贵州省科技厅社会发展攻关项目(SY[2011]3031)
- 作品数：9 被引量：46H指数：5
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- 相关机构：遵义医学院遵义医学院附属医院贵州柏强制药有限公司更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程理学更多>>
- 不同斑蝥素类物质对人肝癌细胞HepG_2增殖作用的研究被引量：5
- 2015年
- 目的观察斑蝥素酸镁、斑蝥素及斑蝥素酸钠3种斑蝥素类物质对人肝癌细胞Hep G2的体外抗肿瘤活性。方法 (1)采用磺酰罗丹明染色法(SRB法)检测不同浓度斑蝥素酸镁、斑蝥素及斑蝥素酸钠在体外对人肝癌细胞Hep G2增殖的抑制作用;(2)使用透射电镜观察2.27μmol/L斑蝥素酸镁作用于肝癌细胞Hep G248 h后细胞超显微结构的变化。结果 (1)斑蝥素酸镁、斑蝥素及斑蝥素酸钠对人肝癌细胞Hep G2有明显抑制作用,抑制率随药物浓度的增加而升高,且呈剂量效应关系,其半数抑制浓度(IC50)分别为2.27、5.70、8.41μmol/L;(2)透射电镜下见核染色质聚集成块附着于核膜下,且见核异形等凋亡细胞形态特征。结论斑蝥素酸镁对人肝癌细胞Hep G2的抑制作用优于斑蝥素和斑蝥素酸钠,且斑蝥素酸镁可以诱导人肝癌细胞Hep G2发生凋亡。
- 晏容刘云朱欣婷易小飞刘流李晓飞
- 关键词：比色法肝肿瘤免疫组织化学肿瘤细胞
- 大孔树脂纯化无花果叶总黄酮被引量：12
- 2012年
- 目的:研究大孔树脂纯化无花果叶总黄酮的工艺条件。方法:采用静态吸附法对5种大孔树脂进行筛选,动态吸附法优选大孔树脂纯化无花果叶总黄酮工艺。结果:无花果叶总黄酮的纯化工艺为上样浓度2 g.L-1,上样速率2 BV.h-1,上样体积3 BV,2 BV去离子水冲洗;4 BV 80%乙醇以2 BV.h-1流速洗脱,收集洗脱液;此工艺条件下无花果叶总黄酮的转移率为77.6%,样品产物中总黄酮质量分数51.3%。结论:D140型大孔树脂对无花果叶总黄酮具有良好的富集纯化效果。
- 朱欣婷刘云
- 关键词：无花果叶总黄酮大孔树脂纯化
- 斑蝥素酸镁对肺癌细胞增殖的抑制作用被引量：8
- 2013年
- 目的探讨斑蝥素盐类衍生物——斑蝥素酸镁在体外对肺癌细胞增殖的抑制作用。方法采用磺酰罗丹明染色法(SRB法)考察斑蝥素酸镁对H-1299和A-549两种人肺腺癌细胞的体外抗肿瘤活性;采用流式细胞术测定斑蝥素酸镁对H-1299细胞周期的影响;利用细胞集落形成实验,检测斑蝥素酸镁对单个肿瘤细胞形成克隆的影响。结果斑蝥素酸镁对H-1299、A-549两株肿瘤细胞具有比较明显的抑制效果,其半数抑制浓度(IC50)分别为1.59μg.ml-1、1.39μg.ml-1,且抑制率随药物浓度的增加而升高,呈剂量效应关系。细胞周期实验显示H-1299细胞在受试药物的作用下S期和G2/M期的细胞比例呈明显减少(P<0.05),G0/G1期细胞比例显著增加(P<0.05),细胞周期阻滞于G0/G1期。细胞集落形成实验结果表明,当斑蝥素酸镁的浓度达到2.10μg.ml-1时,肿瘤克隆就不能形成。结论斑蝥素酸镁对肺腺癌细胞具有非常明显的抗肿瘤活性,可做进一步研究。
- 刘云胡姗姗娄方明朱欣婷晏容侯晓晖李晓飞
- 关键词：细胞周期肺腺癌细胞
- 芫菁体内斑蝥素和结合斑蝥素抗肿瘤活性的比较研究被引量：11
- 2013年
- 目的比较提取自眼斑芫菁体内的斑蝥素和结合斑蝥素的体外抗肿瘤活性。方法将提取自眼斑芫菁体内的斑蝥素和结合斑蝥素作用于人结肠癌细胞HT-29、人肝癌细胞PLC/PRF/5、人肝癌细胞BEL-7404;采用WST-1比色法进行体外细胞抑制实验,测定斑蝥素和结合斑蝥素对上述三种肿瘤细胞的生长抑制率。结果斑蝥素对HT-29结肠癌细胞的抑制作用不稳定,对PLC/PRF/5和BEL-7404肝癌细胞的抑制作用随用药浓度的增加而增强,但在高浓度作用下仍表现出较低抑制率。结合斑蝥素对HT-29、PLC/PRF/5、BEL-7404三株肿瘤细胞均表现出明显的抑制效果,且随药物浓度升高其抑制作用增强,呈剂量效应关系;其半数抑制浓度分别为:28.51,86.77,21.27μmol/L。结论芫菁体内结合斑蝥素对人结肠癌细胞HT-29、人肝癌细胞PLC/PRF/5、人肝癌细胞BEL-7404的抑制作用远好于斑蝥素,提示结合斑蝥素的抗癌效果极可能好于斑蝥素。
- 李晓飞娄方明晏容侯晓晖张恒刘云
- 关键词：斑蝥素抗肿瘤半数抑制浓度
- 斑蝥素酸镁与斑蝥酸钠对喉癌Hep-2细胞抑制活性比较的初步研究被引量：3
- 2015年
- 目的:探讨自主研发产物--斑蝥素酸镁对人喉癌上皮细胞的增殖抑制活性是否好于临床抗癌药物斑蝥酸钠。方法:采用磺酰罗丹明染色法(SRB法)、细胞集落形成实验分别考察斑蝥素酸镁和斑蝥酸钠对人喉癌上皮细胞Hep-2的影响。结果:与斑蝥酸钠相比,斑蝥素酸镁作用喉癌Hep-2细胞的效果更加显著。其IC50仅为2.19μmol·L-1,远低于斑蝥酸钠的IC50(15.75μmol·L-1)。细胞集落形成实验显示,与斑蝥酸钠相比,斑蝥素酸镁明显阻止细胞集落的形成,最低有效浓度为1.75μmol·L-1,远低于斑蝥酸钠的最低有效浓度(3.50μmol·L-1)。结论:与斑蝥酸钠相比,斑蝥素酸镁对喉癌Hep-2细胞具有更加显著的抑制效果,可进行更加深入的研究。
- 卜雯雯朱欣婷刘云晏容郭侃张云辉李晓飞
- 关键词：斑蝥酸钠集落形成
- 近红外成像用于双向电泳前的蛋白质快速定量
- 2017年
- 双向电泳(Two-dimensional Electrophoresis,2D)是蛋白质组学研究过程中的常用技术,而蛋白质样品的准确定量是做好双向电泳的前提条件。由于双向电泳的蛋白质样品在定量时存在试剂兼容性的问题,故需使用GE或Bio-rad公司研发的双向电泳专用蛋白质定量试剂盒,但此类试剂盒价格高昂且操作繁琐,因此亟待开发一种快速、准确、成本低廉的蛋白质定量方法。通过研究发现,蛋白质溶液与考马斯亮蓝-G250混合后,在近红外荧光成像系统680nm波长下可以被激发出荧光,且当蛋白质浓度在0.01~0.2mg·mL^(-1)范围内时,其荧光强度与蛋白质浓度具有很好的线性关系。基于此特点,建立了一种以96孔板为载体,利用近红外成像技术对蛋白质样品进行定量的方法,该方法可用于双向电泳前蛋白质样品的快速定量。
- 刘云曹嵩李科李三华宋长伟覃成朱欣婷
- 关键词：考马斯亮蓝双向电泳
- 苦白蹄乙醇提取物体外抗肿瘤活性研究被引量：2
- 2012年
- 探讨苦白蹄乙醇提取物在体外的抗肿瘤活性。采用磺酰罗丹明染色法(SRB法)考察苦白蹄乙醇提取物对人肝癌细胞BEL-7404、人肺腺癌细胞H-1299、人胃腺癌细胞SGC-79013种人恶性肿瘤细胞的体外抗肿瘤活性。结果显示,苦白蹄乙醇提取物对BEL-7404、SGC-7901两株肿瘤细胞具有比较明显的抑制效果,其半数抑制浓度(IC50)分别为73.5、80μg·mL-1,且抑制率随药物浓度的升高而增大,呈剂量效应关系,但对H-1299的抑制率相对较低。细胞周期实验显示,BEL-7404细胞在苦白蹄乙醇提取物的作用下,G2/M期的细胞比例呈下降趋势,S期细胞比例增大,细胞周期阻滞于S期。苦白蹄乙醇提取物具有比较明显的体外抗肿瘤活性。
- 朱欣婷刘云胡姗姗李常春
- 关键词：抗肿瘤细胞周期
- 斑蝥素酸镁对人肝癌细胞SMMC-7721及其裸鼠皮下移植瘤的影响被引量：10
- 2015年
- 【目的】探讨斑蝥素酸镁对人肝癌细胞SMMC-7721及其裸鼠皮下移植瘤的影响。【方法】1、采用磺酰罗丹明染色法(SRB法)检测不同浓度斑蝥素酸镁在体外对人肝癌细胞SMMC-7721增殖的抑制作用;2、流式细胞术检测斑蝥素酸镁对人肝癌细胞SMMC-7721细胞周期和细胞凋亡的影响;3、Hoechst33342染色观察斑蝥素酸镁对人肝癌细胞SMMC-7721细胞形态的影响;4、透射电镜观察斑蝥素酸镁作用后人肝癌细胞SMMC-7721超微结构的变化;5、建立人肝癌细胞SMMC-7721裸鼠皮下移植瘤模型,实验组每只裸鼠瘤周注射斑蝥素酸镁6.26×10?5 mmol,对照组给予相同容积的无菌生理盐水瘤周注射,计算抑瘤率;6、原位末端标记染色(TUNEL)法检测人肝癌裸鼠皮下移植瘤组织细胞凋亡情况。【结果】1、斑蝥素酸镁对人肝癌细胞SMMC-7721有比较明显的抑制作用,抑制率随药物浓度的增加而升高,呈剂量效应关系,其半数抑制浓度(IC50)为1.79?mol/L;2、流式细胞检测结果显示:人肝癌细胞SMMC-7721在斑蝥素酸镁的作用下,G0/G1期细胞减少,G2/M期细胞增加,细胞出现G2/M期阻滞;细胞凋亡率随斑蝥素酸镁浓度加大而逐渐增加;3、Hoechst33342染色镜下显示:斑蝥素酸镁作用后人肝癌细胞SMMC-7721出现凋亡细胞形态特征;4、透射电镜观察:斑蝥素酸镁作用后人肝癌细胞SMMC-7721出现细胞核异形、染色质聚集成团、边集,见凋亡小体;5、斑蝥素酸镁组肿瘤体积、重量显著小于生理盐水组(P﹤0.05),抑瘤率为49%;6、TUNEL法提示斑蝥素酸镁组移植瘤组织细胞凋亡率显著高于生理盐水组(χ2=92.609,P﹦0.000)。【结论】斑蝥素酸镁对人肝癌细胞SMMC-7721在体内外均有抑制增殖作用,并可以诱导肿瘤细胞凋亡,其凋亡的发生与细胞分裂期阻滞有关。
- 晏容刘云朱欣婷易小飞刘流李晓飞
- 关键词：人肝癌细胞SMMC-7721裸鼠
- 斑蝥素酸镁对人肝癌细胞SMMC-7721 ERK1/2通路和G_2/M期调控蛋白的影响被引量：4
- 2016年
- 目的探讨斑蝥素酸镁对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)通路和周期相关蛋白的影响。方法将不同浓度的斑蝥素酸镁作用于人肝癌细胞SMMC-7721,免疫印迹法检测ERK1/2通路和周期相关蛋白表达的变化。结果与对照组比较,0.895、1.79μmol/L浓度组的ERK1/2蛋白磷酸化水平明显下降,同时周期相关蛋白Cdc25C、Cdc2表达显著下调。结论推测斑蝥素酸镁可能是通过抑制ERK1/2通路,进而调控Cdc25C、Cdc2的表达下调,使细胞发生G_2/M期阻滞,最终诱导细胞凋亡。
- 晏容刘云贺莉芳杨雪峰刘流李晓飞
- 关键词：人肝癌细胞SMMC-7721ERK1/2通路CDC2
