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上海市现代生物与新药产业发展基金(99431904)

作品数:4 被引量:119H指数:4
相关作者:颜景斌肖艳萍黄英曾溢滔奚鹰更多>>
相关机构:上海市儿童医院更多>>
发文基金:上海市现代生物与新药产业发展基金上海市卫生局青年科研基金更多>>
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文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 4篇生物学

主题

  • 4篇基因
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  • 3篇转基因小鼠
  • 3篇小鼠
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机构

  • 4篇上海市儿童医...

作者

  • 3篇黄英
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  • 2篇曾溢滔
  • 2篇奚鹰
  • 1篇黄淑帧
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  • 1篇王强
  • 1篇阳飞昆
  • 1篇孙琼
  • 1篇黄缨
  • 1篇黄赞
  • 1篇曹新

传媒

  • 2篇Journa...
  • 1篇遗传
  • 1篇生物工程学报

年份

  • 4篇2002
4 条 记 录,以下是 1-4
排序方式:
应用荧光原位杂交检测人凝血因子Ⅸ在转基因小鼠染色体上的整合被引量:13
2002年
应用荧光原位杂交 (FISH)技术检测两个转基因小鼠家系从F1到F4 代的整合情况。阳性转基因小鼠 98%~ 10 0 %的中期分裂相 ,85 %~ 94%的间期核出现杂交信号 ;阴性对照小鼠 10 0 %的中期分裂相、95 %~ 96 %的间期核未出现杂交信号。结果表明 ,该FISH实验条件能对转基因整合位点进行高效特异检测。本文分析的两家系转基因小鼠均为单位点整合 ,但整合位点不同。各家系内F1到F4 代的转基因小鼠均可检出整合染色体 ,且整合位点相同 ,表明外源基因稳定整合并遗传给后代。
肖艳萍奚鹰黄文英黄英
关键词:荧光原位杂交转基因小鼠染色体整合位点
转基因小鼠中外源基因遗传及表达稳定性的研究被引量:6
2002年
Two transgenic mouse strains , in which the expression of human factor IX (hFIX) in the milk were different significantly, were bred, and the foreign gene integration as well as the content of hFIX in the milk were detected by PCR, Southern blot, FISH and ELISA, respectively. The results showed that approximately 50% offsprings were transgenic positive. Foreign gene integrated in mouse chromosomes was intact. The hFIX expression of each mouse in the same strain was different, the content of hFIX in the milk was (43.32±5.41)μg/mL in FIX-33 transgenic strain and (1.16±0.45)μg/mL in FIX-124 transgenic strain. Meanwhile, the hFIX gene expression between the two strains was different remarkably (P<0.01). We conclude that the characteristics of inheritance and expression in the founder were able to be transferred to their offsprings stably.
颜景斌肖艳萍方彧聃奚鹰黄文英黄英
关键词:转基因小鼠外源基因
牛催乳素基因组及其cDNA全长序列的分子克隆和分析被引量:48
2002年
通过LongPCR等技术首次克隆得到全长 9388bp的牛催乳素 (bPRL)基因组序列 (GenBank登录号AF4 2 6 315 ) ,其中包括bPRL基因全部 5个外显子和 4个内含子 ,5′端 85 4bp的上游调控区以及 3′端 6 9bp的UTR。AF4 2 6 315基因编码的蛋白质在GenBank中的序号为AAL2 80 75 ,由 2 2 9个氨基酸残基组成 ,1~ 30位氨基酸残基为信号肽序列 ,成熟的多肽含有 199个氨基酸残基。将bPRL基因组DNA真核表达载体转染COS 7细胞后通过RT PCR得到长度为80 4bp的bPRLcDNA序列 ,该序列涵盖了bPRL基因的全部ORF区 ,证明本研究所获得的bPRL基因组DNA具有转录的生物学功能。Blast搜索结果显示 ,GenBank数据库中收集有多条bPRL基因的mRNA和EST序列 ,各序列间存在多个SNP位点 ,主要分布于下游编码区和 3′端的UTR ,这些位点均未改变相应的氨基酸残基的性质 ,此外 。
曹新王强颜景斌阳飞昆黄淑帧曾溢滔
关键词:分子克隆CDNA
山羊β-酪蛋白基因启动子指导的转基因小鼠乳汁高效表达人凝血因子Ⅸ被引量:53
2002年
为探讨应用转基因动物乳腺生物反应器高效表达人凝血因子IX(humanclottingfactorIX ,hFIX)的可行性 ,构建了包括山羊 β 酪蛋白基因启动子和外显子 1、内含子 1、外显子 2共约 6 .7kb片段以及hFIX全长cDNA序列和部分经改造的内含子 1的乳腺表达载体 ,通过转基因技术获得 12个原代转基因小鼠 (9♀ ,3♂ ) ,整合率为 11.2 %。经ELISA和Westernblot鉴定 8只转基因母鼠乳汁中有hFIX的表达并拥有很高的凝血活性 ,其中一只的表达量高达5 2 .9mg/L ,其凝血活性亦高达 2 79.2 %。FISH实验表明不同的转基因小鼠外源基因整合于小鼠的不同染色体上。结果证明所构建的山羊 β 酪蛋白基因启动子乳腺表达载体能有效指导hFIX基因在小鼠乳腺中高效表达 ,并能保持hFIX的生物活性。
黄赞颜景斌黄缨孙琼肖艳萍黄英曾溢滔
关键词:山羊转基因小鼠
共1页<1>
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