699 bp,可编码233个氨基酸;贵州JL株Nsp10基因与早期分离毒株MLV株、BJ-4株、VR-2332株、CH-1a株、CH2002株和GS2004株相应序列的核苷酸同源性为91.7%～94.0%,氨基酸同源性为97.4%～98.7%;而与最近分离毒株HN2007株、SX2007株、GD2007株、YN2008株、GS2008株、XL2008株、TJ株和JXA1株的核苷酸同源性为98.3%～98.6%,氨基酸同源性为99.6%～100%。; 周思旋周碧君隆华朱时杰文明王开功; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒克隆

猪繁殖与呼吸综合征的血清学调查与病原核酸检测被引量：3: 2008年; 为了解贵州省猪群中猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）的流行情况，并对l临床发生的疑似PRRS疫情作出确定性诊断，本试验采用PRRS酶联免疫诊断试剂盒对非免疫猪群和免疫猪群的1254头份血清样本进行抗体检测，采用RT—PCR方法对疑似病例样本进行鉴定。结果显示，非免疫健康猪群PRRS抗体阳性率为5．90％；发病猪群阳性率为29．16％；免疫猪群抗体阳性率为59．45％；利用针对PRRSVGP5基因的引物对疑似病例样本进行了PCR扩增，将所得序列与GenBank收录的7株PRRSVGP5基因的核苷酸及氨基酸序列比较分析，结果与欧洲株（Lv）的同源性分别为50．0％和46．7％，与美洲株（VR2332）的同源性分别为88．7％和89．9％，而与国内其它毒株的同源性为93．9％～99．1％和91．5％～99．5％；系统进化分析显示贵州分离株均为美洲型。PRRSVNsp2变异毒株特异性PCR诊断试剂盒鉴定结果显示，疑似病例样本均扩增出特异性条带，表明流行在贵州省猪群中的PRRSV毒株均为变异毒株。; 岳筠周碧君程振涛徐春志周思旋史开志李永明韦忠梅; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征血清学调查 RT-PCR

猪萎缩性鼻炎支气管败血波氏杆菌PCR检测方法的建立被引量：8: 2007年; 对表现猪萎缩性鼻炎临床症状的猪群中分离得到的34株支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb),采用针对Bb flagellum gene的一对引物进行PCR扩增,结果所有分离物均能扩增出237bp特异性DNA条带,与传统生化鉴定结果相一致,且其最小检出量为0.64pg;而猪鼻腔和肺组织中常见的多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌及大肠埃希氏菌均未能出现任何DNA条带。这表明,本试验建立的PCR方法具有特异性强、灵敏度高、可靠性好等特点,可用于猪萎缩性鼻炎的临床诊断。; 袁翠霞罗阿东徐景峨唐源李建华文明李永明周碧君; 关键词：猪萎缩性鼻炎支气管败血波氏杆菌 PCR方法

一株猪细小病毒的分离与鉴定被引量：2: 2008年; 取疑似猪细小病毒(PPV)流产胎儿组织病料,处理后接种PK-15传代细胞,2～4 d后出现了明显的细胞病变;荧光抗体试验结果显示,PPV呈现阳性;以猪细小病毒VP2基因的1对特异性引物,从PPV疫苗、流产胎儿病料及感染细胞培养物中PCR扩增出158 bp的DNA条带;扩增产物经EcoR I酶切分析,得到了预期的条带(123 bp和35 bp),从而证实PCR方法的特异性;敏感性试验结果显示,PCR的最小检出量为300 pg.研究结果表明,2006年9月发生在贵州省某种猪场的疫情确由猪细小病毒感染所致.; 周思旋周碧君岳筠程振涛徐春志鲍娟罗阿东李永明; 关键词：猪细小病毒

贵州省猪萎缩性鼻炎的调查与防制研究被引量：1: 2008年; 文明袁翠霞徐景峨罗阿东唐源周碧君李永明; 关键词：猪传染性萎缩性鼻炎支气管败血波氏杆菌多杀性巴氏杆菌防制仔猪死亡

猪繁殖与呼吸综合征病毒贵州流行株GP5基因的RLFP分析: 2009年; 为对贵州省某养猪场猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)疑似病例进行确诊及分析其病原分子变异情况,采集该养猪场死亡猪病料样本进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(PSSRV)的RT-PCR检测,并采用RLFP方法分析了现场流行毒株GP5基因的变异情况。结果表明,该猪场病猪样本中PRRSV的核酸检出率为100%,是由高致病性PRRSV变异毒株引起;RT-PCR扩增PRRSV贵州流行株GP5基因,经RLFP分析显示,流行株GP5基因呈1-3-3 PCR-RFLP模式;克隆测序后发现,贵州流行株GP5基因发生多个点突变,其中在第25、216、358、409和554位核苷酸的点突变,可导致一些酶切位点的丧失或显现。; 汪德生杨鹤峰史开志周碧君文明; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征 RT-PCR检测

猪萎缩性鼻炎凝集反应抗原的制备及应用被引量：4: 2007年; 为快速地诊断猪萎缩性鼻炎及监测其免疫状况,本试验在对支气管败血波氏杆菌保存菌种进行复苏和全面鉴定的基础上,制备了猪萎缩性鼻炎凝集反应抗原,经凝集反应试验表明,该抗原在PBS中不发生自凝,与猪传染性胸膜肺炎、猪喘气病和猪瘟的阳性血清均无凝集反应,而对猪萎缩性鼻炎标准阳性血清的凝集效价高达1:10 240以上,具有较高的特异性和敏感性;对20份免疫母猪所产仔猪血清样本进行检测,检出率为95%。; 袁翠霞文明李永明周碧君汪德生徐景峨; 关键词：猪萎缩性鼻炎支气管败血波氏杆菌

猪萎缩性鼻炎多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及抗性分析被引量：1: 2008年; 李永明罗阿东徐景峨袁翠霞; 关键词：多杀性巴氏杆菌萎缩性鼻炎抗性分析猪群革兰氏阴性

贵州省猪传染性胸膜肺炎的血清学调查被引量：1: 2009年; 为检测贵州省猪传染性胸膜肺炎感染情况,试验采用猪传染性胸膜肺炎ELISA试验,对贵州省8个地、州、市部分集约化猪场的675份猪血清进行检测。结果表明:非免疫猪群APP抗体阳性率为42.2%%(248/587),免疫猪群APP抗体阳性率为63.64%(56/88)。; 虞鹃周碧君周思旋; 关键词：猪传染性胸膜肺炎 ELISA试验

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贵州省“十一五”农业科技攻关项目(NZ[2005]3002)